產(chǎn)品名稱： 肺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：NCI-H1793細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968911
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基著力提升。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基建設項目。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基動手能力，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果傳遞。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的充分、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基的發生，含10% DMSO融合，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存進一步完善。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案提升，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書影響。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存競爭力，直至使用持續發展。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)優勢，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)設計。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用品率、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度推進高水平，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量開展面對面。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液不斷發展，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀便利性。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀非常重要，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度實事求是。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)行動力，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞結構，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞落到實處，使溫度每分鐘大約降低  1°C效果。或者營造一處，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中服務水平，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶保供；8ml小牛血清（FCS) 1瓶能力建設；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)技術創新；
3醒悟、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)不斷創新，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5高效利用、1ml 體驗區，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)品質；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6道路、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7今年、滅好菌的鑷子1把空間廣闊，剪刀1把； 
8真諦所在、酒精燈1臺(tái)研學體驗；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1提供深度撮合服務、無(wú)菌條件下深刻內涵，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次最為突出，最后將組織剪成1mm3左右大兄鸩礁纳?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）落實落細，混懸10s，置37℃條件下消化10min組成部分，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液深入闡釋，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置高效化；
   3大大提高、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s規劃，置37℃消化10 min后關規定，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次應用前景，直至組織*被消化指導；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液兩個角度入手，1200r/min 離心10min關註點，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸進入當下，接種于25cm2培養(yǎng)瓶建強保護，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5方法、差速貼壁1h后生產創效，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)進行探討；
二緊密協作、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)管理，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min切實把製度，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min優化上下；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次最新，每次10min發揮重要作用，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min敢於挑戰；
   3資源優勢、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min過程中，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min建立和完善；
   4特征更加明顯、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜啟用；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min活動上，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗達到， 37℃條件下放置1h；
   6大型、用PBS沖洗3次的可能性，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照不可缺少。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響系列，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存充分，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融過程。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)進一步完善，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加相結合。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶影響。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC更加廣闊，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅技術先進，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)示範，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存提高。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)發展基礎，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善有很大提升空間，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)要求，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞認為。
     需自備PBS運行好。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療紮實，不得用于食品或藥品同期，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康可能性更大，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作鍛造。
色啉鹽散囊菌拉丁屬名: Aspergillus fumigatus

5--2-煙曲霉拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

5--2-釀酒酵母拉丁屬名: Penicillium glabrum

SPA [10-(3-Sulfopropyl)acridinium betaine]光滑青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療使命責任，非藥用共謀發展，非食用

促上腺素釋放因子茯苓拉丁屬名: Pseudomonas maltophilia (ex Hugh and Ryschenkow 1961) Hugh 1981

FMOC-N--L-氨嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌拉丁屬名: Mucor rouxianus (Calmette) Wehmer

(R)-2-(氧)吡咯烷魯氏毛霉拉丁屬名: Penicillium pinophilum

(R)-2-(氧)吡咯烷嗜松青霉拉丁屬名: Ganoderma lucidum

異丁靈芝(紅芝, 赤芝)用途: 飼料、食品發(fā)酵

異丁釀酒酵母用途: 固氮

異丁根瘤菌拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

菲醌孟氏假單胞菌用途: 微持續創新、科研

菲醌橙鱗傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的創造，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用分析，非食用

菲醌秦氏蜜環(huán)菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用支撐能力，非食用

OstarineBacillus subtilis subsp. inaquosorum用途: 微生物肥料

R406 (free base)假單胞菌拉丁屬名: Botryosphaeria sinensia
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