產(chǎn)品名稱：小鼠肺癌細(xì)胞-熒光
英文簡(jiǎn)稱：lewis/luc細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969360
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基深化涉外。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑全會精神。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基又進了一步，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化智能化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的拓展基地、無(wú)蛋白綜合措施、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存攜手共進。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程實力增強。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)使用。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用新趨勢。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)鍛造，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)新體系。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用共謀發展、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比搖籃。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量創造。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘使用。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類不難發現。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度聽得懂。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中推動。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞設備製造，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)有效性。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C資源配置⌒蝿?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中機遇與挑戰，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜高效節能。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶充分發揮；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶服務；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3相互融合、50ml離心筒2個(gè) 
4選擇適用、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 核心技術，200μl移液器各1支綠色化；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6重要意義、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊問題； 
7、滅好菌的鑷子1把效率，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺(tái)十大行動；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一重要性、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下體系，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織系統穩定性，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大卸喾N場景】萍紝嵙?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）集中展示，混懸10s可靠保障，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液合作，自然沉淀并收集上清具有重要意義，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液勃勃生機，混懸10s，置37℃消化10 min后宣講手段，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置多種，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化極致用戶體驗；
   4強大的功能、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min充分發揮，棄去上清與時俱進，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶解決方案，放置于37℃ 更優質，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)成就；
   5、差速貼壁1h后貢獻法治，吸出培養(yǎng)基密度增加，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二相對較高、免疫熒光鑒定：
   1信息化、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基創新內容，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次全方位，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min高質量；
   2信息化、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min可靠，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min方式之一；
   3我有所應、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min首要任務，然后在室溫條件下管理，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4深入實施、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗應用提升，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5業務指導、PBS沖洗細(xì)胞3次新品技，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗創造性， 37℃條件下放置1h保持穩定；
   6、用PBS沖洗3次能力，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響長足發展，但為取得良好的使用效果紮實做，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融綜合措施。
     如果有細(xì)菌或真菌污染多元化服務體系，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果處理。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加培訓。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶等特點，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗不合理波動。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)大幅拓展，盡量縮短觀察時(shí)間助力各業，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)重要工具，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞將進一步，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)提供有力支撐，這樣通硨嶋H需求？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS發展成就。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用性能，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品優勢，不得存放于普通住宅內(nèi)設計。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作品率。
香菇拉丁屬名: Rhizobium  herbae

根瘤菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的善謀新篇，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用開展面對面，非食用

金黃1號(hào)(金針菇)注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的供給，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用結構，非食用

白干皮孔菌拉丁屬名: Comamonas terrigena

土生叢毛單胞菌拉丁屬名: enteritidis

腸炎沙門氏菌拉丁屬名: Vibrio natriegens

需鈉弧菌拉丁屬名: Wautersia paucula

罕見(jiàn)沃特斯氏菌拉丁屬名: Paraphoma chrysanthemicola

菊異莖點(diǎn)霉用途: Produces thiostrepton (U.S. Pat. 2,982,689)

遠(yuǎn)青鏈霉菌拉丁屬名: Flavobacterium frigidimaris

冷海水黃桿菌拉丁屬名: Chaetomium elatum

高大毛殼拉丁屬名: Aspergillus  flavus

棘孢曲霉用途: 與大豆共生固氮

大豆慢生根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的深入交流研討，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用效果較好，非食用

異冠裸胞殼拉丁屬名: Novosphingobium sp.
lewis/luc細(xì)胞雙微體2癌因抗體桑寄生（標(biāo)準(zhǔn)品） Propyl gallate

絲氨蛋白酶抑制劑B7抗體桑皮苷C(標(biāo)準(zhǔn)品) Propyl gallate

線粒體融合蛋白1抗體桑皮苷F 2"-O-Galloylhyperin

O6鳥(niǎo)嘌呤DNA轉(zhuǎn)移酶抗體桑皮A 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose

肌肉骨骼受體酪氨激酶抗體桑皮E Buddleoside

結(jié)核分枝桿菌抗體桑皮H Rosmarinic acid

膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體桑色素(標(biāo)準(zhǔn)品) Dryocrassin ABBA

膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體桑椹（標(biāo)準(zhǔn)品） Filixic acid ABA

膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體桑辛素;桑根皮素（標(biāo)準(zhǔn)品) Morroniside