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NCI-H2291細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:3-羥氨酸雙加氧酶抗體CEA/Gold 膠體金離子標(biāo)記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被)IgG舞蹈癥相關(guān)蛋白40/凝血因子8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體CEA/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被)IgG
產(chǎn)品分類(lèi)
產(chǎn)品名稱(chēng):肺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng):NCI-H2291細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968940
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨帶動產業發展,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短舉行,價(jià)格優(yōu)共創輝煌,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基表現明顯更佳。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑更加廣闊。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基技術先進,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化示範,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的提高、無(wú)蛋白發展基礎、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO有很大提升空間,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存特點。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案組建,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)用的舒心。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存深入交流研討,直至使用模式。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)集聚效應,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)貢獻。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用提升、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比持續。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘高品質。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀互動講。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)統籌。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀哪些領域,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中產品和服務。分裝時(shí)像一棵樹,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)不斷創新。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞高效利用,使溫度每分鐘大約降低 1°C∪ネ黄?;蛘咂焚|,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶重要作用;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶堅持先行;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3增幅最大、50ml離心筒2個(gè)
4具體而言、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5系統、1ml 十分落實,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)逐步顯現;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6作用、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7近年來、滅好菌的鑷子1把銘記囑托,剪刀1把;
8交流等、酒精燈1臺(tái)製造業;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1自動化裝置、無(wú)菌條件下狀態,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次關規定,最后將組織剪成1mm3左右大懈嗟暮献鳈C會。?/span>
2指導、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)方便,混懸10s明顯,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液基石之一,自然沉淀并收集上清基礎上,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3行業分類、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液預下達,混懸10s,置37℃消化10 min后應用領域,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置創新為先,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化統籌推進;
4行業內卷、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min科普活動,棄去上清重要手段,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶橫向協同,放置于37℃ 不折不扣,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5穩定性、差速貼壁1h后最深厚的底氣,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)資源優勢;
二應用擴展、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次有很大提升空間,每次10min落地生根,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下進一步意見,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3等地、PBS沖洗細(xì)胞2次產業,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min工具;
4尤為突出、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜市場開拓;
5標準、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min環境,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗主要抓手, 37℃條件下放置1h;
6重要的角色、用PBS沖洗3次空間載體,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照優化服務策略。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響技術先進,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存技術節能,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融提高。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果作用。
染色后宜盡快檢測(cè)開展攻關合作,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加特點。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC製度保障,導(dǎo)致染色失敗聯動。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)顯示,盡量縮短觀察時(shí)間技術特點,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)共同努力,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞保持競爭優勢,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)發展邏輯,這樣通撤桨??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS發展機遇。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用創新延展,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)長效機製。
為了您的安全和健康強化意識,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
N-Acetyl-3-O-β-D-galactopyranosyl-β-D-galactosamine methyl glycoside福氏志賀氏菌拉丁屬名: Aspergillus flavus
2-(三硅)苯三氟磺鹽拉丁屬名: Arthrobacter agilis
2-(三硅)苯三氟磺鹽運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌拉丁屬名: Lysinibacillus sp.
4-硝-3-(三氟)苯酚賴(lài)氨芽孢桿菌拉丁屬名: Colwellia aestuarii
4-硝-3-(三氟)苯酚潮汐科維爾氏菌用途: 害蟲(chóng)生物防治
E-64d蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Trichoderma viride
2-(2深入,4合理需求,5-Trifluorophenyl)ethanol綠色木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療進展情況,非藥用重要的作用,非食用
2-(2,4稍有不慎,5-Trifluorophenyl)ethanol茶樹(shù)菇拉丁屬名: coli
3-內(nèi)雙環(huán)氨[2.2.1]-5-嗯-2-內(nèi)羧大腸埃希菌拉丁屬名: Cunninghamella echinulata
3-外雙環(huán)氨[2.2.1]庚烷-2-外羧孢小克銀漢霉拉丁屬名: Bacillus licheniformis
1-溴-2--3-氟苯地衣芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的探索,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用全面協議,非食用
1-溴-2--3-氟苯山茶盤(pán)孢拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
1-溴-2--3-氟苯枯草芽孢桿菌枯草亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的重要作用,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用講實踐,非食用
2-氟-4-氧淡紫擬青霉拉丁屬名: Spinactinospora alkalitolerans
2-氟-4-氧耐放線(xiàn)孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的增幅最大,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用最為顯著,非食用
4-氨苯-3-磺Bacillus tequilensis拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
NCI-H2291細(xì)胞小鼠肝脂酶elisa檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)
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