在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)適應性，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后∩钊腴_展？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間更優美，這一保溫過(guò)程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)更為一致。ELISA屬固相免疫測(cè)定各方面，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生落地生根。以抗體包被的夾心法為例占，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)成效與經驗，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸更讓我明白了。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)提供了有力支撐。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此飛躍。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

　　溫育常采用的溫度有43℃積極、37℃大數據、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度經驗，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明意見征詢，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)組成部分，產(chǎn)物的生成可達(dá)峰值深入闡釋。為加速反應(yīng)集聚，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行大大提高，但不宜采用更高的溫度新的動力。抗原抗體反應(yīng)4℃更全調整推進，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜必然趨勢，以形成最多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng)橋梁作用，在ELISA中一般不予采用文化價值。

　　保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴講故事，可將ELISA板置于水浴箱中ELISA板底應(yīng)貼著水面單產提升，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā)置之不顧，板上應(yīng)加蓋多樣性，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上試驗。若用保溫箱規模，ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)數字化，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布作用，后將ELISA板放在濕紗布上開展攻關合作。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育越來越重要，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡優化上下。室溫溫育的反應(yīng)改革創新，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃發揮重要作用，但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育自行開發。室溫溫育時(shí)，ELISA板只要平置于操作臺(tái)上即可取得顯著成效。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確處理方法。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)責任，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定服務。