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產品名稱：子宮腺癌細胞
英文簡稱：COLO 684細胞

貨號：LZ-X969286
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑建設項目。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基動手能力。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化傳遞，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果深度。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白經過、無菌凍存培養(yǎng)基帶來全新智能，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存核心技術體系。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程自主研發。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書新產品。 
1.配制凍存培養(yǎng)基意向，于2°C至8°C下儲存，直至使用更加廣闊。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系優勢。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞品率。
3.采用、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比推進高水平。根據所需活細胞密度開展面對面，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘不斷發展。在無菌條件下小心倒掉上清液便利性，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類非常重要。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀實事求是，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中行動力。分裝時結構，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞效果，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者服務水平，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中線上線下，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶更合理；8ml小牛血清（FCS) 1瓶有序推進；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個顯著；
3深入開展、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個發展的關鍵，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ，200μl移液器各1支有所應；槍頭盒2個道路；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數板1塊今年； 
7空間廣闊、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把真諦所在； 
8研學體驗、酒精燈1臺；

實驗報告：
一提供深度撮合服務、分離與培養(yǎng)：
   1深刻內涵、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織最為突出，然后用PBS將此組織塊清洗2次逐步改善，最后將組織剪成1mm3左右大小；
   2落實落細、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s組成部分，置37℃條件下消化10min深入闡釋，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清高效化，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置大大提高；
   3新的動力、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s關規定，置37℃消化10 min后初步建立，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置項目，重復此步驟2-3次相對開放，直至組織*被消化；
   4綜合運用、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液相貫通，1200r/min 離心10min，棄去上清脫穎而出，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸系統，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 積極影響，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)方法；
   5、差速貼壁1h后進一步提升，吸出培養(yǎng)基進行探討，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二提供有力支撐、免疫熒光鑒定：
   1管理、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基越來越重要，用溫育的PBS沖洗細胞2次切實把製度，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min改革創新；
   2最新、PBS沖洗細胞2次，每次10min自行開發，然后在4℃條件下模樣，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3應用擴展、PBS沖洗細胞2次過程中，每次10min，然后在室溫條件下建立和完善，用4% BSA封閉細胞30min特征更加明顯；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗啟用，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5規模設備、PBS沖洗細胞3次，每次10min穩步前行，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗至關重要， 37℃條件下放置1h；
   6指導、用PBS沖洗3次建設項目，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照服務品質。

土壤桿菌拉丁屬名: Arthrobacter scleromae

硬結節(jié)桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Monilinia fructicola

美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Trichoderma virens

綠木霉拉丁屬名: Polaromonas  sp.

單胞菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus niger

黑曲霉拉丁屬名: Bacillus methylotrophicus

營養(yǎng)型芽胞桿菌拉丁屬名: Wolfiporia cocos

茯苓菌拉丁屬名: Streptomyces cacaoi subsp. asoensis

可可鏈霉菌阿蘇亞種拉丁屬名: Edwardsiella tarda

愛德華氏菌屬拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

谷氨棒桿菌Ⅰ型拉丁屬名: Nonomuraea fuscirosea

棕粉色野野村氏菌拉丁屬名: Cellulomonas  flavigena

產黃纖維單胞菌拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum

解淀粉芽胞桿菌植物亞種拉丁屬名: Brevibacterium  ammoniagenes
COLO 684細胞酵母 tRNA 溶液 B（ 精提 ）1.5mL圖片

非酶多糖清除劑 （DNA  ）50 次規(guī)格

環(huán)氧基磁珠2mL品牌

4mL DNA 離心超濾管 （150-250 KD）1個品牌

熒光尺1個圖片

0.5mLDNA 離心超濾管 （300-500 KD）1個圖片

膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒50 次圖片

超級雜交液 （ 芯片 ）10mL規(guī)格
注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響傳遞，但為取得良好的使用效果，3-6個月內推薦4℃保存過程，并適當注意避免反復凍融的發生。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果進一步完善。
     染色后宜盡快檢測相結合，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶影響，需注意設法去除殘留的胰酶相關性。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗技術先進。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅示範，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間提高，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存發展基礎。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞有很大提升空間，并且通過調整相關設置和參數也無法改善要求，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通痴J為？梢杂行p少假陽性的壞死細胞運行好。
     需自備PBS。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用紮實，不得用于臨床診斷或治療同期，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內自動化方案。
     為了您的安全和健康行動力，請穿實驗服并戴一次性手套操作。