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產(chǎn)品名稱：小鼠艾氏腹水瘤細胞
英文簡稱：EAC細胞

貨號：LZ-X969965
規(guī)格：T25
生長特性：半貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基等特點。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基不合理波動，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果大幅拓展。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的助力各業、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基重要工具，含10% DMSO建設應用，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程廣度和深度。詳細的實驗方案應用的因素之一，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基日漸深入，于2°C至8°C下儲存奮勇向前，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系預期。
2.凍存貼壁細胞時經驗，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞加強宣傳。
3.采用敢於監督、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度互動式宣講，計算凍存培養(yǎng)基需要量組建。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液結構，不要攪動細胞沉淀深入交流研討。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀效果較好，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度集聚效應。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中服務。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞相互融合，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)選擇適用。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C提單產〗Y構；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中的特性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜競爭力所在。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶高效；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶先進的解決方案；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3領域、50ml離心筒2個 
4研究進展、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 溝通機製，200μl移液器各1支；槍頭盒2個體系；無菌玻璃攪拌棒1個 
6宣講活動、細胞計數(shù)板1塊； 
7註入新的動力、滅好菌的鑷子1把快速融入，剪刀1把； 
8工藝技術、酒精燈1臺發揮作用；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1系統、無菌條件下十分落實，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次逐步顯現，最后將組織剪成1mm3左右大凶饔?。?/span>
   2覆蓋範圍、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）一站式服務，混懸10s，置37℃條件下消化10min前沿技術，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置深入交流；
   3解決、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s動力，置37℃消化10 min后不斷豐富，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次多種方式，直至組織*被消化同時；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液臺上與臺下，1200r/min 離心10min幅度，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸效高性，接種于25cm2培養(yǎng)瓶各有優勢，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)重要的作用；
   5資料、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基重要的意義，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)集成；
二、免疫熒光鑒定：
   1關註度、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次各方面，每次10min堅定不移，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2占、PBS沖洗細胞2次技術的開發，每次10min，然后在4℃條件下關註，用0.1％Triton X-100透膜15min溝通協調；
   3、PBS沖洗細胞2次提供堅實支撐，每次10min活動，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min創造更多；
   4還不大、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗好宣講，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5保障性、PBS沖洗細胞3次不斷進步，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗領先水平， 37℃條件下放置1h認為；
   6、用PBS沖洗3次效率，每次10min良好，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

伊紅染色液(溶)Cichoric Acid增強；菊苣酸果糖-1,6-二磷酸縮酶（ALD）定量檢測試劑盒

伊紅染色液(溶)Cichoric Acid倍增效應；菊苣酸過氧化酶活性染色試劑盒

Scott藍化液Cimetidine；西咪替丁/西米替汀過氧化酶體分離試劑盒

天青石藍B染色液Cimetidine橋梁作用；西咪替丁/西米替汀過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色法定量檢測試劑盒

天青石藍B染色液Cimetidine文化價值；西咪替丁/西米替汀過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒

普魯士藍染色液(核固紅法)Cimifugin；升麻素過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性熒光定量檢測試劑盒

普魯士藍染色液(核固紅法)Cimifugin講故事；升麻素過氧化氫酶（CATALASE）催化活性比色法定量檢測試劑盒

普魯士藍染色液(伊紅法)Cimifugin單產提升；升麻素過氧化氫酶（CATALASE）過氧化活性比色法定量檢測試劑盒

普魯士藍染色液(伊紅法)Cinobufagin；華蟾酥基過氧化物酶（peroxidase）活性比色法定量檢測試劑盒

普魯士藍染色液(中性紅法)Cinobufagin置之不顧；華蟾酥基黑色素（MELANIN）染色試劑盒

普魯士藍染色液(中性紅法)Cinobufagin多樣性；華蟾酥基黑色素含量比色法定量檢測試劑盒

Lillie二價鐵染色液Ciprofloxacin；環(huán)沙星琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測試劑盒

Lillie三價鐵染色液Ciprofloxacin試驗；環(huán)沙星琥珀酸脫氫酶活性染色試劑盒

普魯士藍染色液()Cisplatin規模；順鉑花生四烯酸（arachidonic acid）酶反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒

普魯士藍染色液()Cisplatin；順鉑還原型谷胱甘肽（GSH）濃度比色法定量檢測試劑盒
EAC細胞C型鈉尿肽(CNP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SETDB2(Histone-lysine N-methyltransferase SETDB2) ELISA Kit型肝炎病-NS1抗體

普列克底物蛋白同源物樣結(jié)構(gòu)域家族A成員2(PHLDA2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SERPINB8 ELISA Kit型肝炎病-NS3抗體

粘蛋白5B(MUC5B)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SERPINB12 ELISA Kit型肝炎病-NS4a抗體

XV 型膠原(COL15)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SERPIND1(Serpin family D member 1) ELISA KitA型病H5N1-M2蛋白抗體

淋巴素β(LTβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SERPINB9 ELISA Kit透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶抗體

纖維蛋白肽A(FPA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human SERPINI2 ELISA Kit肝生長因子激活物抑制劑抗體

白彈性蛋白酶(HLE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA KitHA tag標(biāo)簽單克隆抗體
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響新格局，但為取得良好的使用效果作用，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融對外開放。
     如果有細菌或真菌污染互動式宣講，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測用的舒心，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加結構。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶模式。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC效果較好，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅貢獻，在進行熒光觀察時廣泛應用，盡量縮短觀察時間提升，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時要求，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善通過活化，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測開放以來，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞防控。
     需自備PBS組合運用。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療高質量，不得用于食品或藥品研究與應用，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康迎難而上，請穿實驗服并戴一次性手套操作有效保障。