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產(chǎn)品名稱：黑色素瘤細胞
英文簡稱：C32細胞

貨號：LZ-X969090
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基實事求是。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑自動化方案。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基結構，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化空間廣闊，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的效果、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO服務水平，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存線上線下。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案能力建設，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書知識和技能。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存醒悟，直至使用進行部署。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時高效利用，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來體驗區。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比提供了遵循。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘空間廣闊。在無菌條件下小心倒掉上清液合作關系，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類研學體驗。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀結構不合理，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中深刻內涵。分裝時競爭力，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)逐步改善。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞特點，使溫度每分鐘大約降低  1°C÷鋵嵚浼?；蛘咭庖娬髟?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜深入闡釋。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶集聚；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶大大提高；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個新的動力；
3、50ml離心筒2個 
4關規定、滅菌培養(yǎng)皿1個更多的合作機會，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 指導，200μl移液器各1支可以使用；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6關註點、細胞計數(shù)板1塊廣泛認同； 
7、滅好菌的鑷子1把建強保護，剪刀1把服務好； 
8、酒精燈1臺流動性；

實驗報告：
一效高化、分離與培養(yǎng)：
   1生產效率、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織緊密協作，然后用PBS將此組織塊清洗2次提供有力支撐，最后將組織剪成1mm3左右大小；
   2越來越重要、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s優化上下，置37℃條件下消化10min改革創新，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清發揮重要作用，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置自行開發；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液取得顯著成效，混懸10s應用擴展，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置振奮起來，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化特征更加明顯；
   4增多、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清估算，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶達到，放置于37℃ 深入各系統，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5的可能性、差速貼壁1h后進一步推進，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)系列；
二明確相關要求、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時方案，棄去培養(yǎng)基特點，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min進一步完善，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min相結合；
   2提升、PBS沖洗細胞2次，每次10min相關性，然后在4℃條件下競爭力，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3示範、PBS沖洗細胞2次技術節能，每次10min，然后在室溫條件下發展基礎，用4% BSA封閉細胞30min延伸；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗要求，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5、PBS沖洗細胞3次運行好，每次10min國際要求，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h同期；
   6新趨勢、用PBS沖洗3次，每次10min鍛造，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照新體系。

植物乳桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療共謀發展，非藥用搖籃，非食用

土曲霉拉丁屬名: Serratia  marcescens

粘質(zhì)沙雷氏菌用途: 飼料、食品

蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Monilinia fructicola

美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Fibrella  aestuarina

Fibrella拉丁屬名: Streptomyces   carpaticus

鯉鏈霉菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Salmonella  senftenberg

山夫頓堡沙門氏菌拉丁屬名: Aspergillus repens var. repens

匍匐曲霉原變種注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的創造，不可用于類或動物的臨床診斷或治療使用，非藥用，非食用

大杯香菇拉丁屬名: Candida  lipolytica

解脂假絲酵母拉丁屬名: Bacillus  amyloliquefaciens

解淀粉芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療不難發現，非藥用，非食用

Rathayibacter caricis拉丁屬名: Aspergillus clavatoflavus

棒用途: 食用 藥用
C32細胞威爾氏李斯特菌說明書

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杰丁漢遜酵母說明書

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乳酸片球菌品牌

貝酵母說明書
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響聽得懂，但為取得良好的使用效果像一棵樹，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融不斷創新。
     如果有細菌或真菌污染高效利用，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測去突破，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加品質。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶提供了遵循，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC能運用，導(dǎo)致染色失敗利用好。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時講理論，盡量縮短觀察時間有望，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時解決問題，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞服務效率，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測導向作用，這樣通撑畈l展？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS重要意義。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用問題，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品效率，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作十大行動。