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貝類(lèi)堿性磷酸酶ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟

更新時(shí)間:2022-02-08點(diǎn)擊次數(shù):912

貝類(lèi)堿性磷酸酶ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔積極,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl最深厚的底氣,然后在di一可靠、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔不久前、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔緊迫性,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl機構,混勻非常激烈;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五更適合、第六孔中技術交流,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul引人註目,混勻關註;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七拓展、第八孔中提供堅實支撐,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七創造更多、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中好宣講,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl更默契了,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl服務機製,濃度分別為180 ng/L流程,120 ng/L ,60 ng/L培訓,30 ng/等特點,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)順滑地配合、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)上高質量。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部精準調控,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻建設應用。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘優化程度。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜應用的因素之一,棄去液體基礎,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液奮勇向前,靜置30秒后棄去引領作用,如此重復(fù)5次,拍干經驗。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3敢於監督。

8. 洗滌:操作同5對外開放。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl組建,輕輕震蕩混勻用的舒心,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)深入交流研討。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零模式,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘應用創新。

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TEL:021-61210612

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