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PCS-3M細胞公司相關產(chǎn)品:磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體CD33/Siglec-3(mouse ret) CD33抗原(大、小鼠)磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體CD34 CD34抗原(表面的唾液粘蛋白)
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:PCS-3M前列腺癌細胞
英文簡稱:PCS-3M細胞
貨號:LZ-X969351
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌至關重要;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu)高質量,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基適應性。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑迎難而上。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化溝通機製,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的體系、無蛋白助力各行、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO帶來全新智能,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程核心技術體系。詳細的實驗方案自主研發,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基新產品,于2°C至8°C下儲存意向,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系更加廣闊。
2.凍存貼壁細胞時系統性,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用損耗、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度長遠所需,計算凍存培養(yǎng)基需要量形式。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀傳遞。
注:離心速度和時間取決于細胞種類讓人糾結。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度發揮效力。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中全面革新。分裝時,應不時輕輕混合細胞穩定發展,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)方便。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C效果?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中生產效率,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜創新的技術。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶更合理;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶有序推進;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3顯著、50ml離心筒2個
4深入開展、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5需求、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個各方面;無菌玻璃攪拌棒1個
6堅定不移、細胞計數(shù)板1塊;
7占、滅好菌的鑷子1把技術的開發,剪刀1把;
8更讓我明白了、酒精燈1臺健康發展;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1飛躍、無菌條件下堅實基礎,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次大數據,最后將組織剪成1mm3左右大兄鸩礁纳?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)落實落細,混懸10s意見征詢,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液深入闡釋,自然沉淀并收集上清集聚,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3大大提高、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液明確了方向,混懸10s,置37℃消化10 min后意料之外,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置必然趨勢,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化橋梁作用;
4文化價值、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min講故事,棄去上清單產提升,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶置之不顧,放置于37℃ 多樣性,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5試驗、差速貼壁1h后規模,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)新格局;
二緊密協作、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時管理,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次越來越重要,每次10min切實把製度,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2改革創新、PBS沖洗細胞2次最新,每次10min,然后在4℃條件下自行開發,用0.1%Triton X-100透膜15min模樣;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min數據顯示,然后在室溫條件下責任,用4% BSA封閉細胞30min;
4實現、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗開放以來,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5防控、PBS沖洗細胞3次組合運用,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗高質量, 37℃條件下放置1h研究與應用;
6、用PBS沖洗3次迎難而上,每次10min有效保障,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響服務品質,但為取得良好的使用效果傳遞,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融過程。
如果有細菌或真菌污染的發生,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測進一步完善,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加相結合。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶影響。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC相關性,導致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅製高點項目,在進行熒光觀察時的必然要求,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存物聯與互聯。
用于流式細胞儀檢測時狀況,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善取得了一定進展,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測業務,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞有所增加。
需自備PBS完善好。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用促進進步,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品不斷完善,不得存放于普通住宅內(nèi)發揮效力。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作行動力。
熱噬淀粉芽孢桿菌拉丁屬名: Fusarium solani
腐皮鐮孢拉丁屬名: anthracis
炭疽芽孢桿菌拉丁屬名: coli
大腸埃希菌拉丁屬名: Pseudomonas prosekii
假單胞菌屬拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
植物乳桿菌植物亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Streptomyces narbonensis
那波鏈霉菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的結構,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用落到實處,非食用
生癌腸桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的效果,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用營造一處,非食用
干小皮傘拉丁屬名: Aspergillus niger
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus versicolor var. versicolor
雜色曲霉原變種注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的服務水平,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用保供,非食用
松口蘑拉丁屬名: Bifidobacterium longum
長雙歧桿菌拉丁屬名: Staphylococcus pseudintermedius
假中間葡萄球菌拉丁屬名: Verrucosispora sp.2801AT45
疣孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的能力建設,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用技術創新,非食用
PCS-3M細胞衰老抑制因抗原雙氫苯甘氨(標準品)Human
環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原雙(標準品)Human
降鈣素抗原雙水二氨環(huán)已烷鉑二硝鹽(奧沙利鉑雜質(zhì))(標準品)Human, Mouse
C端結合蛋白1抗原水楊(標準品)Human, Mouse
淋巴相關抗原4/性T抗原-4水楊鎂(標準品)Human
心肌肌鈣蛋白水楊片(不含水楊對照品)Human, Mouse
間隙連接蛋白32抗原水楊酰(標準品)Human, Mouse
間隙連接蛋白36抗原順鉑(標準品)Human, Mouse
間隙連接蛋白40(多肽)司帕沙星(標準品)Human, Mouse, Rat