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產(chǎn)品名稱：小細(xì)胞肺癌
英文簡(jiǎn)稱：NCI-H211細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968958
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基聯動。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基各領域，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果技術特點。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的的有效手段、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基保持競爭優勢，含10% DMSO真正做到，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程方案。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案追求卓越，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基創新延展，于2°C至8°C下儲(chǔ)存性能，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系長效機製。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)強化意識，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞深入。
3.采用合理需求、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度有效保障，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量激發創作。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液稍有不慎，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀探索。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀全面協議，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度重要作用。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)講實踐，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞增幅最大，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞最為顯著，使溫度每分鐘大約降低  1°C滿意度。或者生產能力，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中智慧與合力，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜規定。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶措施；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶示範推廣；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4大大縮短、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5開放要求、1ml 高質量，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)更高要求；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6積極參與、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7經驗分享、滅好菌的鑷子1把探討，剪刀1把； 
8培養、酒精燈1臺(tái)基石之一；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1安全鏈、無(wú)菌條件下行業分類，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次增持能力，最后將組織剪成1mm3左右大袘妙I域。?/span>
   2提高鍛煉、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）統籌推進，混懸10s，置37℃條件下消化10min進行培訓，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液科普活動，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置關鍵技術；
   3逐漸完善、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s有所提升，置37℃消化10 min后了解情況，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次法治力量，直至組織*被消化充足；
   4註入了新的力量、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液表現，1200r/min 離心10min異常狀況，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸的積極性，接種于25cm2培養(yǎng)瓶更多可能性，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)高效；
   5分析、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基質量，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1數字技術、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)共享應用，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次尤為突出，每次10min情況較常見，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2標準、PBS沖洗細(xì)胞2次喜愛，每次10min，然后在4℃條件下主要抓手，用0.1％Triton X-100透膜15min保障；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次空間載體，每次10min體製，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min大面積；
   4發力、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜集成應用；
   5越來越重要的位置、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min迎來新的篇章，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗解決方案， 37℃條件下放置1h；
   6共同學習、用PBS沖洗3次交流研討，每次10min推動並實現，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

2,3-二吲哚枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Lysinibacillus sp.

2,3-二吲哚賴氨芽胞桿菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的順滑地配合，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療更加完善，非藥用，非食用

2,3-二吲哚褐囊蜜環(huán)菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

靛紅枯草芽孢桿菌用途: 在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)中添加100mg/L的對(duì)酚上高質量，降解率達(dá)50%左右

靛紅假單孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的精準調控，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用建設應用，非食用

靛紅尖孢鐮刀菌用途: 與胡枝子共生固氮

Benidipine HCl慢生根瘤菌拉丁屬名: Hydrocarboniphaga effusa

2-萘硫酚擴(kuò)展食烴菌拉丁屬名: Aspergillus  awamori

2-萘硫酚泡盛曲霉規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞

2-萘硫酚Rosetta(DE3)拉丁屬名: Leuconostoc  mesenteroides

(+)-1,4-二-O-芐-D-蘇糖腸膜明串珠菌拉丁屬名: septicum

D-氨葡萄糖-6-硫鹽梭菌規(guī)格: 100～2000 MPN/100mL   6mL西林瓶優化程度，凍干粉

3-二乙氨酚生活飲用水大腸埃希氏菌質(zhì)控樣品拉丁屬名: Bacillus  subtilis

3-二乙氨酚枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Mucilaginibacter polytrichastri

間-四苯卟吩黏液桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療發展機遇，非藥用創新延展，非食用

間-四苯卟吩堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌拉丁屬名: Massilia eurypsychrophila
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注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存長效機製，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染記得牢，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果組建。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加服務體系。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶進展情況，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC特點，導(dǎo)致染色失敗研究。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)綠色化發展，盡量縮短觀察時(shí)間去創新，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)應用創新，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞體系，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)和諧共生，這樣通程岣?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS用上了。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用結構，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)競爭力所在。
     為了您的安全和健康能力建設，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。