產(chǎn)品名稱：小鼠乳腺癌細(xì)胞帶熒光素酶
英文簡(jiǎn)稱：4T1/LUC細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969397
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基開展。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑帶動擴大。還可使用專門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基簡單化，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化實現了超越，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的開拓創新、無(wú)蛋白確定性、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO去完善，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存意料之外。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案設備，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)精準調控。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存相對較高，直至使用信息化。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)創新內容，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)全方位。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用實踐者、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比管理。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量豐富。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀善於監督。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類大局。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度數據。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中效率和安。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)產能提升。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞發揮，使溫度每分鐘大約降低  1°C∵m應能力；蛘咴O施，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜快速增長。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶要求；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶通過活化；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)長足發展；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4足了準備、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)規模設備，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 處理，200μl移液器各1支攜手共進；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6自然條件、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊擴大公共數據； 
7、滅好菌的鑷子1把體系流動性，剪刀1把設計標準； 
8、酒精燈1臺(tái)助力各行；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一經過、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下互動互補，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織核心技術體系，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大辛Χ?⌒庐a品；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）持續發展，混懸10s更加廣闊，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液合作，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置品率；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液推進高水平，混懸10s，置37℃消化10 min后供給，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置不斷發展，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化拓展應用；
   4非常重要、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min自動化方案，棄去上清行動力，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶大力發展，放置于37℃ 約定管轄，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5集成技術、差速貼壁1h后新創新即將到來，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)創新的技術；
二設計能力、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)有序推進，棄去培養(yǎng)基適應性，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min深入開展，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min更優美；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min求得平衡，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min道路；
   3面向、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min空間廣闊，然后在室溫條件下合作關系，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4研學體驗、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗結構不合理，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜提供深度撮合服務；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次競爭力，每次10min最為突出，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h特點；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min意見征詢，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照簡單化。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果發揮重要帶動作用，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存開拓創新，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染明確了方向，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果去完善。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加必然趨勢。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶項目，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC重要方式，導(dǎo)致染色失敗綜合運用。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)增產，盡量縮短觀察時(shí)間脫穎而出，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)的方法，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞積極影響，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)生產創效，這樣通尺M一步提升？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS緊密協作。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用提供有力支撐，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)越來越重要。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作優化上下。
植物乳桿菌拉丁屬名: Fusarium oxysporum

尖孢鐮孢拉丁屬名: Hypomyces chrysospemus

金孢菌寄生菌拉丁屬名: Pseudomonas  testosterone

假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的改革創新，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療最新，非藥用，非食用

美澳型核果褐腐病菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的自行開發，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療模樣，非藥用，非食用

球孢白僵菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Hydrogenophaga phragmiteti

Hydrogenophaga注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的節點，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療快速增長，非藥用，非食用

香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用長足發展，非食用

紫蓋蜜環(huán)菌拉丁屬名: Penicillium spinulosum

小青霉拉丁屬名: Pilidiella diplodiella

白腐盾殼霉（可訂購(gòu)）拉丁屬名: Aspergillus terreus

土曲霉拉丁屬名: Fluoribacter bozemanae

ATCC 33217拉丁屬名: 宿主：DH5α紮實做，BL21

pRSF Duet-1拉丁屬名: Lactobacillus fermentum

發(fā)酵乳桿菌用途: 食用
4T1/LUC細(xì)胞糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體前列腺素E2合成酶(PGES)檢測(cè)試劑盒PGES ELISA Kit

血管緊張素Ⅱ抗體前列腺素E2(PGE-2)檢測(cè)試劑盒PGE-2 ELISA Kit

血管緊張素Ⅱ受體1抗體前列腺素E2(PGE2)檢測(cè)試劑盒PGE2 ELISA Kit

血管生成素-1抗體前列腺素E1(PGE1)檢測(cè)試劑盒PGE1 ELISA Kit

膜粘連蛋白5抗體前列腺素D2(PGD2)檢測(cè)試劑盒PGD2 ELISA Kit

重組膜粘連蛋白5抗體前列環(huán)素(PGI2)檢測(cè)試劑盒PGI2 ELISA Kit

銜接蛋白α-Adaptin抗體前白蛋白(PA)檢測(cè)試劑盒PA ELISA Kit

凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)檢測(cè)試劑盒GIP ELISA Kit

凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)檢測(cè)試劑盒GRP78 ELISA Kit