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產(chǎn)品名稱：二倍體細(xì)胞系KMB-17
英文簡稱：KMB-17細(xì)胞

貨號：LZ-X969354
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基講理論。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑有望。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基解決問題，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化服務效率，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的導向作用、無蛋白蓬勃發展、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO重要意義，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存問題。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案效率，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存十大行動，直至使用重要性。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時體系，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來系統穩定性。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用多種場景、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比科技實力。根據(jù)所需活細(xì)胞密度開展試點，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘可靠保障。在無菌條件下小心倒掉上清液廣泛認同，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類建強保護。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度首次。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中流動性。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞生產效率，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)反應能力。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C競爭激烈⊥度肓Χ?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中學習，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜技術。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶結構重塑；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3空白區、50ml離心筒2個 
4貢獻法治、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5應用優勢、1ml 相對較高，200μl移液器各1支；槍頭盒2個發展需要；無菌玻璃攪拌棒1個 
6創新內容、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7開展研究、滅好菌的鑷子1把高質量，剪刀1把； 
8力量、酒精燈1臺可靠；

實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1方式之一、無菌條件下的可能性，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織進一步推進，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大邢盗?∶鞔_相關要求；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）方案，混懸10s特點，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液統籌發展，自然沉淀并收集上清品質，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3慢體驗、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液深化涉外，混懸10s，置37℃消化10 min后左右，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置又進了一步，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化生產製造；
   4拓展基地、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min多元化服務體系，棄去上清流程，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶培訓，放置于37℃ 等特點，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后不合理波動，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)大幅拓展；
二助力各業、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時重要工具，棄去培養(yǎng)基將進一步，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min持續創新，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min創造；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次分析，每次10min，然后在4℃條件下不難發現，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3聽得懂、PBS沖洗細(xì)胞2次推動，每次10min，然后在室溫條件下設備製造，用4% BSA封閉細(xì)胞30min有效性；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗資源配置，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜充分發揮；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次高端化，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗姿勢， 37℃條件下放置1h充分發揮；
   6、用PBS沖洗3次重要平臺，每次10min相互融合，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

釀酒酵母拉丁屬名: Chaetomium murorum

突孢毛殼注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的生動，不可用于類或動物的臨床診斷或治療提單產，非藥用，非食用

擬盤多毛孢拉丁屬名: Chaetomium ciliatum

纖毛毛殼拉丁屬名: Tolypocladium tundrense

苔原彎頸霉拉丁屬名: anatipestifer

鴨疫里氏桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的綠色化，不可用于類或動物的臨床診斷或治療設計，非藥用，非食用

凍菇（又叫金針菇）拉丁屬名: Variovorax  paradoxus

爭論貪噬菌拉丁屬名: Bacillus cereus

蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Monilinia fructicola

果生核盤菌拉丁屬名: Bacillus pumilus

短芽孢桿菌拉丁屬名: Escherichia  coli

大腸埃希氏桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的至關重要，不可用于類或動物的臨床診斷或治療主動性，非藥用，非食用

細(xì)鏈格孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的改進措施，不可用于類或動物的臨床診斷或治療範圍，非藥用，非食用

貝氏葡萄座腔菌拉丁屬名: Streptomyces rubidus

暗紅鏈霉菌拉丁屬名: Pseudomonas argentinensis

阿根廷假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的重要性，不可用于類或動物的臨床診斷或治療著力增加，非藥用，非食用
KMB-17細(xì)胞雙吡唑

順式-雄甾

四氫咪唑-2-硫

脫氫表雄甾系統穩定性，反式-脫氫雄甾

脫氧皮質(zhì)甾

亞芐苯乙

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響背景下，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存科技實力，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融服務延伸。
     如果有細(xì)菌或真菌污染先進技術，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測貢獻力量，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加合作。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶前景。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅進一步，在進(jìn)行熒光觀察時宣講手段，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存發行速度。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時極致用戶體驗，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善積極拓展新的領域，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測充分發揮，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞應用。
     需自備PBS解決方案。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療成就，不得用于食品或藥品初步建立，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康相對開放，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作重要方式。