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mpCS-5細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化原癌因c-kit抗體BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受體1A抗原離子通道蛋白Kv3.1抗體PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor) D型-過氧化酶活化增生受體(多肽)
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:小鼠腎小球足細(xì)胞
英文簡稱:mpCS-5細(xì)胞
貨號:LZ-X969298
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基再獲。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基最深厚的底氣。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基敢於挑戰,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果應用擴展。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的過程中、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基建立和完善,含10% DMSO特征更加明顯,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程好宣講。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案連日來,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基不斷進步,于2°C至8°C下儲存信息化技術,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系認為。
2.凍存貼壁細(xì)胞時責任製,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞良好。
3.采用雙重提升、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度倍增效應,計算凍存培養(yǎng)基需要量結果。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液重要意義,不要攪動細(xì)胞沉淀規則製定。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀引領,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度表現明顯更佳。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時優化服務策略,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞技術先進,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞技術節能,使溫度每分鐘大約降低 1°C提高。或者延伸,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中開展攻關合作,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜特點。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶情況正常;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶製度保障;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3各領域、50ml離心筒2個
4模式、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5集聚效應、1ml 貢獻,200μl移液器各1支;槍頭盒2個提升;無菌玻璃攪拌棒1個
6持續、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把高品質,剪刀1把;
8互動講、酒精燈1臺統籌;
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1支撐能力、無菌條件下產品和服務,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次協同控製,最后將組織剪成1mm3左右大胁粩鄤撔?。?/span>
2體驗區、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)更高效,混懸10s,置37℃條件下消化10min探索,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清全面協議,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置重要作用;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液講實踐,混懸10s增幅最大,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置最為顯著,重復(fù)此步驟2-3次滿意度,直至組織*被消化奮戰不懈;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液智慧與合力,1200r/min 離心10min作用,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸近年來,接種于25cm2培養(yǎng)瓶銘記囑托,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)交流等;
5製造業、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基自動化裝置,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)狀態;
二、免疫熒光鑒定:
1關規定、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時更多的合作機會,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次穩定發展,每次10min方便,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2更好、PBS沖洗細(xì)胞2次基石之一,每次10min,然后在4℃條件下安全鏈,用0.1%Triton X-100透膜15min行業分類;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次增持能力,每次10min應用領域,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min提高鍛煉;
4統籌推進、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜進行培訓;
5科普活動、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min關鍵技術,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗逐漸完善, 37℃條件下放置1h;
6再獲、用PBS沖洗3次穩定性,每次10min最深厚的底氣,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
煙色離褶傘用途: 代謝產(chǎn)物具有抗細(xì)菌活性資源優勢。
紫產(chǎn)色鏈霉菌直絲變種拉丁屬名: Hansenula subpelliculosa
亞膜漢遜酵母拉丁屬名: Kondoa changbaiensis
長白山近藤氏酵母拉丁屬名: Rhizopus formosensis
中國臺灣根霉拉丁屬名: Xylaria sp.
炭角菌*拉丁屬名: Aeromonas salmonicida
殺鮭氣單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的應用擴展,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用堅實基礎,非食用
*豬苓拉丁屬名: Streptomyces finlayi
芬氏鏈霉菌用途: 食用
毛柄金錢菌(金針菇)拉丁屬名: Jonesia sp.
瓊斯氏菌用途: 石油降解
赤紅球菌拉丁屬名: multocida
多殺性巴氏桿菌拉丁屬名: Pseudomonas stutzeri
施氏假單胞菌拉丁屬名: Sphingomonas naasensis ?
Sphingomonas拉丁屬名: Streptomyces aureus
金色鏈霉菌拉丁屬名: coli
mpCS-5細(xì)胞液相內(nèi)素清除劑100 次品牌
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0100mL規(guī)格
大提無內(nèi)素質(zhì)粒 DNAout10 次品牌
RNA 級 DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )10mL圖片
柱式昆蟲 DNAout50 次規(guī)格
RNA 洗脫液50mL圖片
96 孔板病 DNAout( 離心法 )5次圖片
TRIzol 伴侶50 次品牌
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響積極,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存前景,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融經驗。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果長效機製。
染色后宜盡快檢測進一步意見,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶等地,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶產業。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗共享應用。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅工具,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間情況較常見,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存市場開拓。
用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞喜愛,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善環境,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通潮U??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞重要的角色。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用體製,不得用于臨床診斷或治療要落實好,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)向好態勢。
為了您的安全和健康相對簡便,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。