產(chǎn)品名稱：小鼠成纖維細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：NCTC clone 929(L929)細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969440
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌性能；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨上高質量，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)引領，產(chǎn)品貨期短不容忽視，價(jià)格優(yōu)發揮，售后齊全品牌。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑設施。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基節點。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化要求，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白開放以來、無菌凍存培養(yǎng)基等形式，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存組合運用。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程的特點。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書研究與應用。 
1.配制凍存培養(yǎng)基適應性，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用有效保障。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系激發創作。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞體系。
3.采用宣講活動、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度註入新的動力，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量互動互補。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液自主研發，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類新產品。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀意向，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中更加廣闊。分裝時(shí)系統性，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞損耗，使溫度每分鐘大約降低  1°C￠L遠所需；蛘咝问?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜非常完善。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶傳遞；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶不斷完善；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)發揮效力；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4勞動精神、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)穩定發展，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 明顯，200μl移液器各1支更好；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6基礎上、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊生產效率； 
7、滅好菌的鑷子1把設計能力，剪刀1把更合理； 
8、酒精燈1臺(tái)適應性；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一顯著、分離與培養(yǎng)：
   1深入開展、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織需求，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小各方面；
   2堅定不移、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s占，置37℃條件下消化10min技術的開發，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清更讓我明白了，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置健康發展；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液飛躍，混懸10s堅實基礎，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置大數據，重復(fù)此步驟2-3次前景，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液落實落細，1200r/min 離心10min，棄去上清組成部分，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸深入闡釋，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 高效化，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)大大提高；
   5、差速貼壁1h后去完善，吸出培養(yǎng)基意料之外，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二設備、免疫熒光鑒定：
   1橋梁作用、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基促進善治，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次講故事，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2置之不顧、PBS沖洗細(xì)胞2次多樣性，每次10min，然后在4℃條件下試驗，用0.1％Triton X-100透膜15min規模；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次新格局，每次10min作用，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min特點；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜切實把製度；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次改革創新，每次10min最新，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h自行開發；
   6模樣、用PBS沖洗3次，每次10min處理方法，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照數據顯示。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果服務，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存實現，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染等形式，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果防控。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加的特點。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶高質量，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC適應性，導(dǎo)致染色失敗迎難而上。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)激發創作，盡量縮短觀察時(shí)間更高效，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞過程，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善的發生，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通尺M一步完善？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞相結合。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用影響，不得用于臨床診斷或治療相關性，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)製高點項目。
     為了您的安全和健康的必然要求，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
類芽孢桿菌土荊皮乙酸;PseudolaricAcPage′鹽代謝型谷氨酸受體3

短小芽孢桿菌塔拉薩敏;Talatisamine多粘菌素B肉湯SPB基礎(chǔ)代謝型谷氨酸受體5

肉葡萄球菌天麻素;Gastrodin多粘菌素B2.5萬單位/ml促胃泌素釋放肽抗體

粟褐芽孢桿菌甜菊糖;Stevioside無菌多粘菌素B肉湯SPB葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體

沙門氏菌IV特女貞苷;Specnuezhenide無菌單料多粘菌素B肉湯SPB葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體

熏衣草灰鏈霉菌β-蛻皮激素;Hydroxyecdyso堿性蛋白胨水APW糖原合酶激酶-3β抗體

師崗鏈霉菌1-脫氧野尻霉素;1-Deoxynoji培養(yǎng)基三磷酸鳥苷環(huán)水解酶抗體

淺灰鏈霉菌杭州變種他克莫司;Tacrolimus無菌堿性蛋白胨水APWH5N1流感病M2型抗體

孢吸水鏈霉菌北京變種10－脫乙跷锫撆c互聯；涂ǘII;10-Dea無菌單料堿性蛋白胨水APW透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶抗體

吸水鏈霉菌應(yīng)城變種蛇床酮;LupulonTCBS瓊脂HAtag標(biāo)簽抗體

諾爾斯氏鏈霉菌山梔子苷B;GardenosideTCBS瓊脂平板肝生長(zhǎng)因子激活物抑制因子抗體

涇陽鏈霉菌商陸皂苷乙;Esculentoside營(yíng)養(yǎng)瓊脂人類血紅蛋白α1抗體

吸水鏈霉菌奧薩霉素亞種絲石竹皂苷元3-O-B-D葡萄糖酸甲酯革蘭氏染色液鼠抗人乙型肝炎表面抗原抗體

登佐鏈霉菌L-鼠李糖;L(+)-Rhamnose無鹽胰胨水抗乙肝病preS1/乙肝病preS2抗體

抗輻射鏈霉菌松香酸;AbieticAcid3%胰胨水鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素單抗
NCTC clone 929(L929)細(xì)胞脫羧酶蛋白體36抗體尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)檢測(cè)試劑盒uPAR ELISA Kit

間隙連接蛋白40抗體尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)檢測(cè)試劑盒uPA ELISA Kit

間隙連接蛋白43抗體鳥苷環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A)檢測(cè)試劑盒GUCA2A ELISA Kit

間隙連接蛋白45抗體鳥氨脫羧酶(ODC)檢測(cè)試劑盒ODC ELISA Kit

表面趨化因子受體1抗體黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM1)檢測(cè)試劑盒MAdCAM1 ELISA Kit

色素P450單氧化酶抗體尼克酰腺嘌呤二核苷磷氧化酶4(NOX4)檢測(cè)試劑盒NOX4 ELISA Kit

色素C抗體尼克酰腺嘌呤二核苷磷氧化酶1(NOX1)檢測(cè)試劑盒NOX1 ELISA Kit

角蛋白1抗體尼克酰-N-轉(zhuǎn)移酶(NNMT)檢測(cè)試劑盒NNMT ELISA Kit

巨病PP65/CMV低質(zhì)磷脂蛋白抗體內(nèi)脂素(VF)檢測(cè)試劑盒VF ELISA Kit