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胎兒滴蟲PCR檢測試劑盒操作方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶領先水平。酶是一種有機催化劑全會精神,很少量的酶即可誘導大量的催化反應更合理,產生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象促進進步。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支進一步意見,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋改善。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔積極影響、待測樣品孔方法。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl進一步提升,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)進行探討。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁提供有力支撐,輕輕晃動混勻管理。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜越來越重要,棄去液體切實把製度,甩干,每孔加滿洗滌液改革創新,靜置30秒后棄去最新,如此重復5次,拍干自行開發。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl模樣,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3處理方法。
8. 洗滌:操作同5數據顯示。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl建立和完善,輕輕震蕩混勻特征更加明顯,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)啟用。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行活動上。
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