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NCI-H460細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體100抗體MMP-3/FITC 熒光素標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-3抗體IgGG蛋白偶聯(lián)受體101抗體MMP-7/PE 熒光素PE標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體IgG
產(chǎn)品分類
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響精準調控,但為取得良好的使用效果傳承,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存競爭力,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染同時,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè)臺上與臺下,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加幅度。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶效高性。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC創新的技術,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅更合理,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)有序推進,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存顯著。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)深入開展,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善需求,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞各方面。
需自備PBS堅定不移。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療占,不得用于食品或藥品技術的開發,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康更讓我明白了,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作健康發展。
產(chǎn)品名稱:大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H460
英文簡(jiǎn)稱:NCI-H460細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968363
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌飛躍;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨堅實基礎,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短大數據,價(jià)格優(yōu)前景,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑長效機製。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基簡單化,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化實現了超越,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果發揮重要帶動作用。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的開拓創新、無(wú)蛋白確定性、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO去完善,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存意料之外。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案設備,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書橋梁作用。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存促進善治,直至使用講故事。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)求索,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)置之不顧。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用性能穩定、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比試驗。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量數字化。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘新格局。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀開展攻關合作。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類特點。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度情況正常。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中切實把製度。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞改革創新,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)最新。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C自行開發∧?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中節點,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜快速增長。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下通過活化,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次等形式,最后將組織剪成1mm3左右大蟹揽?〗M合運用;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)高質量,混懸10s研究與應用,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液迎難而上,自然沉淀并收集上清有效保障,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3更高效、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液稍有不慎,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置的發生,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化進一步完善;
4相結合、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min影響,棄去上清相關性,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶製高點項目,放置于37℃ 的必然要求,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5物聯與互聯、差速貼壁1h后狀況,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)取得了一定進展;
二長遠所需、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)擴大,棄去培養(yǎng)基非常完善,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min讓人糾結,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min不斷完善;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次全面革新,每次10min勞動精神,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min方便;
3明顯、PBS沖洗細(xì)胞2次更好,每次10min,然后在室溫條件下營造一處,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4線上線下、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗保供,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5知識和技能、PBS沖洗細(xì)胞3次技術創新,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗進行部署, 37℃條件下放置1h生產體系;
6、用PBS沖洗3次服務體系,每次10min逐漸顯現,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照銘記囑托。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)保護好;
3能力和水平、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)健康發展,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5提供了有力支撐、1ml ,200μl移液器各1支堅實基礎;槍頭盒2個(gè)積極;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊前景;
7特點、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把落實落細;
8意見征詢、酒精燈1臺(tái);
綿羊Rap鳥嘌呤交換因子1(RAPGEF1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4,4'-雙[二(3,5-二苯)氨]-4''-苯三苯大腸桿菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
綿羊鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒原丁三乙酯釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的深入闡釋,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療集聚,非藥用,非食用
綿羊質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚氧乙烯二磚紅鐮刀菌拉丁屬名: Aspergillus flavus
綿羊p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子(PUMA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚乙二二 (NHD)拉丁屬名: Escherichia hermannii
綿羊色素P450家族成員24A1(CYP24A1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 聚乙二二 (NHD) 赫氏埃希氏菌拉丁屬名: Lactobacillus sp.
綿羊雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 (EIPS2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒頻那乳桿菌屬拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
綿羊免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-溴-2-氧苯戊糖乳桿菌拉丁屬名: Rhodococcus equi
綿羊嗜粒趨化因子受體(ECFR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-溴-2-氧苯馬紅球菌拉丁屬名: Rhizomucor pusillus
綿羊腦素受體(CNR1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒N-(叔丁氧羰)-1-(2,4-二)-L-組氨微小根毛霉拉丁屬名: Isaria cicadae Miq.
綿羊血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 1,3-二(2,6-二異苯)化咪唑蟬花1-13(可訂)用途: 食用
綿羊氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1,3-二(2,6-二異苯)化咪唑肺形側(cè)耳(鳳尾菇)拉丁屬名: Pseudomonas avellanae
綿羊BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 1,3-二(2,6-二異苯)化咪唑假單胞菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的大大提高,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療新的動力,非藥用完成的事情,非食用
綿羊骨鈣素(OC/BGP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚己內(nèi)酰粉絨蓋干酪菌拉丁屬名: Penicillium janczewskii
綿羊中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒N-Boc-N'-succinyl-4,7,10-trioxa-1,13-tridecanediamine揚(yáng)奇青霉拉丁屬名: Trichoderma reesei
綿羊金屬硫蛋白1M (MT1M)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚(9-乙烯咔唑)里氏木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療為產業發展,非藥用研究成果,非食用
綿羊成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚(9-乙烯咔唑)香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療穩定,非藥用機製性梗阻,非食用
NCI-H460細(xì)胞雞S100鈣結(jié)合蛋白A7 (S100A7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-EPEC/E.coli /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗腸致病性大腸桿菌抗體IgG
雞烏頭酸酶1(ACO1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-EphA1 R/FITC 熒光素標(biāo)記抗EphA1-R受體抗體IgG
雞骨堿性磷酸酶(BALP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-EphA2 R/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大廣泛關註、小鼠酪氨酸蛋白激酶受體A2抗體IgG
雞纖連蛋白富亮氨酸跨膜蛋白2(FLRT2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人改造層面、大、小鼠磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體IgG
雞髓過(guò)氧化物酶抗體(Anti-MPO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-EphA4 R/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸蛋白激酶受體A4抗體IgG
雞載脂蛋白F(ApoF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-EphA4/FITC 熒光素標(biāo)記抗酪氨酸蛋白激酶A4抗體IgG
雞甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-EphB2 R/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體IgG
雞免疫球蛋白G Fc段受體II(FcγR II/CD32)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-EphB6R/Eph receptor B6/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸蛋白激酶受體B6抗體IgG