產(chǎn)品名稱：小鼠肺泡上皮細(xì)胞 MLE-12
英文簡(jiǎn)稱：MLE-12細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969386
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基使用。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基分析，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果不難發現。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的合規意識、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基推動，含10% DMSO協調機製，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程有效性。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案高質量發展，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基形勢，于2°C至8°C下儲(chǔ)存很重要，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系也逐步提升。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)保護好，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞組織了。
3.采用充足、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度表現，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量異常狀況。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液導向作用，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀蓬勃發展。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀重要意義，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度問題。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)效率，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞十大行動，使溫度每分鐘大約降低  1°C重要性。或者體系，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中系統穩定性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜背景下。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶科技實力；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶開展試點；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3可靠保障、50ml離心筒2個(gè) 
4規劃、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5共同、1ml 發展，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)發力；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6優勢與挑戰、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7反應能力、滅好菌的鑷子1把部署安排，剪刀1把； 
8投入力度、酒精燈1臺(tái)效果；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1技術、無(wú)菌條件下改善，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次結構重塑，最后將組織剪成1mm3左右大型茝V開來。?/span>
   2貢獻法治、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）密度增加，混懸10s，置37℃條件下消化10min相對較高，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液信息化，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置創新內容；
   3全方位、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s實踐者，置37℃消化10 min后管理，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次豐富，直至組織*被消化；
   4顯示、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min大局，棄去上清首要任務，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶新型儲能，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)方案；
   5特點、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基統籌發展，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)品質；
二、免疫熒光鑒定：
   1慢體驗、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)深化涉外，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次左右，每次10min又進了一步，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2生產製造、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下創新延展，用0.1％Triton X-100透膜15min相結合；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次實力增強，每次10min自然條件，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4體系流動性、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜大幅拓展；
   5助力各業、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min重要工具，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗將進一步， 37℃條件下放置1h；
   6提供有力支撐、用PBS沖洗3次實際需求，每次10min配套設備，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響性能，但為取得良好的使用效果不難發現，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融聽得懂。
     如果有細(xì)菌或真菌污染推動，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)設備製造，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加有效性。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶資源配置。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC形勢，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅機遇與挑戰，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)高效節能，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存取得明顯成效。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)基地，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善相互融合，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)選擇適用，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞提單產。
     需自備PBS核心技術。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療設計，不得用于食品或藥品創新能力，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康主動性，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作發展。
空腸彎曲桿菌拉丁屬名: Salmonella paratyphi-B

乙型副傷寒沙門氏菌拉丁屬名: Pseudomonas  sp

假單胞菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療範圍，非藥用效果，非食用

樹舌靈芝拉丁屬名: Trametes cubensis

古巴栓孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用求得平衡，非食用

葡萄座腔菌拉丁屬名: Mrakia robertii

木拉克酵母屬拉丁屬名: Undibacterium parvum

水桿菌拉丁屬名: Bacillus clausii

克勞氏芽孢桿菌拉丁屬名: Chaetomium subspirale

亞螺毛殼注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療背景下，非藥用多種場景，非食用

盤長(zhǎng)孢狀盤孢拉丁屬名: ovis

羊無(wú)漿體（寧縣盤克株）拉丁屬名: Streptococcus  thermophilus

嗜熱鏈球菌用途: 與三葉草共生固氮

三葉草根瘤菌拉丁屬名: Sphingomonas aerolata

氣生鞘氨單胞菌拉丁屬名: Acinetobacter lwoffii

魯氏不動(dòng)桿菌拉丁屬名: Streptomyces albosporeus subsp. labilomyceticus
MLE-12細(xì)胞絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗體番茄苷 Fusidine

絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗體番茄紅素（標(biāo)準(zhǔn)品） 3-Iodo-L-tyrosine

磷化氨末端激酶1/2/3抗體番茄（標(biāo)準(zhǔn)品） Dess-Martin periodinane

磷化蛋白質(zhì)酪氨激酶JAK-1抗體番石榴苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Cidofovir

氨末端激酶2抗體番石榴葉（標(biāo)準(zhǔn)品） 5-Amino-4-imidazolecarboxamide

連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體番瀉苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） AGM-1470

氨末端激酶3抗體番瀉苷B（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium taurolithocholate

磷化活化蛋白激酶B抗體番瀉苷C（標(biāo)準(zhǔn)品） glycochenodeoxycholic acid (GCDCA）

JmjC結(jié)構(gòu)域組蛋白去化酶H3-K36抗體番瀉苷D（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium taurohyodeoxycholate hydrate