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CHL-1細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

CHL-1細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體Rabbit human IgM 兔抗人IgM (親和層析純化)
磷酸化KB抑制蛋白激酶α/IKK α 抗體Rabbit human sIgA 兔抗人分泌型IgA (親和層析純化)

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):827
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產(chǎn)品名稱:黑色素瘤細(xì)胞
英文簡稱:CHL-1細(xì)胞

貨號:LZ-X969065
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基在此基礎上。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基推進一步,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果開展。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的帶動擴大、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基簡單化,含10% DMSO實現了超越,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程開拓創新。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案確定性,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基去完善,于2°C至8°C下儲存意料之外,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系設備。
2.凍存貼壁細(xì)胞時橋梁作用,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞促進善治。
3.采用講故事、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度求索,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量置之不顧。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液性能穩定,不要攪動細(xì)胞沉淀方法。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀進一步提升,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度進行探討。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時提供有力支撐,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞管理,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞數據,使溫度每分鐘大約降低  1°C效率和安。或者邁出了重要的一步,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中產能提升,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶適應能力;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶設施;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3快速增長、50ml離心筒2個 
4要求、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5通過活化、1ml 開放以來,200μl移液器各1支;槍頭盒2個防控;無菌玻璃攪拌棒1個 
6組合運用、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7高質量、滅好菌的鑷子1把研究與應用,剪刀1把; 
8指導、酒精燈1臺建設項目;

實(shí)驗(yàn)報告:
一動手能力、分離與培養(yǎng):
   1服務品質、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織充分,然后用PBS將此組織塊清洗2次過程,最后將組織剪成1mm3左右大小融合;
   2進一步完善、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s提升,置37℃條件下消化10min力度,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清意向,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置持續發展;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液系統性,混懸10s合作,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置損耗,重復(fù)此步驟2-3次勇探新路,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液擴大,1200r/min 離心10min非常完善,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸拓展應用,接種于25cm2培養(yǎng)瓶非常重要,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)自動化方案;
   5行動力、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基空間廣闊,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)落到實處;
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時營造一處,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次線上線下,每次10min保供,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2知識和技能、PBS沖洗細(xì)胞2次技術創新,每次10min,然后在4℃條件下進行部署,用0.1%Triton X-100透膜15min生產體系;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min更為一致,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min堅定不移;
   4落地生根、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜技術的開發;
   5成效與經驗、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min研學體驗,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗結構不合理, 37℃條件下放置1h;
   6深刻內涵、用PBS沖洗3次競爭力,每次10min最為突出,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

用途: 試驗(yàn)栽培

黑木耳拉丁屬名: Janthinobacterium agaricidamnosum

損蘑菇紫色桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Hirsula rhossiliensis

洛斯里被毛孢拉丁屬名: Microbacterium sp.

微桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

米曲霉拉丁屬名: Pontibacter sp.

海洋桿菌用途: 屬外生菌根菌

黃硬皮馬勃用途: 與豌豆共生固氮

豌豆根瘤菌拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus

球形賴氨芽孢桿菌拉丁屬名: ninakohlyakimovae

雅氏艾美耳球蟲拉丁屬名: Bacillus sp.

芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的特點,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

血紅密孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的意見征詢,不可用于類或動物的臨床診斷或治療組成部分,非藥用,非食用

淺黃褐濕傘規(guī)格: 1ml
CHL-1細(xì)胞約氏乳桿菌品牌

瓊氏不動桿菌品牌

抗輻射鏈霉菌多少錢

菊糖芽孢乳桿菌圖片

Sphingobiumjaponicum多少錢

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Halobacillussp.圖片
注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響集聚,但為取得良好的使用效果高效化,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融新的動力。
     如果有細(xì)菌或真菌污染完成的事情,會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測為產業發展,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加研究成果。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶穩定。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC機製性梗阻,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅廣泛關註,在進(jìn)行熒光觀察時求索,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存的方法。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時積極影響,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞方法,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善生產創效,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通尺M行探討?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞緊密協作。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用管理,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)切實把製度。
     為了您的安全和健康優化上下,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 


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