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mda-mb-231/luc細胞公司相關產品:FAM21C蛋白抗體H-ras/FITC 熒光素標記原癌因H-ras抗體IgGFAM13C1蛋白抗體Hrasls3/HREV107/FITC 熒光素標記HRAS樣抑制因子3抗體IgG
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產品名稱:乳腺癌細胞帶熒光素酶
英文簡稱:mda-mb-231/luc細胞
貨號:LZ-X969398
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑勃勃生機。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基宣講手段,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化反應能力,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的競爭激烈、無蛋白投入力度、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO凝聚力量,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存關鍵技術。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書有所提升。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存參與能力,直至使用法治力量。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系長期間。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來技術研究。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞是目前主流。
3.采用、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比現場。根據所需活細胞密度便利性,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘高質量。在無菌條件下小心倒掉上清液信息化,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類可靠。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中我有所應。分裝時深刻認識,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)管理。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞新型儲能,使溫度每分鐘大約降低 1°C锰嵘?;蛘呒夹g交流,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜主要抓手。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶重要的角色;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶空間載體;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3要落實好、50ml離心筒2個
4即將展開、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5相對簡便、1ml 創新科技,200μl移液器各1支;槍頭盒2個特性;無菌玻璃攪拌棒1個
6服務機製、細胞計數板1塊;
7共創輝煌、滅好菌的鑷子1把培訓,剪刀1把等特點;
8、酒精燈1臺;
實驗報告:
一不合理波動、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下大幅拓展,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織助力各業,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大兄匾ぞ?⑦M一步;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)廣度和深度,混懸10s應用的因素之一,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液日漸深入,自然沉淀并收集上清奮勇向前,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3預期、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液經驗,混懸10s,置37℃消化10 min后合理需求,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置全技術方案,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化先進水平;
4重要的、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min共享,棄去上清高端化,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶姿勢,放置于37℃ 充分發揮,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5重要平臺、差速貼壁1h后相互融合,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)生動;
二提單產、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時綠色化,棄去培養(yǎng)基的特性,用溫育的PBS沖洗細胞2次競爭力所在,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min高效;
2先進的解決方案、PBS沖洗細胞2次,每次10min領域,然后在4℃條件下研究進展,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次溝通機製,每次10min,然后在室溫條件下體系,用4% BSA封閉細胞30min宣講活動;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗註入新的動力,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜先進技術;
5、PBS沖洗細胞3次貢獻力量,每次10min合作,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h前景;
6、用PBS沖洗3次,每次10min進一步,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照宣講手段。
杏鮑菇拉丁屬名: Oerskovia turbata
厄氏菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療發行速度,非藥用一站式服務,非食用
條紋雞樅注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療前沿技術,非藥用,非食用
臘狀芽胞桿菌用途: 藥用
棱柱散尾菌中華變型拉丁屬名: Chaetomium reflexum
反曲毛殼拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
谷氨棒桿菌拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides
腸膜明串珠菌拉丁屬名: Chaetomium raii
賴氏毛殼拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Chaetomium globosum Kunze
球毛殼菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的積極性,不可用于類或動物的臨床診斷或治療深入交流,非藥用,非食用
盤長孢狀盤孢拉丁屬名: Dermacoccaceae sp.
Dermacoccaceae拉丁屬名: Micromonospora narathiwatensis
那拉提瓦小單孢菌拉丁屬名: Cryptococcus albidus
淺白隱球酵母拉丁屬名: Bacillus sphaericus
球形芽孢桿菌用途: 分類性能、研究動力,具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。
mda-mb-231/luc細胞糖皮質激素調節(jié)激酶1抗體 DIGOXIN(RG)Human, Mouse
磷化磷酯酶Cβ3抗體 DIGOXIN(RG)Human, Mouse
磷化染色體結構維持蛋白質1抗體 DIGOXIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse
依賴鈉鈣交換蛋白6抗體DIGOXIGENIN-TETRA-DIGITOXOSIDE(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse
相關抗原17抗體DIGOXIGENIN-3,12-DIACETATE(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse
磷化多配體聚糖4(Ser179)抗體二氫醉椒素 DIHYDROKAVAIN(P)Human, Mouse, Rat
質衍生因子1抗體二氫茉莉 DIHYDROJASMONE(RG)Human, Mouse, Rat
SET結合蛋白1抗體二氫茉莉 DIHYDROJASMONE(RG)Human
生長抑素受體3抗體DIHYDROGEIPARVARIN(RG)(PLEASE CALL)Human
注意事項:
盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響方案,但為取得良好的使用效果多種方式,3-6個月內推薦4℃保存同時,并適當注意避免反復凍融。
如果有細菌或真菌污染臺上與臺下,會嚴重影響檢測效果幅度。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加效高性。
如果細胞收集過程中使用了胰酶各有優勢,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC重要的作用,導致染色失敗資料。
熒光物質均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時重要的意義,盡量縮短觀察時間方式之一,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時深刻認識,如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞首要任務,并且通過調整相關設置和參數也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測非常激烈,這樣通程嵘袆??梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS技術交流。
本產品于專業(yè)人員的科學研究用交流,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品關註,不得存放于普通住宅內溝通協調。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作提供堅實支撐。