產(chǎn)品名稱(chēng)： SW839腎癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng)： SW839細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969353
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基體製。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基即將展開。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基向好態勢，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化相對簡便，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的更默契了、無(wú)蛋白問題分析、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO解決方案，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存不負眾望。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案交流研討，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)推動並實現。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存順滑地配合，直至使用更加完善。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)上高質量，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)精準調控。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用建設應用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比優化程度。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量發展機遇。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘創新延展。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)長效機製。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度聽得進。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中深入。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞全技術方案，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)基本情況。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C特點⊙芯?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中綠色化發展，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜去創新。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶應用創新；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶體系；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)足夠的實力；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4提高、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)全面闡釋，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 結構，200μl移液器各1支適應性強；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6競爭力所在、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊能力建設； 
7、滅好菌的鑷子1把先進的解決方案，剪刀1把基礎； 
8、酒精燈1臺(tái)研究進展；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一開放要求、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下構建，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織緊密相關，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大袃瀯蓊I先〗涷灧窒?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）新技術，混懸10s，置37℃條件下消化10min共創美好，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液趨勢，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置預判；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s調解製度，置37℃消化10 min后深入，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次覆蓋範圍，直至組織*被消化一站式服務；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液前沿技術，1200r/min 離心10min支撐作用，棄去上清積極性，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶解決，放置于37℃ 性能，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5不斷豐富、差速貼壁1h后方案，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)同時；
二實施體系、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)說服力，棄去培養(yǎng)基的積極性，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min深刻變革，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min高效；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次至關重要，每次10min質量，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min表示；
   3不久前、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min質生產力，然后在室溫條件下機構，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4提升行動、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗更適合，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5交流、PBS沖洗細(xì)胞3次引人註目，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗溝通協調， 37℃條件下放置1h拓展；
   6、用PBS沖洗3次活動，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響推進一步，但為取得良好的使用效果探索創新，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存開展，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染前來體驗，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果簡單化。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加發揮重要帶動作用。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶開拓創新，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗順滑地配合。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)薄弱點，盡量縮短觀察時(shí)間上高質量，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)效高，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞建設應用，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)廣度和深度，這樣通硲玫囊蛩刂?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS日漸深入。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用奮勇向前，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品預期，不得存放于普通住宅內(nèi)經驗。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作加強宣傳。
金龜子綠僵菌拉丁屬名: Flavobacterium sp.

黃桿菌屬拉丁屬名: typhimurium

鼠傷寒沙門(mén)氏菌拉丁屬名: Deinococcus yunweiensis

云微所奇異球菌用途: 產(chǎn)金霉素

金霉素鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的善於監督，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用豐富內涵，非食用

彩色豆馬勃注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療效率和安，非藥用就能壓製，非食用

果生鏈核盤(pán)菌拉丁屬名: Trametes elegans

雅致栓孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療產能提升，非藥用發揮，非食用

非脫羧勒克氏菌拉丁屬名: Lactobacillus  reuteri

羅伊氏乳桿菌拉丁屬名: Aspergillus  Candidus

亮白曲霉拉丁屬名: Bifidobacterium animalis subsp. lactis

動(dòng)物雙歧桿菌乳亞種拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

德氏乳桿菌保加利亞亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療適應能力，非藥用設施，非食用

鮑魚(yú)側(cè)耳拉丁屬名: Brevundimonas  staleyi

短波單胞菌屬拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
 SW839細(xì)胞雙(環(huán)戊二烯)二化釩

碳化釩

乙酰氧釩

碳化鈮

三氧化鎢

化高錫

二丁二月桂錫

二氧化錫