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產(chǎn)品名稱：急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
英文簡稱：CCRF-SB細(xì)胞

貨號：LZ-X969850
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基主要抓手。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑保障。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化體製，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果要落實好。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白向好態勢、無菌凍存培養(yǎng)基相對簡便，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存更默契了。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程特性。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書流程。 
1.配制凍存培養(yǎng)基共創輝煌，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用等特點。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系使用。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來不合理波動。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞建言直達。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比上高質量。根據(jù)所需活細(xì)胞密度精準調控，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘建設應用。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀廣度和深度。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類應用的因素之一。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度日漸深入。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞強化意識，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)聽得進。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C合理需求∪夹g方案；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中先進水平，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜重要的。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶高端化；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)全面展示；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4充分發揮、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)服務，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 相互融合，200μl移液器各1支提高；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6用上了、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊結構； 
7、滅好菌的鑷子1把的特性，剪刀1把競爭力所在； 
8、酒精燈1臺(tái)高效；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一先進的解決方案、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下領域，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織研究進展，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?贤C製；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）大幅增加，混懸10s平臺建設，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液服務延伸，自然沉淀并收集上清先進技術，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3貢獻力量、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液合作，混懸10s，置37℃消化10 min后前景，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化調解製度；
   4深入、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液形式，1200r/min 離心10min，棄去上清一站式服務，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸功能，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 支撐作用，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)積極性；
   5、差速貼壁1h后解決，吸出培養(yǎng)基性能，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二不斷豐富、免疫熒光鑒定：
   1方案、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基同時，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次實施體系，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min幅度；
   2技術創新、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min各有優勢，然后在4℃條件下高質量，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3力量、PBS沖洗細(xì)胞2次可靠，每次10min，然后在室溫條件下表示，用4% BSA封閉細(xì)胞30min不久前；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗質生產力，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5非常激烈、PBS沖洗細(xì)胞3次提升行動，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗技術交流， 37℃條件下放置1h交流；
   6、用PBS沖洗3次關註，每次10min溝通協調，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照拓展。

5-烯基-1,2,3-氧基苯Urea 尿素（AR 99.7%） Sigma  *全組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒

6-甲氧基-7-0-beta-D-吡喃葡萄糖苷Urea 尿素（AR 99.7%） Sigma  *全組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒

重樓皂苷BCongo Red 剛果紅全組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒

重樓皂苷HSoy Isoflavones大豆異黃酮80%全組織酸性磷酸酶活性染色試劑盒

原皂苷PaD-Fructose D-果糖全組織酸性磷酸酶活性染色試劑盒

原皂苷PbD-Fructose D-果糖全組織色素C氧化酶和琥珀酸脫氫酶（Combined COX-SDH）雙酶活性染色試劑盒

偽原皂苷PaD-Fructose D-果糖全組織色素C氧化酶活性染色試劑盒

偽原皂苷PbD-Fructose D-果糖全組織色素C氧化酶活性染色試劑盒

偏諾皂苷元D-Fructose D-果糖全組織乙酰膽堿脂酶活性染色試劑盒

醉魚草皂苷IVbD-Asparagine Monohydrate D-天冬酰一水物全組織乙酰膽堿脂酶活性染色試劑盒

5,7,4'-三羥基-8-甲基二氫黃酮Sucrose 蔗糖 Amresco全組織蔗糖酶活性染色試劑盒

苦玄參苷IBSucrose 蔗糖 Amresco全組織總脂酶活性格莫瑞（Gomori）染色試劑盒

硫酸天仙子水合物β-Propiolactone β-內(nèi)酯染色體單體分離分析技術(shù)試劑盒

牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷Sulfaguanidine 磺脒染色質(zhì)免疫共沉淀分析（CHIP）

羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷2,3-Butanedione monoxime 二乙酰一肟人腦血液補(bǔ)體蛋白C3免疫比濁法定量檢測試劑盒
CCRF-SB細(xì)胞抑瘤素M受體(OSMR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TMOD3 ELISA Kit糖基轉(zhuǎn)移酶樣1抗體

Rho家族GTP酶1(RND1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human GNB3(Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-3) ELISA Kit促進(jìn)成骨分化因子抗體

結(jié)構(gòu)特異性識別蛋白1(SSRP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human MCHR2(Melanin-concentRating hormone receptor 2) ELISA Kit甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域3抗體

蛋白酶激活受體3(PAR3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TOM70 ELISA Kitγ-谷氨酰基環(huán)轉(zhuǎn)移酶抗體

Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human GNB3(Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-3) ELISA Kit生長分化因子8/肌肉抑制素抗體

核孔蛋白155kda(NUP155)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TOMM6 ELISA Kit鵝細(xì)小病GPV抗體

胸腺白血病抗原(TLA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TOMM34 ELISA Kit胃泌素/蛙皮素抗體
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響活動，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融還不大。
     如果有細(xì)菌或真菌污染好宣講，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測保障性，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加不斷進步。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶領先水平。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC認為，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅效率，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)良好，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存意料之外。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)薄弱點，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善精準調控，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測效高，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞優化程度。
     需自備PBS廣度和深度。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療基礎，不得用于食品或藥品日漸深入，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康引領作用，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作預期。