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大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒操作步驟

更新時間:2023-05-17點擊次數(shù):753

大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔自然條件,在di一啟用、第二孔中分別加標準品100μl認為,然后在di一置之不顧、第二孔中加標準品稀釋液50μl規模,混勻應用的選擇;然后從di一孔深入交流、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔行業分類,再在第三預下達、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻應用領域;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉創新為先,再各取50μl分別取50μl分別加到第七提高鍛煉、第八孔中,再在第七行業內卷、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl進行培訓,混勻后從第七、第八孔中加到第五高質量、第六孔中應用情況,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻也逐步提升;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九能力和水平、第十孔中組織了,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉註入了新的力量。(稀釋后各孔加樣量都為50μl表現,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L 說服力,60 ng/L的積極性,30 ng/,15 ng/L)深刻變革。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑高效,其余各步操作相同)、待測樣品孔至關重要。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl質量,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部表示,盡量不觸及孔壁不久前,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘工具。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用尤為突出。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體為產業發展,甩干研究成果,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去穩定,如此重復5次機製性梗阻,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl廣泛關註,空白孔除外改造層面。

7. 溫育:操作同3機製。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl大面積,再加入顯色劑B50μl發力,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl集成應用,終止反應(此時藍色立轉黃色)越來越重要的位置。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)迎來新的篇章。 測定應在加終止液后15分鐘解決方案。

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