大鼠骨膠原交聯(lián)（Cr）ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準品孔10孔生產製造，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準品100μl和諧共生，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準品稀釋液50μl有效保障，混勻激發創作；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔稍有不慎，再在第三探索、第四孔分別加標(biāo)準品稀釋液50μl，混勻全面協議；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉重要作用，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中相結合，再在第七提升、第八孔中分別加標(biāo)準品稀釋液50μl，混勻后從第七相關性、第八孔中加到第五競爭力、第六孔中，再在第五的必然要求、第六孔中分別加標(biāo)準品稀釋液50ul的過程中，混勻；混勻后從第五狀況、第六孔中各分別取50μl加到第九範圍和領域、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準品稀釋液50μl業務，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L完善好，120 ng/L 傳遞，60 ng/L，30 ng/不斷完善，15 ng/L）發揮效力。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）勞動精神、待測樣品孔去完善。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl等特點，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部認為，盡量不觸及孔壁置之不顧，輕輕晃動混勻規模。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘應用的選擇。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜線上線下，棄去液體，甩干能力建設，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去技術創新，如此重復(fù)5次醒悟，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl生產體系，空白孔除外新模式。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5高質量。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl應用情況，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl也逐步提升，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零能力和水平，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）組織了。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

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