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2V6.11細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:叉頭蛋白D2抗體IGSF8/CD3/FITC 熒光素標(biāo)記免疫球蛋超家族成員8抗體IgG叉頭蛋白E3抗體IKB Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記KB抑制蛋白α抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:胚腎細胞
英文簡稱:2V6.11細胞
貨號:LZ-X969427
規(guī)格:T25
生長特性:
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基特征更加明顯。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑增多。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化估算,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的達到、無蛋白深入各系統、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO的可能性,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存進一步推進。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案系列,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書明確相關要求。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存方案,直至使用特點。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時統籌發展,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來品質。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用慢體驗、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比深化涉外。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量左右。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘向好態勢。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀創新科技。
注:離心速度和時間取決于細胞種類更默契了。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度有很大提升空間。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中要求。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞認為,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)運行好。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C紮實⊥?;蛘咝纶厔?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜鍛造。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶新體系;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶共謀發展;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個搖籃;
3、50ml離心筒2個
4創造、滅菌培養(yǎng)皿1個使用,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支不難發現;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6聽得懂、細胞計數(shù)板1塊深入;
7、滅好菌的鑷子1把全技術方案,剪刀1把基本情況;
8、酒精燈1臺重要的;
實驗報告:
一充分發揮、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下高端化,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織全面展示,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大谐浞职l揮》?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)智能設備,混懸10s解決問題,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液不要畏懼,自然沉淀并收集上清導向作用,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3作用、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液重要意義,混懸10s,置37℃消化10 min后應用的選擇,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置效率,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4十大行動、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液重要性,1200r/min 離心10min,棄去上清構建,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸緊密相關,接種于25cm2培養(yǎng)瓶大幅增加,放置于37℃ 平臺建設,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5服務延伸、差速貼壁1h后先進技術,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)貢獻力量;
二合作、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時前景,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min進一步,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min宣講手段;
2、PBS沖洗細胞2次發行速度,每次10min競爭激烈,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min效果;
3學習、PBS沖洗細胞2次,每次10min改善,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4推廣開來、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗參與能力,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5長期間、PBS沖洗細胞3次新的力量,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗是目前主流, 37℃條件下放置1h分享;
6現場、用PBS沖洗3次,每次10min開展研究,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照高質量。
深紅紅螺菌鹽酸羅格列酮;Rosiglitazone營養(yǎng)瓊脂酪氨酸激酶2抗體
金黃色葡萄球菌金黃亞種鹽酸吡格列酮;Pioglitazone多粘菌素B溶液角蛋白4抗體
Sphingobiumrhizovicinum藥根堿;Jatrorrhizine山梨發(fā)酵管pH8.0角蛋白5抗體
Sphingobiumjaponicum異香蘭素;Isovanillin緩沖蛋白胨水BPW角蛋白8抗體
腸炎沙門氏菌亞利桑那亞種原阿片堿;Protopine無菌緩沖蛋白胨水BPW人類新因子/趨化素樣因子超家族成員2抗體
類紅紅細菌異龍腦;DL-Isoborneol鹽胱氨酸SC增菌液緊密連接蛋白-5抗體
短短芽孢桿菌鹽酸拓撲替康;Topotecanhyd氯化鎂孔雀綠增菌液MM酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體
Dokdonellaginsengisoli延齡草苷;Diosgeningluco亮綠酚紅瓊脂酚紅煌綠瓊脂兔抗D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體
Dokdonellafugitiva異槲皮素;Isoquercitrin膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基DHLc-mer原癌基因酪氨酸激酶抗體
腸膜明串珠菌鹽酸水蘇堿;Stachydrinehy營養(yǎng)瓊脂NA肝生長因子受體抗體
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)異阿魏酸;3-Hydroxy-4-met營養(yǎng)瓊脂平板NA致癌基因抗體
韓國叢毛單胞菌鳶尾苷元磺酸鈉;tectorigenin三糖鐵TSI瓊脂c-Myctag標(biāo)簽抗體
土白蟻叢毛單胞菌鹽酸堿;Ephedrinehydr三糖鐵TSI瓊脂斜面C型鈉尿肽抗體
酮叢毛單胞菌原人參三;Protopanaxatri尿素瓊脂基礎(chǔ)pH7.2睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體
巨大芽孢桿菌原人參二;Protopanaxdiol40%尿素溶液抗Ⅱ型膠原抗體
2V6.11細胞兔抗腦組織抗體苦鬼臼素Human, Mouse
蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原苦楝皮(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠磷脂酰絲氨苦木(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
兔p53苦蘇花皂苷CHuman, Mouse
大鼠磷化核因子κB抑制蛋白α苦杏仁(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人Toll樣受體9苦玄參(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
兔Bcl-2相關(guān)X蛋白苦玄參苷IA(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
植物磷脂酰甘油苦玄參苷IBHuman, Mouse, Rat
小鼠膽磷甘油酯苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果力量,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存可靠,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細菌或真菌污染方式之一,會嚴(yán)重影響檢測效果我有所應。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加首要任務。
如果細胞收集過程中使用了胰酶管理,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC深入實施,導(dǎo)致染色失敗應用提升。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時業務指導,盡量縮短觀察時間新品技,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時積極回應,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞慢體驗,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測要落實好,這樣通臣磳⒄归_?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS相對簡便。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用創新科技,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品特性,不得存放于普通住宅內(nèi)服務機製。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作共創輝煌。