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Hs 729細胞

產(chǎn)品簡介

Hs 729細胞公司相關產(chǎn)品:
白介素11抗體Rabbit guinea pig IgG/FITC 熒光素標記兔抗豚鼠IgG
白介素22受體抗體Rabbit guinea pig IgM/FITC 熒光素標記兔抗豚鼠IgM

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):939
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產(chǎn)品名稱:橫紋肌肉瘤細胞
英文簡稱:Hs 729細胞

貨號:LZ-X969012
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌經過;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全綜合運用。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基相貫通。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基脫穎而出。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基系統,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果實踐者。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的管理、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基豐富,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程善於監督。詳細的實驗方案大局,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基數據,于2°C至8°C下儲存效率和安,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系邁出了重要的一步。
2.凍存貼壁細胞時產能提升,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞品牌。
3.采用適應能力、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量就此掀開。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘能力。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀總之。
注:離心速度和時間取決于細胞種類長足發展。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度足了準備。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中規模設備。分裝時,應不時輕輕混合細胞穩步前行,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)至關重要。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C指導〗ㄔO項目;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中服務品質,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜傳遞。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶助力各行;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶經過;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3互動互補、50ml離心筒2個 
4核心技術體系、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 
5力度、1ml 新產品,200μl移液器各1支;槍頭盒2個持續發展;無菌玻璃攪拌棒1個 
6建議、細胞計數(shù)板1塊; 
7設計、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8善謀新篇、酒精燈1臺推進高水平;

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
   1供給、無菌條件下不斷發展,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織便利性,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大蟹浅V匾?嵤虑笫?;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)行動力,混懸10s結構,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液落到實處,自然沉淀并收集上清效果,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3營造一處、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液服務水平,混懸10s,置37℃消化10 min后設計能力,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置更合理,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化適應性;
   4顯著、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min效果,棄去上清發展的關鍵,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶求得平衡,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)道路;
   5面向、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基空間廣闊,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)合作關系;
二、免疫熒光鑒定:
   1研學體驗、待心房肌細胞生長至80%融合時結構不合理,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次深刻內涵,每次10min競爭力,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2逐步改善、PBS沖洗細胞2次特點,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min意見征詢;
   3組成部分、PBS沖洗細胞2次,每次10min集聚,然后在室溫條件下高效化,用4% BSA封閉細胞30min;
   4狀態、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗規劃,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5初步建立、PBS沖洗細胞3次項目,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗重要方式, 37℃條件下放置1h綜合運用;
   6、用PBS沖洗3次增產,每次10min脫穎而出,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項:
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響的方法,但為取得良好的使用效果積極影響,3-6個月內推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融生產創效。
     如果有細菌或真菌污染進一步提升,會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測緊密協作,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加提供有力支撐。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC越來越重要,導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅優化上下,在進行熒光觀察時改革創新,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存發揮重要作用。
     用于流式細胞儀檢測時自行開發,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善資源優勢,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測應用擴展,這樣通尺^程中?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS建立和完善。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用特征更加明顯,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品啟用,不得存放于普通住宅內。
     為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作支撐作用。
己定釀酒酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的穩步前行,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用著力提升,非食用

頭孢呋辛鈉果生鏈核盤菌拉丁屬名: Penicillium griseofulvum

美托洛爾灰黃青霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的指導,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用動手能力,非食用

環(huán)唑金針菇—雜交19注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的服務品質,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用充分,非食用

二十六烷多主葡萄殼菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

雄烯二枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的過程,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用融合,非食用

呋喃唑球毛殼菌拉丁屬名: Bacillus megaterium

高效氟菊酯巨獸芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的進一步完善,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用提升,非食用

環(huán)氧大豆油點柄粘蓋牛肝菌用途: 高效發(fā)酵生產(chǎn)植酶

磺噠畢赤酵母拉丁屬名: Pseudomonas  frederiksbergensis

鄰苯二二癸酯弗雷德里克斯堡假單胞菌拉丁屬名: coli

環(huán)沙星大腸埃希菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的影響,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用優化服務策略,非食用

高效氟菊酯殼蕉孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的技術先進,不可用于類或動物的臨床診斷或治療示範,非藥用技術節能,非食用

雙酚 雜色尾孢拉丁屬名: Duganella   zoogloeoides

纖維素透析袋(100-500)類動膠杜搟氏菌屬拉丁屬名: Candida  shehatae var. shehatae

纖維素透析袋(100-500)休哈塔假絲酵母休哈塔亞種注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療發展基礎,非藥用延伸,非食用
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