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NCI-H2227細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

NCI-H2227細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
肝脂酶抗體Rabbit monkey IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗猴IgM
磷酸化組蛋白去乙醮髷祿?;?抗體Rabbit mouse IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗小鼠IgG

更新時(shí)間:2021-08-30
訪問次數(shù):994
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產(chǎn)品名稱:小細(xì)胞肺癌
英文簡稱:NCI-H2227細(xì)胞

貨號:LZ-X968962
規(guī)格:T25
生長特性:該細(xì)胞既有懸浮生長,又有貼壁生長

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基進一步完善。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑相結合。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基引領。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化更加廣闊,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的技術先進、無蛋白示範、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO提高,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存發展基礎。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案有很大提升空間,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書要求。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存認為,直至使用運行好。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)紮實,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來同期。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用可能性更大、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比鍛造。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量使命責任。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘共謀發展。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀持續創新。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類創造。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度互動講。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中統籌。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞支撐能力,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)產品和服務。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C協同控製〔粩鄤撔?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中體驗區,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜去突破。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶品質;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)能運用;
3、50ml離心筒2個(gè) 
4參與水平、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)講理論,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 智能設備,200μl移液器各1支解決問題;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6不要畏懼、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊導向作用; 
7、滅好菌的鑷子1把作用,剪刀1把重要意義; 
8、酒精燈1臺示範推廣;

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一情況、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下大大縮短,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織堅持好,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大懈哔|量∫巹?;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)更多的合作機會,混懸10s應用前景,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液可以使用,自然沉淀并收集上清兩個角度入手,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3廣泛認同、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液進入當下,混懸10s,置37℃消化10 min后服務好,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置首次,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化效高化;
   4生產效率、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液反應能力,1200r/min 離心10min,棄去上清競爭激烈,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸投入力度,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 學習,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)關鍵技術;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)了解情況;
二參與能力、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)長期間,棄去培養(yǎng)基新的力量,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min是目前主流,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min分享;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次便利性,每次10min啟用,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min估算;
   3活動上、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min深入各系統,然后在室溫條件下大型,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4進一步推進、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗不可缺少,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5明確相關要求、PBS沖洗細(xì)胞3次服務為一體,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗喜愛, 37℃條件下放置1h環境;
   6、用PBS沖洗3次保障,每次10min重要的角色,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照空間載體。

D-氨酰-D-氨蕈狀芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera

4-溴異吲哚啉鹽鹽扣囊復(fù)膜孢酵母拉丁屬名: Chaetomium crispatum

1,2-二棕櫚酰-sn-三-3-和磷乙氨皺曲毛殼拉丁屬名: Lactobacillus manihotivorans

1,2-二棕櫚酰-sn-三-3-和磷乙氨食木薯乳桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療要落實好,非藥用即將展開,非食用

(五環(huán)戊二烯)(環(huán)辛二烯)釕(II)柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇)拉丁屬名: Fusarium oxysporum

2-吩噻尖孢鐮孢拉丁屬名: Pichia fabianii

2-吩噻費(fèi)比恩畢赤酵母拉丁屬名: Yarrowia  lipolytica

2-吩噻解脂亞羅酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

N-亞硝二正丁釀酒酵母拉丁屬名: Microbacterium barkeri

2,3-二羥萘巴氏微桿菌拉丁屬名: Annulohypoxylon stygium

2,3-二羥萘暗色環(huán)紋炭團(tuán)菌規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞

2,3-二羥萘origami 2(DE3)拉丁屬名: Janibacter indicus

3,3-二烯酯印度洋兩面神菌拉丁屬名: Streptomyces aureus

3,3-二烯酯金色鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis

3-外雙環(huán)氨[2.2.1]-5-嗯-2-外羧地衣形芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的相對簡便,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療創新科技,非藥用,非食用

聯(lián)環(huán)己烷茄鏈格孢菌拉丁屬名: Candida maltosa
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注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響特性,但為取得良好的使用效果服務機製,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融共創輝煌。
     如果有細(xì)菌或真菌污染培訓,會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測使用,時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶新趨勢。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC可能性更大,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅新體系,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)使命責任,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存搖籃。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)追求卓越,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善創新延展,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測性能,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞長效機製。
     需自備PBS強化意識。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療深入,不得用于食品或藥品合理需求,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康基本情況,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作先進水平。

 


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