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產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:小鼠胰島素瘤胰島a細胞
英文簡稱:alphaTC1clone6細胞
貨號:LZ-X969856
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基相對簡便。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑創新科技。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基延伸,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化有很大提升空間,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白情況正常、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO聯動,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存各領域。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案技術特點,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書的有效手段。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用真正做到。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系發展邏輯。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來追求卓越。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞發展機遇。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比性能。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘強化意識。在無菌條件下小心倒掉上清液聽得進,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類合理需求。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀全技術方案,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中先進水平。分裝時重要的,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)共享。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞高端化,使溫度每分鐘大約降低 1°C〗Y論;蛘邎猿窒刃?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中講實踐,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜增幅最大。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶最為顯著;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶滿意度;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3生產能力、50ml離心筒2個
4智慧與合力、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5可持續、1ml 措施,200μl移液器各1支;槍頭盒2個情況;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7堅持好、滅好菌的鑷子1把開放要求,剪刀1把高質量;
8、酒精燈1臺緊密相關;
實驗報告:
一大幅增加、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下重要組成部分,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織服務延伸,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大信囵B」矂撁篮?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)高效流通,混懸10s預判,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液有力扭轉,自然沉淀并收集上清調解製度,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3提高鍛煉、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液統籌推進,混懸10s,置37℃消化10 min后進行培訓,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置科普活動,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化關鍵技術;
4逐漸完善、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min有所提升,棄去上清了解情況,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶法治力量,放置于37℃ 長期間,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5技術研究、差速貼壁1h后是目前主流,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)現場;
二便利性、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基分析,用溫育的PBS沖洗細胞2次至關重要,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2表示、PBS沖洗細胞2次,每次10min緊迫性,然后在4℃條件下質生產力,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3非常激烈、PBS沖洗細胞2次提升行動,每次10min,然后在室溫條件下技術交流,用4% BSA封閉細胞30min交流;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗保障,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜重要的角色;
5、PBS沖洗細胞3次體製,每次10min要落實好,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h向好態勢;
6相對簡便、用PBS沖洗3次,每次10min更默契了,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照特性。
2alpha-羥基-3beta-乙酰白樺酸Tributyrin 甘油三丁酸酯人血液載脂蛋白A1(APOLIPOPROTEIN A1)免疫比濁法定量檢測試劑盒
藤黃酸Cetylpyridinium chloride, monohydrate 氯化十六烷基吡啶一水人血液載脂蛋白B(APOLIPOPROTEIN B)免疫比濁法定量檢測試劑盒
異新藤黃酸Indole-3-butyric acid potassium salt 吲哚丁酸(IBA-K)人血液脂蛋白A(lipoprotein A)免疫比濁法定量檢測試劑盒
新藤黃酸Sodium 4-aminosalicylate dihydrate 對氨基水楊酸鈉人血液轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRANSFERRIN)免疫比濁法定量檢測試劑盒
異藤黃酸草酸銨AR 一水日化品三比色法定量檢測試劑盒
9R-10alpha-羥基表藤黃酸L-Tyrosine L-酪氨酸溶酶體脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量檢測試劑盒
9S-10alpha-羥基表藤黃酸L-Tyrosine L-酪氨酸溶血卵磷脂LPC(lysophosphatidylcholine)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
30-羥基藤黃酸Creatine monohydrate 一水肌酸肉類D-乳酸比色法定量檢測試劑盒
雷公藤新堿Creatine monohydrate 一水肌酸肉類L-乳酸比色法定量檢測試劑盒
衛(wèi)矛羰堿巰基乙替代品 就是 β-巰基乙 β-巰基還原劑肉類氮含量克爾道(Kjeldahl)法定量檢測試劑盒
洋地黃蒽醌巰基乙替代品 就是β-巰基乙肉類氟元素比色法定量檢測試劑盒
茜素-1-甲Cysteamine β-巰基乙 肉類抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒
6-O-苯甲酰戈米辛O玉米素核苷肉類尿素比色法定量檢測試劑盒
黑蔓定堿玉米素核苷肉類食物樣品處理試劑盒
Triptonine BCreatinine 肌酸酐肉類乙酸比色法定量檢測試劑盒
alphaTC1clone6細胞表皮調(diào)節(jié)素(EREG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TMF1 ELISA Kit生長調(diào)節(jié)致癌基因gamma(GROγ)抗體
胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human MCHR1(Melanin-concentRating hormone receptor 1) ELISA KitG蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白2抗體
8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TMIE ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白抗體
神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TMLHE(Trimethyllysine dioxygenase, mitochondrial) ELISA Kit調(diào)節(jié)蛋白GAL4抗體
IgA Fc片段受體(FcaR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human TMEM87A ELISA Kit配子生成素結(jié)合蛋白1抗體
胰島素樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TMOD1 ELISA Kit鋅指蛋白403/喉癌相關(guān)蛋白1抗體
胰蛋白酶(TRY)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TMEM25 ELISA Kit鳥苷酸環(huán)化酶α2/GCS-α-2抗體
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果解決方案,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存不負眾望,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融共同學習。
如果有細菌或真菌污染交流研討,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加順滑地配合。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶薄弱點。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC上高質量,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時建設應用,盡量縮短觀察時間優化程度,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時應用的因素之一,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞基礎,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測奮勇向前,這樣通骋I作用?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS經驗。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品全技術方案,不得存放于普通住宅內(nèi)基本情況。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作重要的。