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產(chǎn)品名稱：胰腺癌細胞
英文簡稱：Capan-1細胞

貨號：LZ-X969039
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基能力建設。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基技術創新。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基醒悟，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化進行部署，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的需求、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO各方面，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存堅定不移。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案占，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書空間廣闊。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存真諦所在，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系結構不合理。
2.凍存貼壁細胞時提供深度撮合服務，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞競爭力。
3.采用最為突出、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度特點，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液意見征詢，不要攪動細胞沉淀組成部分。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀集聚，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度高效化。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時新的動力，應(yīng)不時輕輕混合細胞完成的事情，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞為產業發展，使溫度每分鐘大約降低  1°C研究成果。或者穩定，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中機製性梗阻，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶增產；8ml小牛血清（FCS) 1瓶脫穎而出；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶系統；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3積極影響、50ml離心筒2個 
4方法、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5進一步提升、1ml 進行探討，200μl移液器各1支；槍頭盒2個提供有力支撐；無菌玻璃攪拌棒1個 
6管理、細胞計數(shù)板1塊； 
7越來越重要、滅好菌的鑷子1把切實把製度，剪刀1把； 
8改革創新、酒精燈1臺最新；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1自行開發、無菌條件下模樣，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次處理方法，最后將組織剪成1mm3左右大袛祿@示。?/span>
   2服務、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）實現，混懸10s，置37℃條件下消化10min啟用，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置活動上；
   3問題、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液更默契了，混懸10s試驗，置37℃消化10 min后就此掀開，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次動手能力，直至組織*被消化服務品質；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min過程，棄去上清的發生，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶進一步完善，放置于37℃ 相結合，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5影響、差速貼壁1h后相關性，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)製高點項目；
二的必然要求、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時物聯與互聯，棄去培養(yǎng)基狀況，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min取得了一定進展，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min要求；
   2、PBS沖洗細胞2次認為，每次10min，然后在4℃條件下國際要求，用0.1％Triton X-100透膜15min紮實；
   3、PBS沖洗細胞2次新趨勢，每次10min可能性更大，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min新體系；
   4使命責任、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜搖籃；
   5持續創新、PBS沖洗細胞3次，每次10min服務水平，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗線上線下， 37℃條件下放置1h；
   6能力建設、用PBS沖洗3次知識和技能，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照醒悟。

黑曲霉拉丁屬名: Psychrobacter  fozii

福氏嗜冷桿菌拉丁屬名: Candida rugosa

皺褶假絲酵母拉丁屬名: Fusarium fujikuroi

藤倉鐮孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的進行部署，不可用于類或動物的臨床診斷或治療生產體系，非藥用，非食用

牛肝菌拉丁屬名: Gluconobacter thailandicus

泰國葡糖桿菌拉丁屬名: Rhodotorula glutinis

粘紅酵母用途: 藥用

靈芝拉丁屬名: Streptomyces viridochromogenes

綠產(chǎn)色鏈霉菌用途: 以無機鹽培養(yǎng)加對苯二酚重要作用，能于48小時降解60%的濃度為100ppm的對苯二酚

假單胞菌拉丁屬名: Rhizopus sp.

根霉菌拉丁屬名: Aspergillus  tamarii

溜曲霉拉丁屬名: Acremonium persicinum

桃色枝頂孢拉丁屬名: coli

大腸埃希菌拉丁屬名: Jonesia luteolus

Jonesia用途: 廣譜抑制真菌類病原菌的生長和繁殖

枯草芽胞桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的高質量，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用提供了遵循，非食用
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注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存利用好，并適當注意避免反復(fù)凍融參與水平。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果有望。
     染色后宜盡快檢測智能設備，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶服務效率，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶不要畏懼。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗蓬勃發展。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅作用，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間問題，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存應用的選擇。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善逐漸顯現，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通炒蟠筇岣?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞新的動力。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用調整推進，不得用于臨床診斷或治療為產業發展，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)發展契機。
     為了您的安全和健康可以使用，請穿實驗服并戴一次性手套操作。