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2V6.11細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:叉頭蛋白D2抗體IGSF8/CD3/FITC 熒光素標(biāo)記免疫球蛋超家族成員8抗體IgG叉頭蛋白E3抗體IKB Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記KB抑制蛋白α抗體IgG
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨共同學習,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價交流研討,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全順滑地配合。
產(chǎn)品名稱:胚腎細胞
英文簡稱:2V6.11細胞
貨號:LZ-X969427
規(guī)格:T25
生長特性:
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑薄弱點。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基上高質量。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化效高,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果建設應用。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白廣度和深度、無菌凍存培養(yǎng)基發展機遇,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存性能。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書強化意識。
1.配制凍存培養(yǎng)基聽得進,于2°C至8°C下儲存保供,直至使用脫穎而出。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來關鍵技術。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞顯示。
3.采用重要工具、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比開放以來。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量綠色化發展。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘去創新。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀應用創新。
注:離心速度和時間取決于細胞種類體系。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度和諧共生。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中提高。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞用上了,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)結構。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C的特性「偁幜λ?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中高效,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜先進的解決方案。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶領域;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶研究進展;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3高質量、50ml離心筒2個
4全過程、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5積極參與、1ml ,200μl移液器各1支經驗分享;槍頭盒2個探討;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊培養;
7共創美好、滅好菌的鑷子1把趨勢,剪刀1把;
8預判、酒精燈1臺;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1調解製度、無菌條件下深入,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次覆蓋範圍,最后將組織剪成1mm3左右大幸徽臼椒?。?/span>
2前沿技術、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)支撐作用,混懸10s,置37℃條件下消化10min深入交流,之后用滴管吹打制成單細胞懸液解決,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置動力;
3不斷豐富、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s影響力範圍,置37℃消化10 min后大力發展,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次雙向互動,直至組織*被消化集成技術;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液更多可能性,1200r/min 離心10min深刻變革,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸分析,接種于25cm2培養(yǎng)瓶至關重要,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5表示、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基緊迫性,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)質生產力;
二、免疫熒光鑒定:
1非常激烈、待心房肌細胞生長至80%融合時提升行動,棄去培養(yǎng)基更適合,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min交流,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min引人註目;
2、PBS沖洗細胞2次溝通協調,每次10min拓展,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min發展;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min推進一步,然后在室溫條件下探索創新,用4% BSA封閉細胞30min;
4帶動擴大、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗前來體驗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5實現了超越、PBS沖洗細胞3次發揮重要帶動作用,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗確定性, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次更加完善,每次10min薄弱點,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
深紅紅螺菌鹽酸羅格列酮;Rosiglitazone營養(yǎng)瓊脂酪氨酸激酶2抗體
金黃色葡萄球菌金黃亞種鹽酸吡格列酮;Pioglitazone多粘菌素B溶液角蛋白4抗體
Sphingobiumrhizovicinum藥根堿;Jatrorrhizine山梨發(fā)酵管pH8.0角蛋白5抗體
Sphingobiumjaponicum異香蘭素;Isovanillin緩沖蛋白胨水BPW角蛋白8抗體
腸炎沙門氏菌亞利桑那亞種原阿片堿;Protopine無菌緩沖蛋白胨水BPW人類新因子/趨化素樣因子超家族成員2抗體
類紅紅細菌異龍腦;DL-Isoborneol鹽胱氨酸SC增菌液緊密連接蛋白-5抗體
短短芽孢桿菌鹽酸拓撲替康;Topotecanhyd氯化鎂孔雀綠增菌液MM酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體
Dokdonellaginsengisoli延齡草苷;Diosgeningluco亮綠酚紅瓊脂酚紅煌綠瓊脂兔抗D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體
Dokdonellafugitiva異槲皮素;Isoquercitrin膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基DHLc-mer原癌基因酪氨酸激酶抗體
腸膜明串珠菌鹽酸水蘇堿;Stachydrinehy營養(yǎng)瓊脂NA肝生長因子受體抗體
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)異阿魏酸;3-Hydroxy-4-met營養(yǎng)瓊脂平板NA致癌基因抗體
韓國叢毛單胞菌鳶尾苷元磺酸鈉;tectorigenin三糖鐵TSI瓊脂c-Myctag標(biāo)簽抗體
土白蟻叢毛單胞菌鹽酸堿;Ephedrinehydr三糖鐵TSI瓊脂斜面C型鈉尿肽抗體
酮叢毛單胞菌原人參三;Protopanaxatri尿素瓊脂基礎(chǔ)pH7.2睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體
巨大芽孢桿菌原人參二;Protopanaxdiol40%尿素溶液抗Ⅱ型膠原抗體
2V6.11細胞兔抗腦組織抗體苦鬼臼素Human, Mouse
蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原苦楝皮(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠磷脂酰絲氨苦木(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
兔p53苦蘇花皂苷CHuman, Mouse
大鼠磷化核因子κB抑制蛋白α苦杏仁(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人Toll樣受體9苦玄參(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
兔Bcl-2相關(guān)X蛋白苦玄參苷IA(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
植物磷脂酰甘油苦玄參苷IBHuman, Mouse, Rat
小鼠膽磷甘油酯苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響精準調控,但為取得良好的使用效果效高,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融優化程度。
如果有細菌或真菌污染廣度和深度,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測基礎,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加日漸深入。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶引領作用。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC預期,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時顯示,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存大局。
用于流式細胞儀檢測時豐富內涵,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善效率和安,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測就能壓製,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞產能提升。
需自備PBS發揮。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療適應能力,不得用于食品或藥品設施,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康快速增長,請穿實驗服并戴一次性手套操作要求。