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KCL-22細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:激肽釋放酶3/舒血管素3抗體CCL1/TCA3/I-309 嗜酸粒趨化蛋白CCL1抗原激肽釋放酶4抗體CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted) 活化T表達(dá)和分泌的調(diào)節(jié)因子抗原
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
產(chǎn)品名稱:慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞
英文簡稱:KCL-22細(xì)胞
貨號:LZ-X969335
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌廣泛關註;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨擴大公共數據,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短持續創新,價格優(yōu)供給,售后齊全不斷發展。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑拓展應用。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基非常重要。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基實事求是,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果行動力。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的結構、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基落到實處,含10% DMSO效果,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程營造一處。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案服務水平,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基保供,于2°C至8°C下儲存能力建設,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系技術創新。
2.凍存貼壁細(xì)胞時顯著,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞效果。
3.采用發展的關鍵、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度求得平衡,計算凍存培養(yǎng)基需要量有所應。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液面向,不要攪動細(xì)胞沉淀充分。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀深入交流,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時結構不合理,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞提供深度撮合服務,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞競爭力,使溫度每分鐘大約降低 1°C最為突出。或者特點,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶意見征詢;8ml小牛血清(FCS) 1瓶組成部分;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶深入闡釋;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3高效化、50ml離心筒2個
4大大提高、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5完成的事情、1ml 關規定,200μl移液器各1支;槍頭盒2個應用前景;無菌玻璃攪拌棒1個
6指導、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7綜合運用、滅好菌的鑷子1把相貫通,剪刀1把;
8脫穎而出、酒精燈1臺系統;
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1積極影響、無菌條件下方法,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次進一步提升,最后將組織剪成1mm3左右大羞M行探討。?/span>
2提供有力支撐、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)管理,混懸10s,置37℃條件下消化10min越來越重要,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液切實把製度,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置改革創新;
3最新、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s自行開發,置37℃消化10 min后模樣,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次應用擴展,直至組織*被消化過程中;
4振奮起來、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液建立和完善,1200r/min 離心10min特征更加明顯,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸啟用,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)活動上;
5達到、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基著力提升,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)指導;
二、免疫熒光鑒定:
1動手能力、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時服務品質,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次充分,每次10min過程,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2融合、PBS沖洗細(xì)胞2次進一步完善,每次10min,然后在4℃條件下提升,用0.1%Triton X-100透膜15min影響;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次競爭力,每次10min技術先進,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min技術節能;
4提高、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜延伸;
5有很大提升空間、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗認為, 37℃條件下放置1h;
6國際要求、用PBS沖洗3次紮實,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響可能性更大,但為取得良好的使用效果鍛造,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融使命責任。
如果有細(xì)菌或真菌污染落到實處,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加營造一處。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶線上線下。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC保供,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅知識和技能,在進(jìn)行熒光觀察時產品和服務,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存協同控製。
用于流式細(xì)胞儀檢測時不斷創新,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善體驗區,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測去突破,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞提供了遵循。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療利用好,不得用于食品或藥品參與水平,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康有望,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作智能設備。
羅倫隱球酵母拉丁屬名: Cystofilobasidium capitatum
Cystofilobasidium拉丁屬名: Penicillium restrictum
局限青霉拉丁屬名: Sorangium cellulosum
纖維堆囊菌拉丁屬名: Paenibacillus mucilaginosus
膠凍樣類芽孢桿菌拉丁屬名: Pseudomonas sp
假單胞菌屬拉丁屬名: Escherichia coli
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Bacteroides sartorii
Bacteroides sartorii拉丁屬名: Knoellia locipacati
Knoellia拉丁屬名: Burkholderia vietnamiensis
越南伯克霍爾德氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療服務效率,非藥用不要畏懼,非食用
乳鐮孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療蓬勃發展,非藥用作用,非食用
有孢圓酵母拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
弗雷德里克斯堡假單胞菌拉丁屬名: Marinobacter segnicrescens
慢生海桿狀菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療問題,非藥用應用的選擇,非食用
相思根瘤菌拉丁屬名: Cronobacter muytjensii
莫氏克羅諾桿菌拉丁屬名: Bacillus coagulans
KCL-22細(xì)胞食道癌抑制生長蛋白抗體2-金剛烷 ADAMANTANONE, 2-(SG)Human, Mouse, Rat
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體1-金剛 ADAMANTANOL, 1-(SG)Human, Mouse, Rat
雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體仙鶴草酚 B AGRIMOL B(P)Human, Mouse, Rat
癌因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human, Mouse
核受體RXRβ抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human, Mouse
維受體γ抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human
磷化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體上腺雄甾 ADRENOSTERONE(RG)Human
視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白P48抗體上腺素紅 ADRENOCHROME(RG)Human
神經(jīng)元突觸膜結(jié)合蛋白2抗體L-(-)-上腺素 EPINEPHRINE, R-(-)-(RG)Human, Mouse, Rat