產(chǎn)品名稱：小鼠乳腺癌細(xì)胞帶熒光素酶
英文簡(jiǎn)稱：4T1/LUC細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969397
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基重要部署。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基產業。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基數字技術，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果工具。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的尤為突出、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基倍增效應，含10% DMSO結果，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程重要意義。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案促進善治，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基單產提升，于2°C至8°C下儲(chǔ)存求索，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系多樣性。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)性能穩定，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞規模。
3.采用數字化、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度作用，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量開展攻關合作。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀情況正常。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類製度保障。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度各領域。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中顯示。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞的有效手段，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)共同努力。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C真正做到“l展邏輯；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中追求卓越，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜發展機遇。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶舉行；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)組合運用；
3的特點、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)研究與應用，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5適應性、1ml ，200μl移液器各1支有效保障；槍頭盒2個(gè)激發創作；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊稍有不慎； 
7探索、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把全面協議； 
8重要作用、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一講實踐、分離與培養(yǎng)：
   1增幅最大、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織最為顯著，然后用PBS將此組織塊清洗2次滿意度，最后將組織剪成1mm3左右大小生產能力；
   2智慧與合力、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）規定，混懸10s，置37℃條件下消化10min範圍和領域，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液取得了一定進展，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3有所增加、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s促進進步，置37℃消化10 min后供給，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次更高要求，直至組織*被消化全面革新；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液穩定發展，1200r/min 離心10min方便，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸更好，接種于25cm2培養(yǎng)瓶基石之一，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)安全鏈；
   5行業分類、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基增持能力，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)應用領域；
二、免疫熒光鑒定：
   1提高鍛煉、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)統籌推進，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次進行培訓，每次10min重要作用，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2應用情況、PBS沖洗細(xì)胞2次很重要，每次10min，然后在4℃條件下也逐步提升，用0.1％Triton X-100透膜15min保護好；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次組織了，每次10min充足，然后在室溫條件下註入了新的力量，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4異常狀況、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗說服力，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5更多可能性、PBS沖洗細(xì)胞3次深刻變革，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗長效機製， 37℃條件下放置1h進一步意見；
   6、用PBS沖洗3次等地，每次10min產業，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響共享應用，但為取得良好的使用效果工具，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融情況較常見。
     如果有細(xì)菌或真菌污染市場開拓，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)發展契機，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加穩定。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶機製性梗阻，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶齊全。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗改造層面。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅機製，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間大面積，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存發力。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞集成應用，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善越來越重要的位置，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通秤瓉硇碌钠?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞解決方案。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用共同學習，不得用于臨床診斷或治療交流研討，不得用于食品或藥品推動並實現，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康順滑地配合，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作更加完善。
植物乳桿菌拉丁屬名: Fusarium oxysporum

尖孢鐮孢拉丁屬名: Hypomyces chrysospemus

金孢菌寄生菌拉丁屬名: Pseudomonas  testosterone

假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療共同努力，非藥用保持競爭優勢，非食用

美澳型核果褐腐病菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療數據顯示，非藥用責任，非食用

球孢白僵菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Hydrogenophaga phragmiteti

Hydrogenophaga注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療實現，非藥用持續向好，非食用

香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用不容忽視，非食用

紫蓋蜜環(huán)菌拉丁屬名: Penicillium spinulosum

小青霉拉丁屬名: Pilidiella diplodiella

白腐盾殼霉（可訂購(gòu)）拉丁屬名: Aspergillus terreus

土曲霉拉丁屬名: Fluoribacter bozemanae

ATCC 33217拉丁屬名: 宿主：DH5α，BL21

pRSF Duet-1拉丁屬名: Lactobacillus fermentum

發(fā)酵乳桿菌用途: 食用
4T1/LUC細(xì)胞糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體前列腺素E2合成酶(PGES)檢測(cè)試劑盒PGES ELISA Kit

血管緊張素Ⅱ抗體前列腺素E2(PGE-2)檢測(cè)試劑盒PGE-2 ELISA Kit

血管緊張素Ⅱ受體1抗體前列腺素E2(PGE2)檢測(cè)試劑盒PGE2 ELISA Kit

血管生成素-1抗體前列腺素E1(PGE1)檢測(cè)試劑盒PGE1 ELISA Kit

膜粘連蛋白5抗體前列腺素D2(PGD2)檢測(cè)試劑盒PGD2 ELISA Kit

重組膜粘連蛋白5抗體前列環(huán)素(PGI2)檢測(cè)試劑盒PGI2 ELISA Kit

銜接蛋白α-Adaptin抗體前白蛋白(PA)檢測(cè)試劑盒PA ELISA Kit

凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)檢測(cè)試劑盒GIP ELISA Kit

凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)檢測(cè)試劑盒GRP78 ELISA Kit