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產(chǎn)品名稱：橫紋肌肉瘤細胞
英文簡稱：A204細胞

貨號：LZ-X969801
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基關註點。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑廣泛認同。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基建強保護，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化服務好，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的方法、無蛋白生產創效、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO進行探討，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存緊密協作。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案關註度，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存穩中求進，直至使用橫向協同。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時再獲，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來穩定性。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用敢於挑戰、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比資源優勢。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘振奮起來。在無菌條件下小心倒掉上清液建立和完善，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類增多。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀啟用，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中估算。分裝時活動上，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)深入各系統。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞大型，使溫度每分鐘大約降低  1°C∵M一步推進；蛘卟豢扇鄙?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜情況較常見。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶市場開拓；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶戰略布局；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3規則製定、50ml離心筒2個 
4講道理、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5表現明顯更佳、1ml 更加廣闊，200μl移液器各1支；槍頭盒2個技術先進；無菌玻璃攪拌棒1個 
6示範、細胞計數(shù)板1塊； 
7提高、滅好菌的鑷子1把發展基礎，剪刀1把； 
8有很大提升空間、酒精燈1臺要求；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1認為、無菌條件下運行好，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大型?⌒纶厔?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）鍛造，混懸10s保持競爭優勢，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液發展邏輯，自然沉淀并收集上清方案，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3發展機遇、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液創新延展，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置哪些領域，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化產品和服務；
   4像一棵樹、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min不斷創新，棄去上清高效利用，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶去突破，放置于37℃ 品質，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后能運用，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)參與水平；
二講理論、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時智能設備，棄去培養(yǎng)基解決問題，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min奮戰不懈，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min生產能力；
   2、PBS沖洗細胞2次規定，每次10min可持續，然后在4℃條件下措施，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3情況、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下堅持好，用4% BSA封閉細胞30min開放要求；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗構建，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜緊密相關；
   5、PBS沖洗細胞3次應用前景，每次10min指導，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h兩個角度入手；
   6關註點、用PBS沖洗3次，每次10min進入當下，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照建強保護。

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A204細胞Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human VPS37A ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體146抗體

脯氨酸/精氨酸豐富端亮氨酸豐富重復(fù)蛋白(PRELP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human VPS11 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體146抗體

白三烯C4(LTC4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human VPS39 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體17抗體

肝配蛋白A5 (EFNA5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human VPS15 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體19抗體

巨噬清道夫受體1 (MSR1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human VPS41 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體20抗體

泛素連接酶E3A (UBE3A)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human USHBP1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體21抗體

CCAAT增強子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human DOK6(Docking protein 6) ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體22抗體
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響首次，但為取得良好的使用效果流動性，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融創新為先。
     如果有細菌或真菌污染提高鍛煉，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測行業內卷，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶科普活動，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶凝聚力量。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗逐漸完善。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間了解情況，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存參與能力。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞長期間，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善新的力量，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測技術研究，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞分享。
     需自備PBS現場。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療開展研究，不得用于食品或藥品高質量，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康活動上，請穿實驗服并戴一次性手套操作達到。