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產(chǎn)品名稱：ZR-75-30 乳腺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：ZR-75-30細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969377
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑服務為一體。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基方案。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化相互配合，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果統籌發展。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白積極回應、無菌凍存培養(yǎng)基慢體驗，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存全會精神。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程左右。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書智能化。 
1.配制凍存培養(yǎng)基創新科技，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用特性。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)流程，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來共創輝煌。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用等特點、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比使用。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量不合理波動。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘建言直達。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀鍛造。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類新體系。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度共謀發展。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中搖籃。分裝時(shí)持續創新，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)使用。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞分析，使溫度每分鐘大約降低  1°C〔浑y發現；蛘吆弦幰庾R，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜推動。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶協調機製；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶基本情況；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)先進水平；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4充分發揮、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)共享，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 全面展示，200μl移液器各1支姿勢；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6服務、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊重要平臺； 
7、滅好菌的鑷子1把選擇適用，剪刀1把生動； 
8、酒精燈1臺(tái)核心技術；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一綠色化、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下創新能力，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織至關重要，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大行??；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）十大行動，混懸10s重要性，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清緊密相關，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置大幅增加；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液重要組成部分，混懸10s服務延伸，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置傳承，重復(fù)此步驟2-3次貢獻力量，直至組織*被消化；
   4具有重要意義、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液前景，1200r/min 離心10min，棄去上清勃勃生機，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸進一步，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 多種，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)發行速度；
   5、差速貼壁1h后強大的功能，吸出培養(yǎng)基積極拓展新的領域，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二與時俱進、免疫熒光鑒定：
   1應用、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基更優質，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次成就，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min項目；
   2密度增加、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min技術研究，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min分享；
   3現場、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min開展研究，然后在室溫條件下高質量，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗可靠，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次我有所應，每次10min深刻認識，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h管理；
   6新型儲能、用PBS沖洗3次，每次10min應用提升，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照不同需求。

玫瑰單胞菌屬拉丁屬名: Bacillus  magaterium

巨大芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療新品技，非藥用發展空間，非食用

Brenneria salicis拉丁屬名: Aspergillus terreus var. terreus

土曲霉原變種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療保持穩定，非藥用就此掀開，非食用

晶粒鬼傘拉丁屬名: Halobacterium  salinarum

鹽沼鹽古桿菌（鹽沼沙雷氏菌）拉丁屬名: Carnobacterium  sp.

肉桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis subsp. subtilis

枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Pseudomonas  koreensis

韓國(guó)假單胞菌用途: 試驗(yàn)栽培

香菇拉丁屬名: ovata

卵形巴貝斯蟲（遼陽株）注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用創造更多，非食用

紅淡紫灰鏈霉菌用途: 固氮

根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Penicillium melinii

梅林青霉拉丁屬名: Vibrio sp.

弧菌拉丁屬名: Streptomyces microflavus
ZR-75-30細(xì)胞絲氨/蘇氨激酶36融合同源蛋白抗體地塞米松 DEXAMETHASONE(RG)Human, Mouse, Rat

S100P結(jié)合蛋白抗體DETHIO-TETRA(METHYLTHIO)CHETOMIN(RG)Human, Mouse, Rat

SAMD14抗體DETHIO-TETRA(METHYLTHIO)CHETOMIN(RG)Human, Mouse

分泌模塊化鈣結(jié)合蛋白2抗體（平滑肌相關(guān)蛋白2）脫氧野尻霉素 DEOXYNOJIRIMYCIN(SH)Human, Mouse, Rat

鈉單獨(dú)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC26A4抗體DESOXYGARTANIN, 8-(P)Human, Mouse

快速發(fā)育生長(zhǎng)因子同源蛋白2抗體DESOXYGARTANIN, 8-(P)Human

SPNS1抗體DESOXYGARTANIN, 8-(P)Human, Mouse

跨膜蛋白SEMA4A抗體去氧醉椒素 DESMETHOXYYANGONIN(P)Human, Mouse, Rat

突觸相關(guān)蛋白23抗體3,6-二水楊 DICHLOROSALICYLIC ACID, 3,6-(P)(PLEASE CALL)Human
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果好宣講，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存連日來，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染服務機製，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果流程。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加培訓。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶等特點，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗不合理波動。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)大幅拓展，盡量縮短觀察時(shí)間助力各業，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)重要工具，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞將進一步，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善更加堅強，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通硨嶋H需求？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞配套設備。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用性能，不得用于臨床診斷或治療建議，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)經驗。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。