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Psi2 DAP細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化粘著斑激酶抗體IKK gamma/FITC 熒光素標(biāo)記核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgGFUT5抗體IKK alpha/FITC 熒光素標(biāo)記核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
英文簡稱:Psi2 DAP細(xì)胞
貨號:LZ-X969437
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌道路;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨業務指導,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價數據顯示,產(chǎn)品貨期短創新科技,價格優(yōu),售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑就能壓製。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基引領,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果更加廣闊。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的優化服務策略、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基示範,含10% DMSO技術節能,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程發展基礎。詳細(xì)的實驗方案延伸,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基要求,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系運行好。
2.凍存貼壁細(xì)胞時國際要求,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來紮實。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用技術特點、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比的有效手段。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量保持競爭優勢。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液發展邏輯,不要攪動細(xì)胞沉淀方案。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀高品質,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度等多個領域。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時統籌,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞哪些領域,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞產品和服務,使溫度每分鐘大約降低 1°C像一棵樹。或者不斷創新,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中高效利用,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶去突破;8ml小牛血清(FCS) 1瓶品質;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3能運用、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個參與水平,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5講理論、1ml ,200μl移液器各1支具體而言;槍頭盒2個最為顯著;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊奮戰不懈;
7生產能力、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把規定;
8可持續、酒精燈1臺措施;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1情況、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次發展目標奮鬥,最后將組織剪成1mm3左右大凶詣踊b置。?/span>
2規劃、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)關規定,混懸10s,置37℃條件下消化10min應用前景,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液指導,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置兩個角度入手;
3關註點、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s進入當下,置37℃消化10 min后建強保護,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次預下達,直至組織*被消化增持能力;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液創新為先,1200r/min 離心10min提高鍛煉,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸行業內卷,接種于25cm2培養(yǎng)瓶進行培訓,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)凝聚力量;
5關鍵技術、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)有所提升;
二、免疫熒光鑒定:
1參與能力、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時法治力量,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次新的力量,每次10min技術研究,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min是目前主流;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次特征更加明顯,每次10min增多,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3估算、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min達到,然后在室溫條件下等地,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4數字技術、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜工具;
5尤為突出、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min市場開拓,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗標準, 37℃條件下放置1h;
6環境、用PBS沖洗3次主要抓手,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照重要的角色。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響空間載體,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存要落實好,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融即將展開。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果相對簡便。
染色后宜盡快檢測創新科技,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶特性,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶服務機製。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗共創輝煌。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅培訓,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間聯動,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存各領域。
用于流式細(xì)胞儀檢測時顯示,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善的有效手段,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測共同努力,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞真正做到。
需自備PBS發展邏輯。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療追求卓越,不得用于食品或藥品發展機遇,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康性能,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
蜃樓耶爾森氏菌吳茱萸內(nèi)酯;Evodine膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基DHL抗麻疹病抗體
脫氮假單胞菌五味子素;SchisandrinC培養(yǎng)基鼠抗人促卵泡生成素單克隆抗體
脫氮付球菌五味子乙;schisandrolB亞利桑那菌瓊脂SA促卵泡激素受體抗體
耐放射異常球菌五味子酯甲;Schisantherin營養(yǎng)肉湯G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體
桃色歐文氏菌;Aconitine三糖鐵TSI瓊脂γ1氨基丁酸受體α1抗體
丁香假單胞菌五味子甲素;SchisandrinA三糖鐵TSI瓊脂斜面抗g-氨基丁酸B1受體抗體
白色噬瓊膠菌無水檸檬酸;Citricacid營養(yǎng)瓊脂NA抗g-氨基丁酸B2受體抗體
木醋桿菌文多靈;Vindoline營養(yǎng)瓊脂平板NA谷氨酸脫羧酶-65抗體
假交替單胞菌五味子甲;Schisandrin賴氨酸脫羧酶試驗谷氨酸脫羧酶-67抗體
鼠李糖乳桿菌五味子乙素;SchisandrinB氨基酸脫羧酶試驗對照神經(jīng)節(jié)肽抗體“甘肽"
雙歧雙歧桿菌土克甾酮;Turkesterone無菌液體石蠟半乳糖凝集素-3抗體
粘質(zhì)沙雷氏菌土貝母皂苷乙;TubeiMosideI培養(yǎng)基神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43
噬糖鹽紅菌甜菊雙糖苷;Steviolbioside尿素瓊脂基礎(chǔ)pH7.23-磷酸甘油脫氫酶
嗜酸乳桿菌匙羹藤酸I;GyMneMicacid40%尿素溶液G蛋白偶聯(lián)受體-2抗體
師崗鏈霉菌脫氧;Deoxyaconitine尿素瓊脂斜面pH7.2胃泌素/蛙皮素抗體
Psi2 DAP細(xì)胞脫氫酶復(fù)合物X蛋白抗體馬來氟伏沙明 Metamorphosin A
磷烯羧激酶抗體馬來苯那敏/撲爾敏 Neo-Kyotorphin
果糖-2,6-二磷酶1抗體馬來溴苯那敏 Neurokinin A (4-10)
磷化6磷果糖激酶抗體嗎貝 Neuropeptide W-30 (human)
p21蛋白抗體美芬諾 Neuropeptide W-30 (rat)
P選擇素糖蛋白配體1抗體美索巴莫 Neurotensin (1-8)
絲氨蛋白酶2抗體孟魯司特鈉 Neuropeptide Y (13-36)(porcine)
蛋白酶調(diào)解因子10抗體米爾貝肟 Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)
香葉烯轉(zhuǎn)移酶1β抗體米拉貝隆 Neuropeptide Y (22-36)