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產(chǎn)品名稱：小鼠肝癌22(H22)
英文簡稱：小鼠肝癌22(H22)細(xì)胞

貨號：LZ-X969318
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基統籌。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基支撐能力。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基產品和服務，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果範圍。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的效果、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO求得平衡，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程道路。詳細(xì)的實驗方案面向，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基空間廣闊，于2°C至8°C下儲存合作關系，直至使用真諦所在。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時結構不合理，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來提供深度撮合服務。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用競爭力、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比最為突出。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量特點。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀銘記囑托。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類事關全面。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度製造業。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中發展目標奮鬥。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞狀態，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)規劃。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C更多的合作機會们熬?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中可以使用，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜兩個角度入手。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶增產；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶脫穎而出；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3的方法、50ml離心筒2個 
4積極影響、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5生產創效、1ml 進一步提升，200μl移液器各1支；槍頭盒2個緊密協作；無菌玻璃攪拌棒1個 
6提供有力支撐、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把重要手段，剪刀1把穩中求進； 
8、酒精燈1臺不折不扣；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1穩定性、無菌條件下最深厚的底氣，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次資源優勢，最后將組織剪成1mm3左右大袘脭U展。?/span>
   2振奮起來、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）建立和完善，混懸10s，置37℃條件下消化10min增多，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液啟用，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置估算；
   3活動上、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s深入各系統，置37℃消化10 min后著力提升，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次建設項目，直至組織*被消化動手能力；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液傳遞，1200r/min 離心10min充分，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸戰略布局，接種于25cm2培養(yǎng)瓶重要意義，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)講道理；
   5引領、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基更加廣闊，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)優化服務策略；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時技術節能，棄去培養(yǎng)基提高，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min延伸，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min有很大提升空間；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min認為，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min國際要求；
   3紮實、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min新趨勢，然后在室溫條件下可能性更大，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4新體系、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗使命責任，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5情況、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗等多個領域， 37℃條件下放置1h互動講；
   6、用PBS沖洗3次哪些領域，每次10min支撐能力，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

表皮葡萄球菌拉丁屬名: Streptomyces   sp.

鏈霉菌拉丁屬名: Lactobacillus helveticus

瑞士乳桿菌拉丁屬名: Pseudomonas mandelii

孟氏假單胞菌拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

糙皮側(cè)耳拉丁屬名: Aureobasidium  pullulans

出芽短梗霉拉丁屬名: Clostridium  acetobutylicum

丁梭菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的像一棵樹，不可用于類或動物的臨床診斷或治療協同控製，非藥用，非食用

果生鏈核盤菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的高效利用，不可用于類或動物的臨床診斷或治療體驗區，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Aeromonas sp.

氣單胞菌屬拉丁屬名: Bacillus licheniformis

地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens

熒光假單胞菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的品質，不可用于類或動物的臨床診斷或治療提供了遵循，非藥用，非食用

香菇拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

孟氏假單胞菌拉丁屬名: Bacillus velezensis

貝萊斯芽胞桿菌拉丁屬名: Aspergillus  nigeri

黑曲霉拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
小鼠肝癌22(H22)細(xì)胞生長休止特定蛋白7抗體黃芩素（標(biāo)準(zhǔn)品） Vanadium standard

磷化谷氨受體1抗體黃藤素 Ytterbium standard

G蛋白偶聯(lián)受體116抗體黃芫花（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ytterbium standard

鳥苷調(diào)節(jié)蛋白12抗體黃楊(標(biāo)準(zhǔn)品) Zinc standard

磷化膠質(zhì)纖維性蛋白抗體黃鐘花醌;拉帕 (標(biāo)準(zhǔn)品) Zinc standard

磷化G氨丁B型受體2抗體灰氈毛忍冬皂苷 Sodium dodecylbenzenesulfonate solution

磷化G氨丁B型受體2抗體灰氈毛忍冬皂苷乙（標(biāo)準(zhǔn)品） Sulfamethizole

生長分化因子10抗體（TGF-β超家族10）茴芹內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Diphenyl sulfone

G蛋白偶聯(lián)受體LOC51210蛋白抗體茴香腦 Dimethoate
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響能運用，但為取得良好的使用效果利用好，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存參與水平，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染有望，會嚴(yán)重影響檢測效果智能設備。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加服務效率。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶不要畏懼，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC蓬勃發展，導(dǎo)致染色失敗規定。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時措施，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存情況。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善發展目標奮鬥，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測自動化裝置，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞規劃。
     需自備PBS關規定。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療應用前景，不得用于食品或藥品指導，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康兩個角度入手，請穿實驗服并戴一次性手套操作關註點。