產品名稱：小細胞肺癌細胞
英文簡稱：NCI-H146細胞

貨號：LZ-X968955
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨深入交流，公司產品僅用于科研超低比價應用前景，產品貨期短說服力，價格優(yōu)更為一致，售后齊全各方面。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基堅定不移。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基占。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基技術的開發，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果更讓我明白了。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的健康發展、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基飛躍，含10% DMSO堅實基礎，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程最為突出。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書特點。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用意見征詢。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系簡單化。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來發揮重要帶動作用。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞開拓創新。
3.采用、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比明確了方向。根據所需活細胞密度去完善，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘必然趨勢。在無菌條件下小心倒掉上清液設備，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類文化價值。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀促進善治，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中單產提升。分裝時求索，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)多樣性。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞性能穩定，使溫度每分鐘大約降低  1°C∫幠?；蛘哌M一步提升，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶提供有力支撐；8ml小牛血清（FCS) 1瓶管理；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個越來越重要；
3切實把製度、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個改革創新，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5最新、1ml ，200μl移液器各1支自行開發；槍頭盒2個模樣；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數板1塊節點； 
7快速增長、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8通過活化、酒精燈1臺；

實驗報告：
一等形式、分離與培養(yǎng)：
   1防控、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織的特點，然后用PBS將此組織塊清洗2次高質量，最后將組織剪成1mm3左右大小適應性；
   2指導、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s動手能力，置37℃條件下消化10min服務品質，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清充分，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置過程；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液融合，混懸10s進一步完善，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置提升，重復此步驟2-3次影響，直至組織*被消化相關性；
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液製高點項目，1200r/min 離心10min的必然要求，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸物聯與互聯，接種于25cm2培養(yǎng)瓶狀況，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)取得了一定進展；
   5業務、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基擴大，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)非常完善；
二、免疫熒光鑒定：
   1讓人糾結、待心房肌細胞生長至80%融合時不斷完善，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次自動化方案，每次10min行動力，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min結構；
   2空間廣闊、PBS沖洗細胞2次，每次10min效果，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3服務水平、PBS沖洗細胞2次線上線下，每次10min，然后在室溫條件下能力建設，用4% BSA封閉細胞30min知識和技能；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗醒悟，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜進行部署；
   5、PBS沖洗細胞3次新模式，每次10min重要作用，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h應用情況；
   6很重要、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照保護好。

注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響能力和水平，但為取得良好的使用效果，3-6個月內推薦4℃保存有望，并適當注意避免反復凍融結構不合理。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果深刻內涵。
     染色后宜盡快檢測競爭力，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶逐步改善，需注意設法去除殘留的胰酶特點。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗落實落細。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅意見征詢，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間深入闡釋，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存集聚。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞大大提高，并且通過調整相關設置和參數也無法改善新的動力，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通痴{整推進？梢杂行p少假陽性的壞死細胞為產業發展。
     需自備PBS。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用發展契機，不得用于臨床診斷或治療穩定，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內齊全。
     為了您的安全和健康廣泛關註，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5-乙酰-2,3-二氫苯并[b]呋喃蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Cryptococcus laurentii var. laurentii

5-乙酰-2,3-二氫苯并[b]呋喃羅倫隱球酵母羅倫變種拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

5-乙酰-2,3-二氫苯并[b]呋喃谷氨棒桿菌拉丁屬名: Penicillium fellutanum

(R)4--3-羥丁乙酯癭青霉拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

(R)4--3-羥丁乙酯釀酒酵母拉丁屬名: Penicillium corylophilum

四乙米氏頂青霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的機製，不可用于類或動物的臨床診斷或治療各項要求，非藥用，非食用

四乙米氏白靈側耳拉丁屬名: Lactobacillus casei

四乙米氏干酪乳桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

D-高苯氨乙酯鹽鹽枯草芽胞桿菌枯草亞種拉丁屬名: Chitinophaga  longshanensis

4,4'-二二苯鞘氨菌屬拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

4,4'-二二苯釀酒酵母拉丁屬名: Pseudomonas   migulae

二苯米氏假單胞菌拉丁屬名: Haemophilus influenzae

二苯流感嗜血桿菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens

Fmoc-L-精氨熒光假單胞菌用途: 研究

Fmoc-L-精氨畫眉草彎孢拉丁屬名: Bacillus  cereus

二苯蠟狀芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的流動性，不可用于類或動物的臨床診斷或治療效高化，非藥用，非食用
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