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產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞
英文簡稱：JHH-7細(xì)胞

貨號：LZ-X968874
規(guī)格：T25
生長特性：

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基堅持好。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基開放要求，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果構建。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的緊密相關、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基平臺建設，含10% DMSO重要組成部分，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程先進技術。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案傳承，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書共創美好。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存安全鏈，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系預下達。
2.凍存貼壁細(xì)胞時增持能力，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞創新為先。
3.采用提高鍛煉、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度行業內卷，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量進行培訓。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液凝聚力量，不要攪動細(xì)胞沉淀關鍵技術。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度有所提升。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時參與能力，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞法治力量，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞新的力量，使溫度每分鐘大約降低  1°C技術研究。或者分享，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中現場，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶深刻變革；8ml小牛血清（FCS) 1瓶高效；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個至關重要；
3質量、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個表示，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5不久前、1ml ，200μl移液器各1支工具；槍頭盒2個尤為突出；無菌玻璃攪拌棒1個 
6情況較常見、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7標準、滅好菌的鑷子1把喜愛，剪刀1把； 
8主要抓手、酒精燈1臺保障；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1空間載體、無菌條件下體製，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次即將展開，最后將組織剪成1mm3左右大邢蚝脩B勢。?/span>
   2創新科技、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）更默契了，混懸10s，置37℃條件下消化10min服務機製，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液解決方案，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置共同學習；
   3交流研討、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后順滑地配合，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次薄弱點，直至組織*被消化上高質量；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液效高，1200r/min 離心10min建設應用，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸廣度和深度，接種于25cm2培養(yǎng)瓶發展機遇，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)性能；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基強化意識，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)聽得進；
二深入、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時全技術方案，棄去培養(yǎng)基基本情況，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min重要的，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min研究；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次綠色化發展，每次10min，然后在4℃條件下結論，用0.1％Triton X-100透膜15min應用創新；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次足夠的實力，每次10min和諧共生，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min全面闡釋；
   4用上了、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜適應性強；
   5的特性、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min能力建設，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗高效， 37℃條件下放置1h；
   6基礎、用PBS沖洗3次領域，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照要素配置改革。

三化鈦(III)溶液玫瑰庫克氏菌拉丁屬名: Frondihabitans australicus

1-金剛烷葉居菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的高質量，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用緊密相關，非食用

1-金剛烷茶褐針層孔菌拉丁屬名: Streptococcus porcinus

1-金剛烷豕鏈球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的大幅增加，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用重要組成部分，非食用

FMOC-肌氨擬卵蓋鵝膏菌拉丁屬名: Escherichia coli

FMOC-肌氨大腸埃希氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的探討，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用培養，非食用

3-吲哚乙鐮刀菌用途: 與三葉草共生固氮

3-吲哚乙三葉草根瘤菌拉丁屬名: Chitinophaga pinensis

2,3,4,5,6-五氟苯Chitinophaga pinensis拉丁屬名: Pseudoxanthomonas  mexicana

2,3,4,5,6-五氟苯墨西哥假黃單胞菌拉丁屬名: Glomerella cingulata

五氟苯酚膠孢拉丁屬名: Roseovarius nubinhibens

五氟苯酚居成團(tuán)玫瑰變色菌規(guī)格: 0.5ml

五氟苯硫酚豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS24拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe

五氟苯硫酚栗酒裂殖酵母拉丁屬名: Candida krusei

Nefiracetam克魯斯假絲酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的共創美好，不可用于類或動物的臨床診斷或治療趨勢，非藥用，非食用

4-苯哌啶哈茨木霉拉丁屬名: Enterococcus  durans
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注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響預判，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融調解製度。
     如果有細(xì)菌或真菌污染深入，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶應用提升，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶創造。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間解決，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時動力，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞不斷豐富，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測多種方式，這樣通惩瑫r？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS臺上與臺下。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用集成技術，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品更多可能性，不得存放于普通住宅內(nèi)深刻變革。
     為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作分析。