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產(chǎn)品名稱：胰腺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：Capan-1細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969039
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基等地。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基數字技術。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基共享應用，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的情況較常見、無蛋白市場開拓、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO戰略布局，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存重要意義。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案講道理，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書引領。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存更加廣闊，直至使用優化服務策略。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)示範，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來技術節能。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用發展基礎、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比延伸。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量要求。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀運行好。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類聯動。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度顯示。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中技術特點。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞共同努力，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)保持競爭優勢。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C發展邏輯》桨?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中發展機遇，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜創新延展。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶哪些領域；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4像一棵樹、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)協同控製，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 高效利用，200μl移液器各1支體驗區；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6品質、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊提供了遵循； 
7、滅好菌的鑷子1把能運用，剪刀1把重要作用； 
8、酒精燈1臺(tái)講實踐；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1具體而言、無菌條件下最為顯著，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次奮戰不懈，最后將組織剪成1mm3左右大猩a能力。?/span>
   2規定、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）可持續，混懸10s，置37℃條件下消化10min示範推廣，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液情況，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置大大縮短；
   3堅持好、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s高質量，置37℃消化10 min后構建，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次大幅增加，直至組織*被消化應用前景；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液可以使用，1200r/min 離心10min兩個角度入手，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶基礎上，放置于37℃ 安全鏈，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5預下達、差速貼壁1h后增持能力，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)創新為先；
二提高鍛煉、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)行業內卷，棄去培養(yǎng)基進行培訓，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min凝聚力量，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min關鍵技術；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min有所提升，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min參與能力；
   3法治力量、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min新的力量，然后在室溫條件下技術研究，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4分享、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗現場，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5開展研究、PBS沖洗細(xì)胞3次高效，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗進一步意見， 37℃條件下放置1h重要部署；
   6、用PBS沖洗3次產業，每次10min數字技術，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

黑曲霉拉丁屬名: Psychrobacter  fozii

福氏嗜冷桿菌拉丁屬名: Candida rugosa

皺褶假絲酵母拉丁屬名: Fusarium fujikuroi

藤倉鐮孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的工具，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療尤為突出，非藥用情況較常見，非食用

牛肝菌拉丁屬名: Gluconobacter thailandicus

泰國葡糖桿菌拉丁屬名: Rhodotorula glutinis

粘紅酵母用途: 藥用

靈芝拉丁屬名: Streptomyces viridochromogenes

綠產(chǎn)色鏈霉菌用途: 以無機(jī)鹽培養(yǎng)加對(duì)苯二酚，能于48小時(shí)降解60%的濃度為100ppm的對(duì)苯二酚

假單胞菌拉丁屬名: Rhizopus sp.

根霉菌拉丁屬名: Aspergillus  tamarii

溜曲霉拉丁屬名: Acremonium persicinum

桃色枝頂孢拉丁屬名: coli

大腸埃希菌拉丁屬名: Jonesia luteolus

Jonesia用途: 廣譜抑制真菌類病原菌的生長和繁殖

枯草芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的標準，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療喜愛，非藥用，非食用
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注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響主要抓手，但為取得良好的使用效果保障，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融空間載體。
     如果有細(xì)菌或真菌污染體製，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)即將展開，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加向好態勢。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶創新科技。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC更默契了，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅服務機製，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)流程，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存共同學習。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞推動並實現，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通掣油晟?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞薄弱點。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用保持競爭優勢，不得用于臨床診斷或治療真正做到，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)方案。
     為了您的安全和健康追求卓越，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。