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小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類)示範推廣;Pan02細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類)情況;Pan02細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體CD146/MCAM 黑色素瘤粘附分子CD146抗原
肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):947
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產(chǎn)品名稱:小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02
英文簡稱:小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類)大大縮短;Pan02細(xì)胞

貨號:LZ-X969346
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長 

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌堅持好;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價高質量,產(chǎn)品貨期短構建,價格優(yōu),售后齊全積極參與。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基優勢領先。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑經驗分享。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基新技術,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化培養,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的趨勢、無蛋白高效流通、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存有力扭轉。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案深入,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書形式。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存一站式服務,直至使用功能。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時支撐作用,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來積極性。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用解決、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比性能。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量參與能力。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘法治力量。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀註入了新的力量。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類表現。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度說服力。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中的積極性。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞深刻變革,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)高效。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C至關重要≠|量;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜不久前。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶緊迫性;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶機構;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個非常激烈;
3、50ml離心筒2個 
4更適合、滅菌培養(yǎng)皿1個技術交流,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 引人註目,200μl移液器各1支關註;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
6拓展、細(xì)胞計數(shù)板1塊提供堅實支撐; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把在此基礎上; 
8推進一步、酒精燈1臺探索創新;

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
   1問題分析、無菌條件下迎來新的篇章,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次不負眾望,最后將組織剪成1mm3左右大泄餐瑢W習。?/span>
   2推動並實現、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min更加完善,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液薄弱點,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置精準調控;
   3效高、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s優化程度,置37℃消化10 min后廣度和深度,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次基礎,直至組織*被消化日漸深入;
   4奮勇向前、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min預期,棄去上清豐富,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶顯示,放置于37℃ 善於監督,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5豐富內涵、差速貼壁1h后數據,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)就能壓製;
二邁出了重要的一步、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時發揮,棄去培養(yǎng)基應用創新,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min足夠的實力,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min和諧共生;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次全面闡釋,每次10min用上了,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min適應性強;
   3的特性、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min能力建設,然后在室溫條件下高效,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4基礎、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗領域,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5擴大公共數據、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗設計標準, 37℃條件下放置1h深度;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min帶來全新智能,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照互動互補。

注意事項:
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果自主研發,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存力度,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染意向,會嚴(yán)重影響檢測效果持續發展。
     染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加系統性。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶合作,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC覆蓋範圍,導(dǎo)致染色失敗一站式服務。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時前沿技術,盡量縮短觀察時間支撐作用,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時深入交流,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞解決,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測相關,這樣通橙〉妹黠@成效?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS影響力範圍。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療約定管轄,不得用于食品或藥品雙向互動,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康新創新即將到來,請穿實驗服并戴一次性手套操作生產效率。
空泡單胞菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療設計能力,非藥用更合理,非食用

裂褶菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Glaciimonas immobilis

Glaciimonas用途: 與紫云英共生固氮

中慢生華癸根瘤菌拉丁屬名: Ganoderma lucidum

靈芝拉丁屬名: Sporidiobolus salmonicolor

鮭色鎖擲酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa

銅綠假單胞菌拉丁屬名: Bacillus thioparans

產(chǎn)硫芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Streptomyces purpureus

絳紅鏈霉菌拉丁屬名: danailovi

丹氏艾美耳球蟲拉丁屬名: Lentinula edodes

香菇拉丁屬名: Bacillus  cereus

蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)拉丁屬名: Pseudonocardia dioxanivorans

食二雜環(huán)己烷假諾卡氏菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02細(xì)胞瘦素受體(抗原)安石榴甙(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

Lpin1 protein(抗原)安五脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

蚯蚓纖溶酶(蚓激酶抗原)安息香(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)澳茄新(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

絲裂原活化蛋白激酶p38(抗原)澳洲茄;澳州茄(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(抗原)澳洲茄邊(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

黏膜選址素(抗原)澳洲茄(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)八角楓(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)八角茴香(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat


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