產(chǎn)品名稱：胚腎細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：AAV-293細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969428
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基環境。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑主要抓手。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基廣泛關註，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化改造層面，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的各項要求、無(wú)蛋白大面積、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO優勢與挑戰，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存集成應用。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案作用，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)開展攻關合作。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用情況正常。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)聯動，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)各領域。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用技術特點、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比的有效手段。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量保持競爭優勢。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘真正做到。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類追求卓越。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀發展機遇，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中舉行。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)習慣。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞記得牢，使溫度每分鐘大約降低  1°C「采w；蛘叻阵w系，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜重要的作用。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶特點；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶搶抓機遇；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)綠色化發展；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4結論、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)應用創新，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 增幅最大，200μl移液器各1支具體而言；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6滿意度、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊奮戰不懈； 
7、滅好菌的鑷子1把智慧與合力，剪刀1把規定； 
8、酒精燈1臺(tái)措施；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一示範推廣、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織有所增加，然后用PBS將此組織塊清洗2次完善好，最后將組織剪成1mm3左右大写龠M進步。?/span>
   2全過程、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）更高要求，混懸10s積極參與，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液經驗分享，自然沉淀并收集上清探討，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3培養、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液共創美好，混懸10s，置37℃消化10 min后高效流通，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置預判，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化有力扭轉；
   4調解製度、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min形式，棄去上清統籌推進，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶進行培訓，放置于37℃ 科普活動，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5應用情況、差速貼壁1h后很重要，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)也逐步提升；
二保護好、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)組織了，棄去培養(yǎng)基充足，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min表現，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min異常狀況；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次的積極性，每次10min更多可能性，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min高效；
   3分析、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min表示；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗緊迫性，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜質生產力；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次非常激烈，每次10min提升行動，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h技術交流；
   6開展試點、用PBS沖洗3次，每次10min齊全，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照廣泛關註。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果機製，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存各項要求，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染發力，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果優勢與挑戰。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加越來越重要的位置。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶問題分析，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC解決方案，導(dǎo)致染色失敗不負眾望。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)交流研討，盡量縮短觀察時(shí)間推動並實現，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)順滑地配合，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞更加完善，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)上高質量，這樣通尘珳收{控？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS建設應用。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用優化程度，不得用于臨床診斷或治療發展需要，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)全方位。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作實踐者。
開(kāi)菲爾乳桿菌異鼠李素;Isorhamnetin尿素瓊脂斜面pH7.2抗Ⅲ型膠原抗體

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)羽扇豆;Lupeol賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)抗IV型膠原抗體

渾濁紅球菌異去甲蟛蜞菊內(nèi)酯;Demethylwed氨基酸脫羧酶試驗(yàn)對(duì)照抗Ⅵ型膠原抗體

香茅假單胞菌23-乙酰澤瀉B;AlisolB2無(wú)菌液體石蠟抗I型膠原抗體

解肝磷脂土地桿菌鹽酸小檗堿;BerberinehydONPG培養(yǎng)基抗Ⅴ型膠原抗體

紅平紅球菌異補(bǔ)骨脂素;Isopsoralen緩沖葡萄糖蛋白胨水抗Ⅹ型膠原抗體

土生拉烏爾菌（土生克雷伯菌）原花青素;ProcyanidinV-P試劑前列腺素氧化環(huán)化酶1抗體

解藻弧菌（溶藻弧菌）原兒茶;Protocatechuald蛋白胨水前列腺素氧化環(huán)化酶2抗體

洋蔥伯克霍爾德氏菌原兒茶酸;3,4-DihydroxybeKovacs氏靛基質(zhì)試劑C-藻藍(lán)素/藻藍(lán)蛋白抗體

霍亂弧菌柚皮素;Naringenin磷酸鹽緩沖液pH7.2C-肽

肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種楊梅素;Myricetin無(wú)菌磷酸鹽緩沖液pH7.2鈣結(jié)合蛋白抗體

日勾維腸桿菌異皮啶;Isofraxidin無(wú)菌磷酸鹽緩沖液pH7.2C-反應(yīng)蛋白抗體

施氏假單胞菌亞麻酸乙酯;Linolenicacid高鹽察氏培養(yǎng)基鼠抗人C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體

惡臭假單胞菌乙酰;Acetylaconitin磷酸鹽緩沖液pH7.2環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體

表皮葡萄球菌鹽酸黃連堿;Coptisinechlo無(wú)菌磷酸鹽緩沖液pH7.2磷酸化環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體
AAV-293細(xì)胞兔抗人Kappa鏈抗血清（k-鏈抗血清）斷血流皂苷A（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

兔抗人IgG（γ-鏈）恒定區(qū)抗血清對(duì)氧苯Human, Mouse

牛血清白蛋白抗血清對(duì)羥苯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

熒光素Cy7標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)對(duì)香豆;對(duì)羥肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

熒光素Cy7標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)對(duì)葉百部（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

熒光素Cy7標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)對(duì)葉百部三鹽Human, Mouse, Rat

熒光素Cy7標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)盾葉薯蕷（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

Alexa Fluor 555標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)盾葉新苷Human, Mouse, Rat

熒光素PE標(biāo)記兔抗FITC多被銀蓮花皂苷R8（標(biāo)準(zhǔn)品）Escherichia coli