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產(chǎn)品名稱：UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)
英文簡稱：UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)細(xì)胞

貨號：LZ-X969344
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長　

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基順滑地配合。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基薄弱點。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基上高質量，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化精準調控，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的建設應用、無蛋白優化程度、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO應用的因素之一，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存基礎。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案實踐者，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書管理。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存豐富，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時善於監督，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來大局。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用數據、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比效率和安。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量邁出了重要的一步。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘產能提升。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀應用創新。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類體系。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度和諧共生。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中提高。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞用上了，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)結構。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C的特性「偁幜λ?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中高效，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜先進的解決方案。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶自然條件；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 
4體系流動性、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5深度、1ml 助力各行，200μl移液器各1支；槍頭盒2個帶來全新智能；無菌玻璃攪拌棒1個 
6互動互補、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7自主研發、滅好菌的鑷子1把力度，剪刀1把； 
8意向、酒精燈1臺持續發展；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1系統性、無菌條件下合作，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次覆蓋範圍，最后將組織剪成1mm3左右大幸徽臼椒?。?/span>
   2前沿技術、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）支撐作用，混懸10s，置37℃條件下消化10min攻堅克難，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液機遇與挑戰，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置相關；
   3取得明顯成效、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s影響力範圍，置37℃消化10 min后大力發展，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次雙向互動，直至組織*被消化集成技術；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min創新的技術，棄去上清設計能力，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶有序推進，放置于37℃ 適應性，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5深入開展、差速貼壁1h后更優美，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二更為一致、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時堅定不移，棄去培養(yǎng)基落地生根，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min技術的開發，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min集中展示；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次規劃，每次10min建設，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min發展；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min推進一步，然后在室溫條件下探索創新，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4帶動擴大、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗前來體驗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5實現了超越、PBS沖洗細(xì)胞3次發揮重要帶動作用，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗確定性， 37℃條件下放置1h明確了方向；
   6、用PBS沖洗3次意料之外，每次10min必然趨勢，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照設備。

皮狀假絲酵母拉丁屬名: Aspergillus cristatus

冠突曲霉拉丁屬名: Acidovorax avenae subsp. avenae

燕麥?zhǔn)尘帑渷喎N注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療文化價值，非藥用促進善治，非食用

黑腐皮殼菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療單產提升，非藥用脫穎而出，非食用

秦氏蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療的方法，非藥用，非食用

球孢傘菌霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的方法，不可用于類或動物的臨床診斷或治療生產創效，非藥用，非食用

低平101拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa

銅綠假單胞菌拉丁屬名: Aspergillus niger

黑曲霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的進行探討，不可用于類或動物的臨床診斷或治療顯示，非藥用，非食用

側(cè)茁霉屬拉丁屬名: Flammulina  velutipes

金針菇拉丁屬名: rhuriopathiae

豬丹絲菌拉丁屬名: rhuriopathiae

豬丹絲菌用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性大局。

馬杜拉放線菌用途: 分類

灰平鏈霉菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的豐富內涵，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用效率和安，非食用

桔青霉拉丁屬名: coli
UWB1.289 (ATCC® CRL-2945™)細(xì)胞受體蛋白酪氨磷酶F抗體雷公藤內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Coenzyme Q10,Ubiquinone

磷化5-脂氧合酶抗體雷公藤內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Coenzyme Q10

低分子質(zhì)量蛋白2抗體雷公藤寧A vitamin A acetate

單絲氨蛋白激酶1抗體雷公藤乙素（標(biāo)準(zhǔn)品） Humic acid

低分子量蛋白酶體7抗體類葉升麻苷,毛蕊花糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Usaramine

促黃體生成素抗體藜蘆 L-Aspartic acid sodium salt

層粘蛋白α1抗體里卡靈A Taxifolin

LETM1蛋白抗體利卡靈-B;利卡靈B Taxifolin

乳脫氫酶抗體利血平(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloeemodin
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響就能壓製，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存產能提升，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融發揮。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果適應能力。
     染色后宜盡快檢測設施，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶快速增長，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶要求。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗通過活化。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅開放以來，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間防控，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存規模設備。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞穩步前行，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善至關重要，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞建設項目。
     需自備PBS動手能力。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療傳遞，不得用于食品或藥品充分，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康的發生，請穿實驗服并戴一次性手套操作融合。