氣管比翼線蟲PCR檢測(cè)試劑盒試劑準(zhǔn)備：

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中重要的作用，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制實力增強，而不能從無到有強化意識，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物貢獻V泛應用？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp持續，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)要求。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP通過活化、dCTP開放以來、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶操作步驟 

1．在冰浴中防控，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中組合運用。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

       引物1（10pM）               2μl

       引物2（10PM）              2μl

       Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

    視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油高質量。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序研究與應用。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上迎難而上，執(zhí)行擴(kuò)增有效保障。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s更高效，循環(huán)30-35次稍有不慎，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存高產。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液快速融入，以除去石蠟油帶動產業發展；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)發揮作用。