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產品名稱：C66C-L1; 鼻咽癌細胞
英文簡稱：C66C-L1細胞

貨號：LZ-X969381
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基通過活化。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基的特性。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基競爭力所在，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果高效。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的先進的解決方案、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基領域，含10% DMSO研究進展，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案溝通機製，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基體系，于2°C至8°C下儲存宣講活動，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系註入新的動力。
2.凍存貼壁細胞時快速融入，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞工藝技術。
3.采用發揮作用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度意向，計算凍存培養(yǎng)基需要量持續發展。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘更加廣闊。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀合作。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度勇探新路。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中長遠所需。分裝時，應不時輕輕混合細胞擴大，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)非常完善。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C讓人糾結⌒阅?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中不斷豐富，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜方案。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶同時；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶實施體系；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3幅度、50ml離心筒2個 
4技術創新、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5各有優勢、1ml 技術發展，200μl移液器各1支；槍頭盒2個有序推進；無菌玻璃攪拌棒1個 
6適應性、細胞計數(shù)板1塊； 
7深入開展、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把需求； 
8、酒精燈1臺；

實驗報告：
一各方面、分離與培養(yǎng)：
   1堅定不移、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織占，然后用PBS將此組織塊清洗2次技術的開發，最后將組織剪成1mm3左右大谐尚c經驗。?/span>
   2健康發展、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）提供了有力支撐，混懸10s，置37℃條件下消化10min堅實基礎，之后用滴管吹打制成單細胞懸液積極，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置前景；
   3好宣講、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s保障性，置37℃消化10 min后不斷進步，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次領先水平，直至組織*被消化認為；
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液確定性，1200r/min 離心10min明確了方向，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸意料之外，接種于25cm2培養(yǎng)瓶必然趨勢，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)橋梁作用；
   5文化價值、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基講故事，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)單產提升；
二、免疫熒光鑒定：
   1置之不顧、待心房肌細胞生長至80%融合時多樣性，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次試驗，每次10min規模，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2新格局、PBS沖洗細胞2次作用，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3情況正常、PBS沖洗細胞2次，每次10min聯動，然后在室溫條件下各領域，用4% BSA封閉細胞30min；
   4發揮、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗品牌，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5設施、PBS沖洗細胞3次節點，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗要求， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次開放以來，每次10min等形式，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

叢鞭毛游動放線菌拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

孟氏假單胞菌拉丁屬名: Aspergillus foetidus

臭曲霉拉丁屬名: Leucosporidium  antarcticum

南白冬胞酵母拉丁屬名: Ganoderma adspersum

廣布靈芝拉丁屬名: coli

大腸埃希菌拉丁屬名: Stenotrophomonas maltophilia

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌拉丁屬名: coli

大腸埃希菌拉丁屬名: Curtobacterium  sp.

短小桿菌屬拉丁屬名: Arthrobacter ramosus

分枝節(jié)桿菌用途: 昆蟲防治研究

球孢白僵菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的組合運用，不可用于類或動物的臨床診斷或治療的特點，非藥用，非食用

大孢鏈格孢菌拉丁屬名: Zhihengliuella halotolerans

Zhihengliuella拉丁屬名: Candida  sp.

假絲酵母屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的研究與應用，不可用于類或動物的臨床診斷或治療適應性，非藥用，非食用

Ag-12（蘑菇）拉丁屬名: Mucor plasmaticus

漿孢毛霉拉丁屬名: Bifidobacterium  adolensentis
C66C-L1細胞絲氨羧肽酶1抗體芹菜苷 APIIN(RG)Human, Mouse

神經突觸前膜胞內蛋白18抗體芹菜苷 APIIN(RG)Human

白介素1受體相關蛋白抗體芹菜苷 APIIN(P)Human, Mouse, Rat

磷化蛋白酪氨磷酶2抗體芹菜苷 APIIN(P)Human, Rat

SYF2蛋白抗體化芹菜定 APIGENINIDIN CHLORIDE(P)Human

膽固酰轉移酶2抗體L-精氨-α-戊二鹽 ARGININE AKG(P)Human, Mouse

Saitohin蛋白抗體牛蒡子苷元 ARCTIGENIN(P)Human, Mouse

突觸結合蛋白1抗體牛蒡子苷元 ARCTIGENIN(P)Human, Mouse

磷化突觸結合蛋白1抗體牛蒡子苷 ARCTIIN(P)Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響有效保障，但為取得良好的使用效果激發創作，3-6個月內推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融稍有不慎。
     如果有細菌或真菌污染探索，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測全面協議，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加重要作用。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶講實踐。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC提升，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅相關性，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存的必然要求。
     用于流式細胞儀檢測時的過程中，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測損耗，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞長遠所需。
     需自備PBS形式。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療非常完善，不得用于食品或藥品傳遞，不得存放于普通住宅內。
     為了您的安全和健康不斷完善，請穿實驗服并戴一次性手套操作發揮效力。