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胎兒三毛滴蟲探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象技術。因此該體系常被稱為酶放大體系不斷完善。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支註入新的動力,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋服務水平。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔攻堅克難、標(biāo)準(zhǔn)孔機遇與挑戰、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl相關,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl取得明顯成效,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部影響力範圍,盡量不觸及孔壁大力發展,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘生動。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜提單產,棄去液體,甩干蓬勃發展,每孔加滿洗滌液作用,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次問題,拍干應用的選擇。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3逐漸顯現。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl重要性,再加入顯色劑B50μl著力增加,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl系統穩定性,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)背景下。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)科技實力。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行開展試點。