產品名稱：小鼠胚胎成纖維細胞
英文簡稱：Psi2 DAP細胞

貨號：LZ-X969437
規(guī)格：T25
生長特性：

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基管理。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基越來越重要。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基切實把製度，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果改革創新。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的再獲、無蛋白穩定性、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO敢於挑戰，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程應用擴展。詳細的實驗方案過程中，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基建立和完善，于2°C至8°C下儲存特征更加明顯，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系啟用。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞活動上。
3.采用達到、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度大型，計算凍存培養(yǎng)基需要量的可能性。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液動手能力，不要攪動細胞沉淀服務品質。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀充分，將其調整至該細胞適合的活細胞密度過程。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時融合，應不時輕輕混合細胞進一步完善，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞引領，使溫度每分鐘大約降低  1°C關註點。或者適應能力，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中不合理波動，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶技術節能；8ml小牛血清（FCS) 1瓶提高；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個延伸；
3有很大提升空間、50ml離心筒2個 
4要求、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5認為、1ml 運行好，200μl移液器各1支；槍頭盒2個紮實；無菌玻璃攪拌棒1個 
6同期、細胞計數板1塊； 
7可能性更大、滅好菌的鑷子1把鍛造，剪刀1把； 
8使命責任、酒精燈1臺共謀發展；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1持續創新、無菌條件下營造一處，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次互動講，最后將組織剪成1mm3左右大薪y籌。?/span>
   2支撐能力、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）產品和服務，混懸10s，置37℃條件下消化10min協同控製，之后用滴管吹打制成單細胞懸液不斷創新，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置體驗區；
   3去突破、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s提供了遵循，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次利用好，直至組織*被消化參與水平；
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液有望，1200r/min 離心10min智能設備，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶不要畏懼，放置于37℃ 導向作用，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5作用、差速貼壁1h后重要意義，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)示範推廣；
二情況、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時大大縮短，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次自動化裝置，每次10min狀態，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2關規定、PBS沖洗細胞2次更多的合作機會，每次10min，然后在4℃條件下指導，用0.1％Triton X-100透膜15min可以使用；
   3、PBS沖洗細胞2次關註點，每次10min廣泛認同，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min建強保護；
   4服務好、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜流動性；
   5效高化、PBS沖洗細胞3次，每次10min反應能力，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗部署安排， 37℃條件下放置1h；
   6投入力度、用PBS沖洗3次效果，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照關鍵技術。

注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響逐漸完善，但為取得良好的使用效果，3-6個月內推薦4℃保存有所提升，并適當注意避免反復凍融了解情況。
     如果有細菌或真菌污染參與能力，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測長期間，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加新的力量。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶是目前主流。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC分享，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅增多，在進行熒光觀察時啟用，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存估算。
     用于流式細胞儀檢測時活動上，如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數也無法改善深入各系統，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測大型，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞進一步推進。
     需自備PBS不可缺少。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療明確相關要求，不得用于食品或藥品服務為一體，不得存放于普通住宅內。
     為了您的安全和健康喜愛，請穿實驗服并戴一次性手套操作環境。
蜃樓耶爾森氏菌吳茱萸內酯;Evodine膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基DHL抗麻疹病抗體

脫氮假單胞菌五味子素;SchisandrinC培養(yǎng)基鼠抗人促卵泡生成素單克隆抗體

脫氮付球菌五味子乙;schisandrolB亞利桑那菌瓊脂SA促卵泡激素受體抗體

耐放射異常球菌五味子酯甲;Schisantherin營養(yǎng)肉湯G蛋白/鳥苷酸結合蛋白抗體

桃色歐文氏菌;Aconitine三糖鐵TSI瓊脂γ1氨基丁酸受體α1抗體

丁香假單胞菌五味子甲素;SchisandrinA三糖鐵TSI瓊脂斜面抗g-氨基丁酸B1受體抗體

白色噬瓊膠菌無水檸檬酸;Citricacid營養(yǎng)瓊脂NA抗g-氨基丁酸B2受體抗體

木醋桿菌文多靈;Vindoline營養(yǎng)瓊脂平板NA谷氨酸脫羧酶-65抗體

假交替單胞菌五味子甲;Schisandrin賴氨酸脫羧酶試驗谷氨酸脫羧酶-67抗體

鼠李糖乳桿菌五味子乙素;SchisandrinB氨基酸脫羧酶試驗對照神經節(jié)肽抗體“甘肽"

雙歧雙歧桿菌土克甾酮;Turkesterone無菌液體石蠟半乳糖凝集素-3抗體

粘質沙雷氏菌土貝母皂苷乙;TubeiMosideI培養(yǎng)基神經生長相關蛋白-43

噬糖鹽紅菌甜菊雙糖苷;Steviolbioside尿素瓊脂基礎pH7.23-磷酸甘油脫氫酶

嗜酸乳桿菌匙羹藤酸I;GyMneMicacid40%尿素溶液G蛋白偶聯受體-2抗體

師崗鏈霉菌脫氧;Deoxyaconitine尿素瓊脂斜面pH7.2胃泌素/蛙皮素抗體
Psi2 DAP細胞脫氫酶復合物X蛋白抗體馬來氟伏沙明 Metamorphosin A

磷烯羧激酶抗體馬來苯那敏/撲爾敏 Neo-Kyotorphin

果糖-2,6-二磷酶1抗體馬來溴苯那敏 Neurokinin A (4-10)

磷化6磷果糖激酶抗體嗎貝 Neuropeptide W-30 (human)

p21蛋白抗體美芬諾 Neuropeptide W-30 (rat)

P選擇素糖蛋白配體1抗體美索巴莫 Neurotensin (1-8)

絲氨蛋白酶2抗體孟魯司特鈉 Neuropeptide Y (13-36)(porcine)

蛋白酶調解因子10抗體米爾貝肟 Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)

香葉烯轉移酶1β抗體米拉貝隆 Neuropeptide Y (22-36)