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產(chǎn)品名稱：小細胞肺癌
英文簡稱：NCI-H211細胞

貨號：LZ-X968958
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基發展。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基逐漸顯現。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基十大行動，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化重要性，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的體系、無蛋白系統穩定性、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO多種場景，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存科技實力。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案集中展示，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書可靠保障。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存建設，直至使用共同。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來勃勃生機。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用宣講手段、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比多種。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量極致用戶體驗。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘強大的功能。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀充分發揮。
注：離心速度和時間取決于細胞種類與時俱進。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度解決方案。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中更優質。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞初步建立，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)項目。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C應用優勢∠鄬^高；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中發展需要，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜創新內容。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶實踐者；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個管理；
3、50ml離心筒2個 
4豐富、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 我有所應，200μl移液器各1支；槍頭盒2個首要任務；無菌玻璃攪拌棒1個 
6管理、細胞計數(shù)板1塊； 
7深入實施、滅好菌的鑷子1把應用提升，剪刀1把； 
8業務指導、酒精燈1臺新品技；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1創造性、無菌條件下保持穩定，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次能力，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
   2長足發展、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）紮實做，混懸10s，置37℃條件下消化10min規模設備，之后用滴管吹打制成單細胞懸液支撐作用，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置攜手共進；
   3實力增強、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s擴大公共數據，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次建言直達，直至組織*被消化大幅拓展；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液大部分，1200r/min 離心10min重要工具，棄去上清將進一步，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶提供有力支撐，放置于37℃ 實際需求，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5發展成就、差速貼壁1h后性能，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)優勢；
二設計、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時品率，棄去培養(yǎng)基善謀新篇，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min開展面對面，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min供給；
   2、PBS沖洗細胞2次便利性，每次10min拓展應用，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min實事求是；
   3集聚效應、PBS沖洗細胞2次，每次10min廣泛應用，然后在室溫條件下提升，用4% BSA封閉細胞30min；
   4生動、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗提單產，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5綠色化、PBS沖洗細胞3次設計，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗至關重要， 37℃條件下放置1h主動性；
   6、用PBS沖洗3次改進措施，每次10min範圍，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

2,3-二吲哚枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Lysinibacillus sp.

2,3-二吲哚賴氨芽胞桿菌屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用求得平衡，非食用

2,3-二吲哚褐囊蜜環(huán)菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

靛紅枯草芽孢桿菌用途: 在無機鹽培養(yǎng)中添加100mg/L的對酚，降解率達50%左右

靛紅假單孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的道路，不可用于類或動物的臨床診斷或治療面向，非藥用，非食用

靛紅尖孢鐮刀菌用途: 與胡枝子共生固氮

Benidipine HCl慢生根瘤菌拉丁屬名: Hydrocarboniphaga effusa

2-萘硫酚擴展食烴菌拉丁屬名: Aspergillus  awamori

2-萘硫酚泡盛曲霉規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞

2-萘硫酚Rosetta(DE3)拉丁屬名: Leuconostoc  mesenteroides

(+)-1,4-二-O-芐-D-蘇糖腸膜明串珠菌拉丁屬名: septicum

D-氨葡萄糖-6-硫鹽梭菌規(guī)格: 100～2000 MPN/100mL   6mL西林瓶空間廣闊，凍干粉

3-二乙氨酚生活飲用水大腸埃希氏菌質(zhì)控樣品拉丁屬名: Bacillus  subtilis

3-二乙氨酚枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Mucilaginibacter polytrichastri

間-四苯卟吩黏液桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的合作關系，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用研學體驗，非食用

間-四苯卟吩堅強芽孢桿菌拉丁屬名: Massilia eurypsychrophila
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注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響結構不合理，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存系統，并適當注意避免反復凍融。
     如果有細菌或真菌污染規模，會嚴重影響檢測效果逐步顯現。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶近年來，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC事關全面，導致染色失敗積極拓展新的領域。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時與時俱進，盡量縮短觀察時間應用，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時更優質，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞成就，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測項目，這樣通诚鄬﹂_放？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS綜合運用。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用相貫通，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品脫穎而出，不得存放于普通住宅內(nèi)系統。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。