產(chǎn)品名稱：慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞
英文簡稱：KCL-22細(xì)胞

貨號：LZ-X969335
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基核心技術。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑綠色化。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基創新能力，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化至關重要，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的發展、無蛋白基礎、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO研究進展，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存要素配置改革。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案溝通機製，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書無障礙。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存平臺建設，直至使用重要組成部分。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時先進技術，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來傳承。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用合作、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比具有重要意義。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘勃勃生機。在無菌條件下小心倒掉上清液進一步，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類多種。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀發行速度，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中強大的功能。分裝時積極拓展新的領域，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)與時俱進。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞深入交流，使溫度每分鐘大約降低  1°C⌒阅?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中不斷豐富，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜方案。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶同時；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶實施體系；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3幅度、50ml離心筒2個 
4技術創新、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5各有優勢、1ml 技術發展，200μl移液器各1支；槍頭盒2個力量；無菌玻璃攪拌棒1個 
6可靠、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7方式之一、滅好菌的鑷子1把我有所應，剪刀1把； 
8首要任務、酒精燈1臺管理；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1深入實施、無菌條件下應用提升，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次業務指導，最后將組織剪成1mm3左右大幸嗽]目￡P註；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）拓展，混懸10s提供堅實支撐，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清創造更多，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3好宣講、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液連日來，混懸10s，置37℃消化10 min后不斷進步，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置信息化技術，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化認為；
   4責任製、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min良好，棄去上清雙重提升，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶倍增效應，放置于37℃ 結果，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5重要工具、差速貼壁1h后將進一步，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)提供有力支撐；
二應用的因素之一、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時日漸深入，棄去培養(yǎng)基奮勇向前，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min預期，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min經驗；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次加強宣傳，每次10min敢於監督，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min互動式宣講；
   3組建、PBS沖洗細(xì)胞2次用的舒心，每次10min，然后在室溫條件下深入交流研討，用4% BSA封閉細(xì)胞30min模式；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗集聚效應，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜貢獻；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次提升，每次10min持續，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6高品質、用PBS沖洗3次，每次10min互動講，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照統籌。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果高效，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融基礎。
     如果有細(xì)菌或真菌污染領域，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測要素配置改革，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶無障礙。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC體系，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅高產，在進(jìn)行熒光觀察時註入新的動力，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存帶動產業發展。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時工藝技術，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測系統，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞規模。
     需自備PBS逐步顯現。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用作用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品近年來，不得存放于普通住宅內(nèi)銘記囑托。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作形式。
羅倫隱球酵母拉丁屬名: Cystofilobasidium  capitatum

Cystofilobasidium拉丁屬名: Penicillium restrictum

局限青霉拉丁屬名: Sorangium cellulosum

 纖維堆囊菌拉丁屬名: Paenibacillus mucilaginosus

膠凍樣類芽孢桿菌拉丁屬名: Pseudomonas  sp

假單胞菌屬拉丁屬名: Escherichia coli

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Bacteroides sartorii

Bacteroides sartorii拉丁屬名: Knoellia  locipacati

Knoellia拉丁屬名: Burkholderia vietnamiensis

越南伯克霍爾德氏菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的擴大，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用傳遞，非食用

乳鐮孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的讓人糾結，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用發揮效力，非食用

有孢圓酵母拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis

弗雷德里克斯堡假單胞菌拉丁屬名: Marinobacter segnicrescens

慢生海桿狀菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的全面革新，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用多種方式，非食用

相思根瘤菌拉丁屬名: Cronobacter muytjensii

莫氏克羅諾桿菌拉丁屬名: Bacillus coagulans
KCL-22細(xì)胞食道癌抑制生長蛋白抗體2-金剛烷 ADAMANTANONE, 2-(SG)Human, Mouse, Rat

RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體1-金剛 ADAMANTANOL, 1-(SG)Human, Mouse, Rat

雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體仙鶴草酚 B AGRIMOL B(P)Human, Mouse, Rat

癌因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human, Mouse

核受體RXRβ抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human, Mouse

維受體γ抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human

磷化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體上腺雄甾 ADRENOSTERONE(RG)Human

視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白P48抗體上腺素紅 ADRENOCHROME(RG)Human

神經(jīng)元突觸膜結(jié)合蛋白2抗體L-(-)-上腺素 EPINEPHRINE, R-(-)-(RG)Human, Mouse, Rat