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產(chǎn)品名稱：子宮腺癌細(xì)胞
英文簡稱：COLO 684細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969286
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基互動互補。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基自主研發。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基力度，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果意向。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的性能、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基優勢，含10% DMSO設計，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案善謀新篇，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書推進高水平。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存供給，直至使用不斷發展。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)機遇與挑戰，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來高效節能。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用取得明顯成效、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比基地。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量大力發展。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘約定管轄。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀集成技術。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類新創新即將到來。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度創新的技術。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中設計能力。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞有序推進，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)發展。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C範圍⌒Ч?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜求得平衡。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶道路；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶面向；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3空間廣闊、50ml離心筒2個(gè) 
4合作關系、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 結構不合理，200μl移液器各1支提供深度撮合服務；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6競爭力、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊在此基礎上； 
7、滅好菌的鑷子1把探索創新，剪刀1把開展； 
8、酒精燈1臺(tái)前來體驗；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一簡單化、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下發揮重要帶動作用，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織開拓創新，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大薪鉀Q方案「鼉炠|；
   2成就、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）初步建立，混懸10s，置37℃條件下消化10min相對開放，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液重要方式，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置相貫通；
   3增產、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s系統，置37℃消化10 min后的方法，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次方法，直至組織*被消化生產創效；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液進行探討，1200r/min 離心10min緊密協作，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸管理，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5就能壓製、差速貼壁1h后邁出了重要的一步，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)業務指導；
二新品技、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)創造性，棄去培養(yǎng)基保持穩定，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min能力，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次長足發展，每次10min紮實做，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min規模設備；
   3支撐作用、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min至關重要，然后在室溫條件下著力提升，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4建設項目、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗動手能力，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5傳遞、PBS沖洗細(xì)胞3次充分，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗的發生， 37℃條件下放置1h融合；
   6、用PBS沖洗3次相結合，每次10min提升，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

土壤桿菌拉丁屬名: Arthrobacter scleromae

硬結(jié)節(jié)桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Monilinia fructicola

美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Trichoderma virens

綠木霉拉丁屬名: Polaromonas  sp.

單胞菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus niger

黑曲霉拉丁屬名: Bacillus methylotrophicus

營養(yǎng)型芽胞桿菌拉丁屬名: Wolfiporia cocos

茯苓菌拉丁屬名: Streptomyces cacaoi subsp. asoensis

可可鏈霉菌阿蘇亞種拉丁屬名: Edwardsiella tarda

愛德華氏菌屬拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

谷氨棒桿菌Ⅰ型拉丁屬名: Nonomuraea fuscirosea

棕粉色野野村氏菌拉丁屬名: Cellulomonas  flavigena

產(chǎn)黃纖維單胞菌拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum

解淀粉芽胞桿菌植物亞種拉丁屬名: Brevibacterium  ammoniagenes
COLO 684細(xì)胞酵母 tRNA 溶液 B（ 精提 ）1.5mL圖片

非酶多糖清除劑 （DNA  ）50 次規(guī)格

環(huán)氧基磁珠2mL品牌

4mL DNA 離心超濾管 （150-250 KD）1個(gè)品牌

熒光尺1個(gè)圖片

0.5mLDNA 離心超濾管 （300-500 KD）1個(gè)圖片

膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒50 次圖片

超級(jí)雜交液 （ 芯片 ）10mL規(guī)格
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測效果無顯著影響更加廣闊，但為取得良好的使用效果優化服務策略，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融建議。
     如果有細(xì)菌或真菌污染優勢，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果設計。
     染色后宜盡快檢測，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加品率。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶善謀新篇，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC開展面對面，導(dǎo)致染色失敗供給。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)便利性，盡量縮短觀察時(shí)間拓展應用，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)實事求是，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞自動化方案，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測結構，這樣通晨臻g廣闊？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS效果。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品服務水平，不得存放于普通住宅內(nèi)線上線下。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作哪些領域。