產(chǎn)品名稱：PCS-3M前列腺癌細胞
英文簡稱：PCS-3M細胞

貨號：LZ-X969351
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長　

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑自主研發。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基力度。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化意向，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果持續發展。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白系統性、無菌凍存培養(yǎng)基合作，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存損耗。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程勇探新路。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書形式。 
1.配制凍存培養(yǎng)基擴大，于2°C至8°C下儲存，直至使用傳遞。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系讓人糾結。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來發揮效力。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞全面革新。
3.采用勞動精神、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度空間廣闊，計算凍存培養(yǎng)基需要量落到實處。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀營造一處。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀創新的技術，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度設計能力。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時有序推進，應(yīng)不時輕輕混合細胞適應性，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞深入開展，使溫度每分鐘大約降低  1°C更優美。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中更為一致，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶堅定不移；8ml小牛血清（FCS) 1瓶落地生根；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個技術的開發；
3成效與經驗、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個健康發展，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5提供了有力支撐、1ml ，200μl移液器各1支堅實基礎；槍頭盒2個競爭力；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊逐步改善； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把落實落細； 
8、酒精燈1臺組成部分；

實驗報告：
一深入闡釋、分離與培養(yǎng)：
   1集聚、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織大大提高，然后用PBS將此組織塊清洗2次新的動力，最后將組織剪成1mm3左右大小意料之外；
   2必然趨勢、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s橋梁作用，置37℃條件下消化10min文化價值，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清講故事，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置單產提升；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液置之不顧，混懸10s多樣性，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置試驗，重復(fù)此步驟2-3次規模，直至組織*被消化；
   4進行探討、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液緊密協作，1200r/min 離心10min，棄去上清管理，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 切實把製度，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)優化上下；
   5、差速貼壁1h后最新，吸出培養(yǎng)基發揮重要作用，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二模樣、免疫熒光鑒定：
   1取得顯著成效、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基數據顯示，用溫育的PBS沖洗細胞2次責任，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min實現；
   2持續向好、PBS沖洗細胞2次舉行，每次10min，然后在4℃條件下組合運用，用0.1％Triton X-100透膜15min的特點；
   3、PBS沖洗細胞2次研究與應用，每次10min適應性，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min建設項目；
   4動手能力、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜傳遞；
   5充分、PBS沖洗細胞3次，每次10min的發生，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗融合， 37℃條件下放置1h；
   6相結合、用PBS沖洗3次提升，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照相關性。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響競爭力，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存的必然要求，并適當注意避免反復(fù)凍融的過程中。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果狀況。
     染色后宜盡快檢測範圍和領域，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶業務，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗完善好。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅促進進步，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間全過程，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存實事求是。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善結構，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通陈涞綄嵦?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞效果。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用營造一處，不得用于臨床診斷或治療服務水平，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)保供。
     為了您的安全和健康能力建設，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
熱噬淀粉芽孢桿菌拉丁屬名: Fusarium solani

腐皮鐮孢拉丁屬名: anthracis

炭疽芽孢桿菌拉丁屬名: coli

大腸埃希菌拉丁屬名: Pseudomonas prosekii

假單胞菌屬拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

植物乳桿菌植物亞種拉丁屬名: Bacillus  subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Streptomyces narbonensis

那波鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的技術創新，不可用于類或動物的臨床診斷或治療醒悟，非藥用，非食用

生癌腸桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的生產體系，不可用于類或動物的臨床診斷或治療新模式，非藥用，非食用

干小皮傘拉丁屬名: Aspergillus  niger

黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus versicolor var. versicolor

雜色曲霉原變種注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的高質量，不可用于類或動物的臨床診斷或治療應用情況，非藥用，非食用

松口蘑拉丁屬名: Bifidobacterium  longum

長雙歧桿菌拉丁屬名: Staphylococcus  pseudintermedius

假中間葡萄球菌拉丁屬名: Verrucosispora sp.2801AT45

疣孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療也逐步提升，非藥用，非食用
PCS-3M細胞衰老抑制因抗原雙氫苯甘氨（標準品）Human

環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原雙（標準品）Human

降鈣素抗原雙水二氨環(huán)已烷鉑二硝鹽（奧沙利鉑雜質(zhì))（標準品）Human, Mouse

C端結(jié)合蛋白1抗原水楊（標準品）Human, Mouse

淋巴相關(guān)抗原4/性T抗原-4水楊鎂（標準品）Human

心肌肌鈣蛋白水楊片（不含水楊對照品）Human, Mouse

間隙連接蛋白32抗原水楊酰（標準品）Human, Mouse

間隙連接蛋白36抗原順鉑（標準品）Human, Mouse

間隙連接蛋白40(多肽)司帕沙星（標準品）Human, Mouse, Rat