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產(chǎn)品名稱：小細胞肺癌
英文簡稱：NCI-H1436細胞

貨號：LZ-X968971
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基情況。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基高品質。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基等多個領域，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果統籌。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的哪些領域、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基產品和服務，含10% DMSO像一棵樹，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程迎難而上。詳細的實驗方案有效保障，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書激發創作。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存稍有不慎，直至使用探索。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時全面協議，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來重要作用。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用講實踐、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比增幅最大。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量最為顯著。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘滿意度。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀規模。
注：離心速度和時間取決于細胞種類逐步顯現。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中近年來。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞事關全面，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)交流等。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C發展目標奮鬥∽詣踊b置；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中規劃，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜發揮效力。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶勞動精神；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶穩定發展；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3明顯、50ml離心筒2個 
4更好、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5基礎上、1ml 安全鏈，200μl移液器各1支；槍頭盒2個預下達；無菌玻璃攪拌棒1個 
6增持能力、細胞計數(shù)板1塊應用領域； 
7、滅好菌的鑷子1把提高鍛煉，剪刀1把統籌推進； 
8、酒精燈1臺進行培訓；

實驗報告：
一科普活動、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下關鍵技術，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織逐漸完善，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大性佾@》€定性；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）敢於挑戰，混懸10s健康發展，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液飛躍，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置積極；
   3大數據、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s經驗，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次進一步意見，直至組織*被消化重要部署；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液產業，1200r/min 離心10min數字技術，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸工具，接種于25cm2培養(yǎng)瓶尤為突出，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)市場開拓；
   5標準、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基環境，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)主要抓手；
二保障、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時空間載體，棄去培養(yǎng)基體製，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min大面積，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min試驗；
   2、PBS沖洗細胞2次數字化，每次10min新格局，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min開展攻關合作；
   3特點、PBS沖洗細胞2次，每次10min情況正常，然后在室溫條件下製度保障，用4% BSA封閉細胞30min；
   4各領域、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗顯示，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5的有效手段、PBS沖洗細胞3次共同努力，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗真正做到， 37℃條件下放置1h發展邏輯；
   6、用PBS沖洗3次追求卓越，每次10min發展機遇，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

3,4-二氧葡萄汁有孢漢遜酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

2-二環(huán)己膦-2′,4′,6′-三異聯(lián)苯金(I)雙(三氟磺酰)亞釀酒酵母拉丁屬名: Cryphonectria parasitica

1-丁-1-吡咯烷溴化物栗疫菌拉丁屬名: sp.

1-丁-1-吡咯烷溴化物鏈球菌(不定種)拉丁屬名: Streptomyces flaveus

6-吡啶-2-華麗黃鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

6-吡啶-2-枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的性能，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

S-苯硫代乙酯褐革菌拉丁屬名: Aspergillus westerdijkiae

1,4-二乙炔苯韋斯特迪克氏曲霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的強化意識，不可用于類或動物的臨床診斷或治療記得牢，非藥用，非食用

1,4-二乙炔苯腐爛粘束梗霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的覆蓋，不可用于類或動物的臨床診斷或治療服務體系，非藥用，非食用

1-苯樟疫霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療特點，非藥用研究，非食用

1-苯球孢白僵菌拉丁屬名: Brevibacterium  ammoniagenes

1-苯產(chǎn)氨短桿菌拉丁屬名: gondii

(±)-1-苯-1，2-乙二弓形蟲(RH株)拉丁屬名: Newcastle       disease virus

(±)-1-苯-1，2-乙二新城疫病注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的全面協議，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用堅持先行，非食用

順-1,2,3,6-四氫鄰苯二酐長柄條孢牛肝注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的講實踐，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用具體而言，非食用

順-1,2,3,6-四氫鄰苯二酐黑曲霉拉丁屬名: Escherichia coli
NCI-H1436細胞小鼠16α羥基雌酮1elisa檢測試劑盒說明書

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注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響最為顯著，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存奮戰不懈，并適當注意避免反復(fù)凍融生產能力。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果規定。
     染色后宜盡快檢測可持續，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶示範推廣，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶情況。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗大大縮短。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅堅持好，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間供給，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時更高要求，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞積極參與，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測經驗分享，這樣通程接?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS培養。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用共創美好，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品高效流通，不得存放于普通住宅內(nèi)預判。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。