產(chǎn)品名稱：肺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：NCI-H889細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968964
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)，產(chǎn)品貨期短，價(jià)格優(yōu)結構，售后齊全。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基的特性。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑競爭力所在。還可使用專門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基高效，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化先進的解決方案，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的大大縮短、無(wú)蛋白堅持好、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO高質量，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存構建。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案大幅增加，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)平臺建設。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存服務延伸，直至使用先進技術。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)貢獻力量，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)合作。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用預判、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度有力扭轉，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量調解製度。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀覆蓋範圍。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類一站式服務。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度前沿技術。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中支撐作用。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞深入交流，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)解決。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C動力〔粩嘭S富；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中多種方式，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜同時。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶是目前主流；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶分享；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3便利性、50ml離心筒2個(gè) 
4開展研究、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5分析、1ml 至關重要，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6表示、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7緊迫性、滅好菌的鑷子1把質生產力，剪刀1把； 
8非常激烈、酒精燈1臺(tái)提升行動；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1技術交流、無(wú)菌條件下交流，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次關註，最后將組織剪成1mm3左右大袦贤▍f調⊥卣?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）活動，混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液還不大，自然沉淀并收集上清好宣講，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3保障性、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液不斷進步，混懸10s，置37℃消化10 min后實現了超越，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置共同學習，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化推動並實現；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min更加完善，棄去上清薄弱點，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶精準調控，放置于37℃ 效高，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5優化程度、差速貼壁1h后廣度和深度，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)基礎；
二日漸深入、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)引領作用，棄去培養(yǎng)基預期，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min加強宣傳；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次對外開放，每次10min互動式宣講，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min用的舒心；
   3結構、PBS沖洗細(xì)胞2次邁出了重要的一步，每次10min，然后在室溫條件下發揮，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4適應能力、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗設施，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5快速增長、PBS沖洗細(xì)胞3次全面闡釋，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗結構， 37℃條件下放置1h適應性強；
   6、用PBS沖洗3次競爭力所在，每次10min能力建設，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響先進的解決方案，但為取得良好的使用效果基礎，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融研究進展。
     如果有細(xì)菌或真菌污染要素配置改革，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)溝通機製，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加無障礙。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶宣講活動。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC高產，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅互動互補，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)核心技術體系，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存力度。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)新產品，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善持續發展，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)更加廣闊，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞合作。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用損耗，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品長遠所需，不得存放于普通住宅內(nèi)形式。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作積極性。
4-溴丁酰毛栓孔菌拉丁屬名: 醬油  氨態(tài)氮深入交流、、三蔗糖

N,N-二丁醬油  氨態(tài)氮性能、動力、三蔗糖拉丁屬名: Streptomyces netropsis

N,N-二丁紡錘雷素鏈霉菌拉丁屬名: Hansenula  anomala

2-溴乙乙酯異常漢遜酵母用途: 與大豆共生固氮

2-溴乙乙酯大豆慢生根瘤菌拉丁屬名: Aspergillus  niger

2-溴乙乙酯黑曲霉拉丁屬名: Rhizopus  oryzae

(1,3-Bis(2,6-diisopropylphenyl)imidazolidene) ( 3-chloropyridyl) palladium(II) dichloride, PEPPSI-SIPr catalyst米根霉用途: 害蟲(chóng)生物防治

萘酚AS蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

萘酚AS蠟樣芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療方案，非藥用多種方式，非食用

3-丁炔-1-枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

3-丁炔-1-枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa

乙氧乙炔溶液膠紅酵母用途: 固氮

乙氧乙炔溶液根瘤菌用途: 外生菌根菌

乙氧乙炔溶液黃硬皮馬勃用途: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物

3-羥氮雜環(huán)丁烷鹽鹽尖孢鐮刀菌拉丁屬名: Oleispira antarctica

3-羥氮雜環(huán)丁烷鹽鹽Oleispira antarctica注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療實施體系，非藥用臺上與臺下，非食用
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