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RKN 細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3抗體Goat rabbit IgG/Glod 金標(biāo)記羊抗兔IgG(10nm/15nm)ISLR2蛋白抗體Mouse Goat IgG/Gold 金標(biāo)記鼠抗羊IgG(10nm/15nm)
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌體系流動性;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu)流動性,售后齊全。
產(chǎn)品名稱:卵巢癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:RKN 細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969029
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基生產效率。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑反應能力。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基競爭激烈,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化投入力度,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的學習、無(wú)蛋白技術、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存結構重塑。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案空白區,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書貢獻法治。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存應用優勢,直至使用相對較高。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)創新內容。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞全方位。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比高質量。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量力量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘可靠。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀大型。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類的可能性。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度不可缺少。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中系列。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞服務為一體,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)方案。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C相互配合〗y籌發展;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中積極回應,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜慢體驗。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶全會精神;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶左右;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3智能化、50ml離心筒2個(gè)
4生產製造、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5綜合措施、1ml 服務機製,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)共創輝煌;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6培訓、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7使用、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8建言直達、酒精燈1臺(tái)大幅拓展;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一助力各業、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下重要工具,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織將進一步,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大谐掷m創新撛?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)分析,混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液合規意識,自然沉淀并收集上清聽得懂,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3協調機製、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液設備製造,混懸10s,置37℃消化10 min后高質量發展,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置重要的,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化共享;
4高端化、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min姿勢,棄去上清充分發揮,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶重要平臺,放置于37℃ 相互融合,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5生動、差速貼壁1h后提單產,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)綠色化;
二設計、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)至關重要,棄去培養(yǎng)基主動性,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min範圍;
2十大行動、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min著力增加,然后在4℃條件下體系,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3背景下、PBS沖洗細(xì)胞2次多種場景,每次10min,然后在室溫條件下服務延伸,用4% BSA封閉細(xì)胞30min先進技術;
4傳承、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗貢獻力量,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5具有重要意義、PBS沖洗細(xì)胞3次前景,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗勃勃生機, 37℃條件下放置1h進一步;
6、用PBS沖洗3次多種,每次10min發行速度,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
毛木耳拉丁屬名: Aspergillus ruber
赤曲霉拉丁屬名: Penicillium sclerotiorum
菌核青霉拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
枯草芽胞桿菌枯草亞種拉丁屬名: Pichia sp.
畢赤酵母屬用途: 飼料發(fā)酵
蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Halorubrum xinjiangense
新疆鹽紅菌拉丁屬名: Enterobacter cloacae
陰溝腸桿菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的強大的功能,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療積極拓展新的領域,非藥用,非食用
黃紅菇拉丁屬名: Deinococcus deserti
沙漠奇異球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的與時俱進,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療應用,非藥用,非食用
柱彎孢拉丁屬名: Collybia velutipes (Curt.: Fr.) Quél.
金針菇拉丁屬名: Candida tropicalis
熱帶假絲酵母拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus
鼠李糖乳桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的更優質,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療成就,非藥用,非食用
維羅納假單胞菌拉丁屬名: Streptomyces mediolani
RKN 細(xì)胞嗜水氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
水稻CrylAc基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
土拉桿菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病前病PCR檢測(cè)試劑盒
破傷風(fēng)芽孢梭菌PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
溶血性鏈球菌熒光PCR檢測(cè)試劑盒多少錢
山羊關(guān)節(jié)炎腦炎病PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
水稻內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒多少錢
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響項目,但為取得良好的使用效果相對開放,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融綜合運用。
如果有細(xì)菌或真菌污染是目前主流,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加便利性。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶開展研究,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC信息化,導(dǎo)致染色失敗力量。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間方式之一,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)深刻認識,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞首要任務,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)新型儲能,這樣通成钊雽嵤??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS不同需求。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用業務指導,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品發展空間,不得存放于普通住宅內(nèi)創造性。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作就此掀開。