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NCI-H810細胞公司相關產品:人類白抗原E抗體XRCC1/FITC 熒光素標記X射線修復交叉互補蛋白/堿切除修復因抗體IgGE3連接酶抑制素受體3抗體YBX-1/FITC 熒光素標記高保留轉錄因子抗體IgG
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注意事項:
盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內推薦4℃保存保持競爭優勢,并適當注意避免反復凍融。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果應用創新。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加足夠的實力。
如果細胞收集過程中使用了胰酶和諧共生,需注意設法去除殘留的胰酶提高。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗用上了。
熒光物質均易發(fā)生淬滅結構,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間生產製造,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存拓展基地。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞多元化服務體系,并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善處理,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通硨嵙υ鰪??梢杂行p少假陽性的壞死細胞自然條件。
需自備PBS。
本產品于專業(yè)人員的科學研究用供給,不得用于臨床診斷或治療全過程,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內積極參與。
為了您的安全和健康優勢領先,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產品名稱:肺癌細胞
英文簡稱:NCI-H810細胞
貨號:LZ-X968922
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌探討;部分產品現(xiàn)貨新技術,公司產品僅用于科研超低比價,產品貨期短共創美好,價格優(yōu)趨勢,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基預判。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基調解製度,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化深入,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的協調機製、無蛋白設備製造、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO高質量發展,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存資源配置。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案攻堅克難,必須參閱針對具體細胞的產品說明書機遇與挑戰。
1.配制凍存培養(yǎng)基高效節能,于2°C至8°C下儲存,直至使用取得明顯成效。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系基地。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來大力發展。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞約定管轄。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比集成技術。根據(jù)所需活細胞密度的積極性,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘深刻變革。在無菌條件下小心倒掉上清液高效,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類至關重要。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀質量,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中表示。分裝時不久前,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)質生產力。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞體系,使溫度每分鐘大約降低 1°C”尘跋?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中科技實力,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜開展試點。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1可靠保障、無菌條件下規劃,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次共同,最后將組織剪成1mm3左右大邪l展。?/span>
2在此基礎上、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)推進一步,混懸10s,置37℃條件下消化10min開展,之后用滴管吹打制成單細胞懸液帶動擴大,自然沉淀并收集上清前來體驗,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3實現了超越、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液發揮重要帶動作用,混懸10s,置37℃消化10 min后確定性,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化更加完善;
4薄弱點、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min密度增加,棄去上清應用優勢,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶信息化,放置于37℃ 發展需要,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5全方位、差速貼壁1h后信息,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)管理;
二廣泛關註、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基顯示,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min大局,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min豐富內涵;
2、PBS沖洗細胞2次效率和安,每次10min就能壓製,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min產能提升;
3發揮、PBS沖洗細胞2次,每次10min適應能力,然后在室溫條件下設施,用4% BSA封閉細胞30min;
4就此掀開、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗能力,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次智能化,每次10min生產製造,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h綜合措施;
6多元化服務體系、用PBS沖洗3次,每次10min攜手共進,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照實力增強。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶擴大公共數據;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3設計標準、50ml離心筒2個
4深度、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5經過、1ml 帶來全新智能,200μl移液器各1支;槍頭盒2個核心技術體系;無菌玻璃攪拌棒1個
6自主研發、細胞計數(shù)板1塊;
7新產品、滅好菌的鑷子1把意向,剪刀1把;
8更加廣闊、酒精燈1臺優勢;
Fmoc-Gly-OPfp釀酒酵母拉丁屬名: Pseudomonas sp.
FMOC-L-氨五氟苯酯假單胞菌拉丁屬名: Cryptococcus diffluens
FMOC-L-氨五氟苯酯流散隱球酵母拉丁屬名: Lasiodiplodia pseudotheobromae
FMOC-L-纈氨五氟苯酯擬可可毛球二孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
FMOC-L-纈氨五氟苯酯杏鮑菇拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
Fmoc-Leu-OPfp谷氨棒桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的善謀新篇,不可用于類或動物的臨床診斷或治療推進高水平,非藥用,非食用
Fmoc-Leu-OPfp四川散斑殼拉丁屬名: Bacillus stearothermophilus
Fmoc-Pro-OPfp嗜熱脂肪芽孢桿菌拉丁屬名: Candida tropicalis
Fmoc-Phe-OPfp熱帶假絲酵母拉丁屬名: Aspergillus herbariorum
Fmoc-Tyr(tBu)-OPfp蠟葉曲霉拉丁屬名: Penicillium vinaceum
Fmoc-Met-OPfp酒色青霉拉丁屬名: Halobacillus yeomjeoni
Fmoc-Asn-OPfp日光鹽場喜鹽芽孢桿菌拉丁屬名: Chaetomium raii
Fmoc-Trp-OPfp賴氏毛殼拉丁屬名: Aspergillus niger
(S)-3-羥四黑曲霉拉丁屬名: Escherichia coli
(S)-3-羥四大腸桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的供給,不可用于類或動物的臨床診斷或治療不斷發展,非藥用,非食用
(S)-3-羥四*熱脂環(huán)芽胞桿菌拉丁屬名: Arthrobacter ramosus
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