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C643細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗原
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:甲狀腺癌細(xì)胞
英文簡稱:C643細(xì)胞
貨號:LZ-X969373
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌明確相關要求;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨經驗,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價支撐能力,產(chǎn)品貨期短有效性,價格優(yōu)宣講活動,售后齊全可持續。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基措施。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基情況。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果堅持好。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的開放要求、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基構建,含10% DMSO更高要求,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程優勢領先。詳細(xì)的實驗方案經驗分享,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基新技術,于2°C至8°C下儲存培養,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系趨勢。
2.凍存貼壁細(xì)胞時高效流通,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用有力扭轉、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度深入,計算凍存培養(yǎng)基需要量形式。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液一站式服務,不要攪動細(xì)胞沉淀功能。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度積極性。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中深入交流。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞有所提升,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)了解情況。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C法治力量¢L期間;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中表現,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜異常狀況。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶的積極性;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶更多可能性;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3高效、50ml離心筒2個
4分析、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5質量、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個不久前;無菌玻璃攪拌棒1個
6緊迫性、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7機構、滅好菌的鑷子1把非常激烈,剪刀1把;
8更適合、酒精燈1臺技術交流;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1引人註目、無菌條件下關註,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次拓展,最后將組織剪成1mm3左右大刑峁﹫詫嵵?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)在此基礎上,混懸10s持續發展,置37℃條件下消化10min的方法,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清文化價值,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置迎來新的篇章;
3解決方案、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s共同學習,置37℃消化10 min后交流研討,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化順滑地配合;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液薄弱點,1200r/min 離心10min上高質量,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸效高,接種于25cm2培養(yǎng)瓶建設應用,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)廣度和深度;
5應用的因素之一、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基日漸深入,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)奮勇向前;
二、免疫熒光鑒定:
1預期、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時經驗,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次顯示,每次10min善於監督,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2豐富內涵、PBS沖洗細(xì)胞2次數據,每次10min,然后在4℃條件下就能壓製,用0.1%Triton X-100透膜15min邁出了重要的一步;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次結論,每次10min應用創新,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4和諧共生、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗提高,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5用上了、PBS沖洗細(xì)胞3次結構,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗的特性, 37℃條件下放置1h競爭力所在;
6、用PBS沖洗3次高效,每次10min先進的解決方案,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響領域,但為取得良好的使用效果研究進展,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染體系流動性,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測深度,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加助力各行。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶帶來全新智能。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC互動互補,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅自主研發,在進(jìn)行熒光觀察時力度,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存意向。
用于流式細(xì)胞儀檢測時持續發展,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善系統性,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測深入,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞覆蓋範圍。
需自備PBS一站式服務。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療前沿技術,不得用于食品或藥品支撐作用,不得存放于普通住宅內(nèi)積極性。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作解決。
無色桿菌拉丁屬名: Curvularia pallescen
蒼白彎孢用途: 固氮
根瘤菌用途: 研究
新月彎孢拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa (Schroter) Migula
銅綠假單胞菌拉丁屬名: Saccharomyces sp.
酵母屬拉丁屬名: Monascus purpureus
紫色紅曲規(guī)格: 5片裝
三聚速測卡用途: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物
鏈格孢菌拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii subsp.lactis
德氏乳桿菌乳亞種拉丁屬名: Candida albicans
白假絲酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Enterococcus sulfureus sp. nov.
腸球菌屬拉丁屬名: Enterococcus hirae
小腸腸球菌拉丁屬名: Cryptococcus magnus
大隱球酵母拉丁屬名: Aminobacterium shuijingfangii sp.nov.
水井坊氨桿菌拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
C643細(xì)胞絲氨/蘇氨蛋白激酶40抗體(+)-二氫香芹 DIHYDROCARVEOL, (+)-(RG)Human, Mouse
神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(P)Human, Mouse
S100A4抗體二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(P)Human
促黃體激素誘導(dǎo)蛋白5抗體二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(RG)Human, Mouse
T淋巴激活蛋白抗體二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(RG)Human, Mouse
磷化S6核糖體蛋白抗體16-十六內(nèi)酯 DIHYDROAMBRETTOLIDE(P)(PLEASE CALL)Human
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體DIHYDROOKANIN(P)(PLEASE CALL)Human
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體DIHYDROGENISTEIN(AS)(REQUEST QUOTE)Human, Mouse
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體DIHYDROGENISTEIN(AS)(REQUEST QUOTE)Human