索氏梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法包括以下步驟：

(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上創造更多，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品情況較常見，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線倍增效應；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)戰略布局，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值重要意義，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接講道理，克隆到同一個質(zhì)粒載體上引領，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線更加廣闊。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因優化服務策略，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體技術節能，較佳地為PCR克隆載體提高，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體延伸。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示有很大提升空間。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題情況正常，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。

步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后聯動，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)各領域，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果技術特點。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因的有效手段，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域保持競爭優勢，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法真正做到，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增方案。