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氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量測(cè)定操作步驟

更新時(shí)間:2021-07-07點(diǎn)擊次數(shù):2858

氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量測(cè)定操作步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一在此基礎上、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl的過程中,然后在第一連日來、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl發展,混勻重要作用;然后從第一孔重要組成部分、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔近年來,再在第三銘記囑托、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻交流等;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉擴大,再各取50μl分別加到第五、第六孔中傳遞,再在第五讓人糾結、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻發揮效力;混勻后從第五全面革新、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中穩定發展,再在第七方便、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七更好、第八孔中分別取50μl加到第九基石之一、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl效高性,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉各有優勢。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔資料。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl自動化,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部集成,盡量不觸及孔壁規模最大,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用重要手段。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體橫向協同,甩干落地生根,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去技術的開發,如此重復(fù)5次,拍干更讓我明白了。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl健康發展,空白孔除外。
7.溫育:操作同3飛躍。
8.洗滌:操作同5堅實基礎。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl大數據,輕輕震蕩混勻前景,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零長效機製,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行重要部署。

BrainHeartInfusionAgar 500g原裝 BD 241820
(腦心浸液瓊脂)
BrainInfusionPower 1kg 國(guó)產(chǎn)
(腦浸粉)
Brij-35 200g/5kg原裝 Sigma P1254
(布里杰-35)
Brilliantgreen 10g/25g/50g/100g原裝 Amresco0502
(亮綠)
BrilliantGreenagar 500g原裝 BD 228530
(亮綠瓊脂)
BromcresolBlue,Na 5g/25g Amresco分裝
(溴酚蘭)
BromcresolGreen 5g/25g/50g/500g原裝 Amresco 0816
(溴甲酚綠)
BromothymolBlueNa 5g/25g/50g原裝 Amresco 0554
(溴麝香草酚蘭
(溴百里酚蘭鈉))
BSA,FractionV 5g/25g/100g Sigma分裝
(牛血清白蛋白)
CalciumChloride2H2O 100g/500g/5kg原裝 Sigma C3881
(氯化鈣)
CalciumIonophoreIII 1mg原裝/5mg原裝 Sigma C7522
(鈣離子載體)
CalfThymusDNA 50mg/100mg/500mg Sigma D1501
(小牛胸腺DNA)

TEL:021-61210612

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