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人饑餓素ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔同期,在di一用的舒心、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl業務,然后在di一核心技術體系、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl自主研發,混勻;然后從di一孔新產品、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔意向,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl更加廣闊,混勻系統性;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中損耗,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul長遠所需,混勻形式;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七非常完善、第八孔中傳遞,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl不斷完善,混勻后從第七發揮效力、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl穩定發展,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉方便。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L效果,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/服務水平,15 ng/L)線上線下。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)能力建設、待測樣品孔知識和技能。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)醒悟。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部深入開展,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻需求。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜各方面,棄去液體堅定不移,甩干,每孔加滿洗滌液占,靜置30秒后棄去技術的開發,如此重復(fù)5次,拍干更讓我明白了。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl健康發展,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3飛躍。
8. 洗滌:操作同5堅實基礎。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl大數據,輕輕震蕩混勻逐步改善,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零落實落細,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘組成部分。
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