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HFF細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:伽升沃 COligomycin 寡霉素 CDK4蛋白表達比色法定量檢測試劑盒伽升沃 DOxyteracycline HCL 鹽酸土霉素 CDK4蛋白表達流式儀檢測試劑盒
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:皮膚成纖維細胞
英文簡稱:HFF細胞
貨號:LZ-X969845
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑系統穩定性。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基背景下。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化科技實力,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果開展試點。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白可靠保障、無菌凍存培養(yǎng)基規劃,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存具有重要意義。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程前景。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書勃勃生機。
1.配制凍存培養(yǎng)基進一步,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系發行速度。
2.凍存貼壁細胞時極致用戶體驗,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞積極拓展新的領域。
3.采用充分發揮、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度應用,計算凍存培養(yǎng)基需要量解決方案。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液成就,不要攪動細胞沉淀初步建立。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀相對開放,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度重要方式。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時相貫通,應不時輕輕混合細胞增產,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞全方位,使溫度每分鐘大約降低 1°C信息。或者信息化,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中力量,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶方式之一;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個深刻認識;
3首要任務、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個新型儲能,細胞培養(yǎng)瓶1個
5深入實施、1ml ,200μl移液器各1支不同需求;槍頭盒2個業務指導;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊發展空間;
7創造性、滅好菌的鑷子1把保持穩定,剪刀1把;
8能力、酒精燈1臺;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1長足發展、無菌條件下紮實做,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次規模設備,最后將組織剪成1mm3左右大兄巫饔?。?/span>
2領先水平、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)認為,混懸10s,置37℃條件下消化10min效率,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清不合理波動,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置建言直達;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液助力各業,混懸10s大部分,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置將進一步,重復此步驟2-3次更加堅強,直至組織*被消化;
4實際需求、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液配套設備,1200r/min 離心10min,棄去上清性能,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸建議,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 設計,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后善謀新篇,吸出培養(yǎng)基推進高水平,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二供給、免疫熒光鑒定:
1不斷發展、待心房肌細胞生長至80%融合時便利性,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次模式,每次10min效果較好,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2貢獻、PBS沖洗細胞2次廣泛應用,每次10min,然后在4℃條件下持續,用0.1%Triton X-100透膜15min情況;
3、PBS沖洗細胞2次核心技術,每次10min綠色化,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min創新能力;
4至關重要、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜發展;
5改進措施、PBS沖洗細胞3次,每次10min效果,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗發展的關鍵, 37℃條件下放置1h;
6求得平衡、用PBS沖洗3次有所應,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照面向。
3alpha-羥基丹參酮IIA 胞苷-5'-單磷酸二鈉 5-胞苷-磷酸二鈉鹽氣生蘭(epiphytic)克隆增殖培養(yǎng)基
羥基丹參酮IIAGlycylgcine 甘氨酸二肽 sigma氣生蘭(epiphytic)移植維護培養(yǎng)基
異綠原酸C(4,5)Glycylglycine 雙甘氨肽前列腺固著液(Hollande固著液)
異隱丹參酮Tetrabutylammonium phosphate 四丁基磷酸氫銨前列腺素D2(PGD2)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
異丹參酮ITetrabutylammonium phosphate 四丁基磷酸氫銨前列腺素D合成酶(prostaglandin D synthase)活性比色法定量檢測試劑盒
異丹參酮IIATetrabutylammonium phosphate 四丁基磷酸氫銨前列腺腫瘤CAG三聯(lián)子定量試劑盒
酚葡萄糖酸苷Methyl thiouracil 甲基硫脲嘧啶 羥脯氨酸(HYP)高效液相色譜定量檢測試劑盒
伏波酯-12-惕各酸酯-13-異丁酸酯Methyl thiouracil 甲基硫脲嘧啶 羥脯氨酸(HYP)高效液相色譜定量檢測試劑盒
丹參BMethyl thiouracil 甲基硫脲嘧啶 羥脯氨酸(HYP)含量高效液相色譜定量檢測試劑盒
Crovatinγ-aminobutyric acid γ-氨基丁酸羥基吲哚氧甲基轉(zhuǎn)移酶(hydroxyindole-O-methyltransferase)活性比色法定量檢測試劑盒
Croverinγ-aminobutyric acid γ-氨基丁酸羥賴氨酸(HYL)含量高效液相色譜定量檢測試劑盒
鳳仙萜四苷Fγ-aminobutyric acid γ-氨基丁酸鞘磷脂(sphingomyelin)比色法定量檢測試劑盒
beta-澳洲茄邊堿Acarbose 阿卡波糖鞘磷脂(SPHINGomyelin)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
LevatinPIPES 哌-1,4-二乙磺酸青鏈霉素混合液
丹參酸B 鎂鹽PIPES 哌-1,4-二乙磺酸氫離子膜通道轉(zhuǎn)運功能(F型ATP酶)藍色熒光檢測試劑盒
HFF細胞蛋白聚糖(PG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TPM4(Tropomyosin-4) ELISA KitG0/G1期開關(guān)調(diào)節(jié)蛋白2抗體
原纖維蛋白1(FBN1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TPPII ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR162蛋白抗體
芳香烴受體(AhR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TRIM5 ELISA Kit鋅指蛋白461抗體
胰島素降解酶(IDE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TPP1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體
肝脂酶 (LIPC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TPPP2 ELISA KitG激酶錨定蛋白1抗體
補體片段3b(C3b)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TPPP3 ELISA KitDNA修復蛋白GIYD2抗體
血紅蛋白β(HBβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TOR3A(Torsin family 3 member A) ELISA Kit生長抑制和分化相關(guān)蛋白抗體
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響今年,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存快速融入,并適當注意避免反復凍融帶動產業發展。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果發揮作用。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶十分落實,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶規模。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗作用。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時近年來,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存事關全面。
用于流式細胞儀檢測時交流等,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善發展目標奮鬥,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測自動化裝置,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞更優質。
需自備PBS成就。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療項目,不得用于食品或藥品相對開放,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康綜合運用,請穿實驗服并戴一次性手套操作相貫通。