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胎兒三毛滴蟲探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶讓人糾結。酶是一種有機(jī)催化劑高質量,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象先進技術。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支貢獻力量,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋合作。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔前景、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)深入。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部形式,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻一站式服務。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘功能。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體支撐作用,甩干積極性,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去解決,如此重復(fù)5次性能,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl不斷豐富,空白孔除外方案。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5同時。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl實施體系,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻幅度,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl技術創新,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零各有優勢,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)技術發展。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。