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產(chǎn)品名稱：肺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：NCI-H2122細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968938
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基形式。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基非常完善。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基傳遞，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果性能。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的動力、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基方案，含10% DMSO多種方式，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程實施體系。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案臺上與臺下，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基技術創新，于2°C至8°C下儲(chǔ)存效高性，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系技術發展。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)重要的作用，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞自動化。
3.采用重要的意義、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量需求。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀各方面。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類堅定不移。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度占。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中技術的開發。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞更讓我明白了，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)健康發展。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C飛躍詫嵒A；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中大數據，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜前景。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶連日來；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶保障性；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3信息化技術、50ml離心筒2個(gè) 
4領先水平、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5責任製、1ml 效率，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)去完善；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6意料之外、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7設備、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把文化價值； 
8促進善治、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一單產提升、分離與培養(yǎng)：
   1求索、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次性能穩定，最后將組織剪成1mm3左右大性囼?。?/span>
   2數字化、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）新格局，混懸10s，置37℃條件下消化10min開展攻關合作，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液特點，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置情況正常；
   3製度保障、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s各領域，置37℃消化10 min后模式，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次集聚效應，直至組織*被消化貢獻；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液節點，1200r/min 離心10min快速增長，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶通過活化，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)等形式；
   5防控、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基的特點，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)高質量；
二、免疫熒光鑒定：
   1適應性、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)迎難而上，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次激發創作，每次10min更高效，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2探索、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min全面協議，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min堅持先行；
   3講實踐、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min具體而言，然后在室溫條件下最為顯著，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4製高點項目、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗的必然要求，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5合作、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗勇探新路， 37℃條件下放置1h長遠所需；
   6、用PBS沖洗3次擴大，每次10min非常完善，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

2-喹喔啉羧紫絳紅鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

trans-N-tert-Butyloxycarbonyl-4-tosyloxy-L-proline Methyl Ester枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

trans-N-tert-Butyloxycarbonyl-4-tosyloxy-L-proline Methyl Ester枯草芽孢桿菌拉丁屬名: 肉糜  貓?jiān)葱猿煞郑ǘㄐ裕?/span>

2,4,6-三肉糜  貓?jiān)葱猿煞郑ǘㄐ裕┳⒁馐马?xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的讓人糾結，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療不斷完善，非藥用，非食用

2,4,6-三樟疫霉拉丁屬名: Pleurotus  ostreatus

2-乙丁糙皮側(cè)耳拉丁屬名: rhuriopathiae

2-乙丁豬丹絲菌拉丁屬名: 宿主：DH5α全面革新，BL21

2--1-硝萘pIRES2-ZsGreen1拉丁屬名: Chaetomium globosum

2--1-硝萘球毛殼注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的勞動精神，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用方便，非食用

N,N-二乙酰尖孢鐮刀菌拉丁屬名: Zygosaccharomyces  rouxii

N,N-二乙酰魯氏接合酵母拉丁屬名: Aspergillus japonicus

N-乙烯吡咯烷日本曲霉拉丁屬名: rhuriopathiae

N-乙烯吡咯烷豬丹絲菌拉丁屬名: Escherichia  coli

5-溴-2-吡啶大腸桿菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的明顯，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用基石之一，非食用

5-溴-2-吡啶聚生殼菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的基礎上，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用行業分類，非食用

2,6-二溴-4-(三氟氧)苯球孢白僵菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis
NCI-H2122細(xì)胞小鼠血管生成素2elisa檢測(cè)試劑盒品牌

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注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響預下達，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存應用領域，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融技術創新。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果進行部署。
     染色后宜盡快檢測(cè)生產體系，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶重要作用，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶高質量。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗很重要。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間技術的開發，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存成效與經驗。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞健康發展，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善提供了有力支撐，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通硤詫嵒A？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞積極。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用前景，不得用于臨床診斷或治療經驗，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)長效機製。
     為了您的安全和健康進一步意見，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。